血细胞分析仪的原理|分类|应用

　　血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着近几年计算机技术的日新月异的发展，血细胞分析的技术也从三分群转向五分群，从二维空间进而转向三维空间。目前，血细胞分析仪许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术，如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。

　　20世纪50年代美国库尔持先生首先发明了电阻式血细胞分析仪，开创了血细胞分析的新纪元。

　　20世纪80年代库尔特公司又利用电阻(测体积)、激光(测核形态)、高能电磁波等几项技术共同检测、综合分析，使血细胞分析的结果更加准确。与此同时，也有人利用粒细胞所具有的大量过氧化物酶，而单核细肥此酶较少，淋巴细胞则无此酶存在的特点，把化学染色与激光分析相结合进行细胞分类，从此细胞从单一技术进入高科技发展的新阶段。

　　20世纪90年代初又有人从细胞膜的结构差异进行分类，比如幼稚细胞膜上的脂类多，结合的硫化氨基酸多，对膜的保护性强，溶血剂不易破坏，成熟细胞则反之。

　　目前，发达国家的半自动血细胞分析仪已经淘汰，取而代之的是不同功能的全自动，甚至几种血细胞分析仪联合使用，电脑控制。

　　1、血常规检验多参数化

　　近年来许多血细胞分析仪都在增加新的参数以满足临床在诊断和鉴别诊断方面的需求。Z初的血细胞计数仪仅仅能够计数红细胞(RBC)和白细胞(WBC)，后来又有了血红蛋白(HBG)、血小板(PLT)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)等几个参数。

　　而且血细胞分析仪增加了许多分析和计算参数。Z早加入到并得到公认的参数是红细胞体积分布宽度(RDW)，该参数已经成为许多型号血细胞分析仪的标准参数，在各种贫血的诊断和ZL中起着重要作用。随后平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)、大血小板比率、白细胞三分群、白细胞五分类、血红蛋白浓度分布宽度、异常

　　血细胞分析仪是用于检测血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白等具体数量的仪器，每种血球的数量在血液中的数值是衡量的，对比检测结果，给医生提供一个具体的检测依据，来判断潜在疾病对人体的威胁。

　　血细胞分析仪根据血细胞非传导的性质，在浸入电解质的微孔管内外各有一个电极，当电流接通后，两电极形成电流、动力泵产生负压、开始充量吸样。由于细胞为不良导体，在经过微孔的一瞬间，电阻增大，产生相应的脉冲传导(电压)，称为通过脉冲。此时电压增加和变化的程度取决于非传导性细胞占据小孔感应区的体积，即细胞体积越大，引起的脉冲越大，所产生的脉冲振幅越高，再经过放大，阈值调节，甄别，整形，计数，得出结果。

　　一、血细胞分析原理

　　细胞为不良导体，血细胞分析仪以电解质溶液中悬浮颗粒在通过小孔时引起的电阻变化为基础，进行血细胞计数和体积测定，这种方法称电阻法，也被称为库尔特原理。

　　把经过电解质溶液稀释的细胞悬液倒入一个不导电的容器中(塑料杯)，把小孔管插入细胞悬液中，小孔管的内侧充满了稀释液，并有一个内电极，外侧细胞悬液中有一个外电极，当电流接通后小孔内外侧的电极形成稳定的电流，稀释液通过小孔向内部流动，当细胞通过小孔时，瞬时引起了电压变化而出现一个脉冲传导，称为通过脉冲、再经过以下步骤得出结果：

　　1、放大：细胞通过小孔时所产生的脉冲传导微弱，难以直接触发计数电路。必须经电子放大器把微伏信号放大成伏级信号。

　　2、阈值调节：在一定范围内调节参考电平大小，使计数结果更加符合实际。

　　3、甄别：各种微粒通过微孔时均可产生讯号、讯号电平(脉冲幅度)与微粒子大小成正比，所为甄别就是根据阈值调节器提供的参考电平，把低于参考电平的假讯号去掉，以提高准确性。

　　4、整形：经放大和甄别的波形不—致，须经过整形器调整为形状—致标淮的平顶波后才能触发电路，送入计数系统，得出计数结果。

　　5、计数得出

　　血细胞分析仪直接测量的项目包括红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白测定和血小板计数。除计数功能外，根据计数时的细胞分布状况，血细胞分析仪还可以计算出红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板的其他相关参数。

　　1、按自动化程度分：半自动血细胞分析仪、全自动血细胞分析仪、血细胞分析工作站和血细胞分析流水线;

　　2、按检测原理分：电容型、电阻抗型、激光型、光电型、联合检测型、干式离心分层型和无创型;

　　3、按白细胞分类的水平分：二分类、三分类、五分类、五分类+网织红血细胞分析仪。

　　目前使用Z广泛为三分类电阻抗型血细胞分析仪。

　　相同点：

　　1、全自动和半自动均可检测包括红细胞、白细胞、血小板和血红蛋白在内的23项参数，其中，红细胞、白细胞和血小板可直接直方图显示。

　　2、检测所用试剂：稀释液、溶血剂、多酶清洁液、探头保养液。

　　3、检测原理相同：电阻抗法即库尔特原理：根据血细胞非传导的性质，以电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定。

