GX液相色谱法测定畜禽肉中土霉素四环素金霉素残留量

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

1.实验目的 据标准GB/T 14931.1-94测定畜禽肉中土霉素四环素金霉素残留量Zdi检出浓度为：0.15，0.20，0.65mg/kg 2.试验原理 样品经提取，微孔滤膜过滤后直接进样，用反相色谱分离，紫外检测器检测，与标准比较定量，出峰顺序为土霉素四环素金霉素标准加法定量 3.试剂 3.1乙腈(分析纯) 3.20.01 mol/L磷酸二氢钠溶液：称取1.56 g(±0.01g)磷酸二氢钠(NaH2PH4.2H2O)溶于蒸馏水中，定容到100 mL，经过滤器过滤（选用微孔滤膜为0.45 m），备用 3.3土霉素(OTC)标准溶液：称取土霉素0.0100g(±0.0001g)，用0.1mol/L盐酸溶液每毫升含土霉素1mg 3.4四环素(TC)标准溶液：称取四环素0.0100g(±0.001g)，用0.01 mol/L盐酸溶液溶解并定容10.00 mL，此溶液每毫升含四环素1mg 3.5金霉素(CTC)标准溶液：称取金霉素0.0100g(±0.0001g)，溶于蒸馏水并定容成10.00mL，此溶液每毫升含金霉素1mg以上标准品均按1000单位/mg折算3.3～3.5溶液应于4以下保存，可使用1周 3.6混合标准溶液：取3.33.4标准溶液各1.00 mL，取3.5标准溶液2.00 mL，置于10mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度此溶液每毫升含土霉素四环素各0.1mg，金霉素0.2mg，临时现配 3.75％高氯酸溶液 4.仪器 4.1 GX液相色谱仪(HPLC)：具紫外检测器 4.2 振荡器：天津市恒奥科技发展有限公司 4.3 过滤器：天津市恒奥科技发展有限公司 4.4 超声波：天津市恒奥科技发展有限公司 5.色谱条件 5.1柱：ODS-C18 (5 m)6.2mm×15 cm 5.2检测波长：355 nm 5.3灵敏度：0.002 AUFS 5.4柱温：室温 5.5流速：1.0mL/min 5.6进样量：10 L 5.7流动相：乙腈/0.01 mol/L磷酸二氢钠溶液(用30％(V/V)硝酸溶液调节pH2.5)，35：65(V/V)，使用前用超声波脱气10 min 6.操作方法 6.1样品测定：称取5.00 g(±0.01 g)切碎的肉样(＜5 mm)，置于50 mL锥形烧瓶中，加入5％高氯酸25.0mL，于振荡器上振荡提取10 min，移入到离心管中，以2000 r/min离心3min，取上清液经0.45m滤膜过滤，取溶液10L进样，记录峰高，从工作曲线上查得含量 6.2工作曲线：分别称取7份切碎的肉样，每份5.00 g(±0.01 g)，分别加入混合标准溶液02550100150200250 L(含土霉素四环素各为02.55.010.015.020.025.0 g，含金霉素05.010.020.030.040.050.0 g)，按6.1方法操作，以峰高为纵坐标，以抗生素含量为横坐标，绘制工作曲线恒奥HU 6150D数控超声波清洗器