　　不同点：

　　1、全自动血细胞分析仪只需在仪器的启动时只添加一次试剂，仪器自身可完成全部检测，节约人力资源。

　　2、半自动血细胞分析仪则人工添加试剂，在检测血红蛋白时，需人工添加溶血素，半自动血细胞分析仪的自动化低，但单个样品的检测速度快，适用于诊流量不多的医院及诊所。

　　随着血细胞分析仪成为医院临床检验的必备仪器以及近几年来计算机技术的不断发展，产品也从三分类转向五分类。

　　对于白细胞分类来说的，三分类的仪器可将白细胞大体的分为大细胞(中性粒细胞)、中间细胞(其它白细胞)、小细胞(淋巴细胞)三类。五分类的仪器可将白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞五类。红细胞和血

　　血细胞分析仪具有检测快速、结果重复性好等优点，在提高了检验人员工作效率的同时为临床疾病的诊断、ZL提供了更多有价值的实验数据，但在使用过程中如无完善的质量控制措施，检验结果的准确性将受到影响。

　　1、开机启动

　　首先开启血细胞分析仪主机侧面板的电源开关，然后开电脑主机，仪器主机前面板状态指示灯变为橙绿闪烁，仪器主机初始化后开始自检，自检时仪器会自动灌注稀释液、清洗液及溶血剂，并清洗液路。自检完成后，仪器进入血液细胞分析窗口。

　　2、本底测试

　　①放置洁净的空试管于采样针下，应确保采样针轻挨试管底部。在血液细胞分析窗口，点击“排液”图标，血细胞分析仪通过采样针排出稀释液到试管中。

　　②在血液细胞分析窗口，点击“编号”图标，进入下一个编号操作，输入“0”，再点击“确定”按钮返回血液细胞分析窗口。

　　③将盛有稀释液的试管放在采样针下，按仪器前面板的“RUN”键，待听到“滴”的一声后，方可移走试管。血细胞分析仪开始自动计数、测量。

　　④计数过程中，在窗口的右下方有WBC、RBC的计数计时器，显示WBC、RBC的计数时间。当计数时间过长或过短时，血细胞分析仪会发出故障报警，并给出报警提示。

　　3、质量控制

　　首次装机或在每天进行血液样本测试之前必须对血细胞分析仪进行质控。

　　4、标定

　　若本底测试，质控结果达不至要求，且某些参数漂移变化较大，则必须对血细胞分析仪进行重新标定。

　　5、血液样本的采集

　　①由于所有的临床样本、质控物、标定物均可能含有人血或人的血清，具有潜在的传染性，因此在处理这些物品时必须遵守已建立的实验室或临床操作规程，穿好工作服，戴好医用手套及安全眼镜。

　　②采血过程必须干净、无污染，必须使用合格的抗凝剂。严禁剧烈摇动采血管。在室温下，静脉血只能保存个小时，若在短时间内不能将血样处理完毕，须将血样存放于2～8的冷藏室内保存。

　　③静脉血(全

　　血细胞分析仪在YL检测过程中有着重要的作用，其检测结果是多种疾病诊断的依据，因此相人员必须对其重视。要想Zda程度的保证血细胞分析仪作用的发挥，就必须注重其的维护保养，降低血细胞分析仪出现问题的几率。

　　1、血细胞分析仪定期保养

　　①每日保养

　　在每天日常工作完成之后，就应该对血细胞分析仪进行清洗，如果所检测的样本数量相对较大，可以对设备的清洗频率进行提升，譬如设定为血细胞分析仪检测100个样本后进行自动清理等。可以在主界面进行设置，设置流程为点击设置→自动清洗设备→设置清洗频率，这样的话，在血细胞分析仪检测到所设置的样本检测量时就会执行自动清洗设备的命令。

　　②每周保养

　　在血细胞分析仪工作一周后，需要对设备用清洗浸泡液进行清洗，清洗的部位要包括包细胞池、红细胞池以及DIFF池等、

　　③每月保养

　　为了Zda程度的降低部件受到污染的几率，在对血细胞分析仪进行养护的过程中，要用蘸有酒精的棉签对吸样针以及拭子上的污渍进行擦拭。血液的采集为真空采血，样本在测试时采样针穿透管盖时碎的皮塞会出现管道堵塞，因此要清洗反冲配合灼烧防止堵孔故障。

　　④季度保养

　　每个季度都需要对血细胞分析仪的传动滑轨进行清洁，清洁的ZD集中在X轴、Y轴上，此外还要对滑动轨道加以润滑油的施加。而且必须加强对其的重视，每半年要对洗液瓶出水管上的过滤网进行清洗，并且要尽可能的避免洗液瓶内部尘土的累积，尘土的存在会使得样品针运行的精确性不能够得到保证，这极易导致成样品针出现弯曲或者断裂的现象。

　　要想避免这种现象的产生，需要对样品针拆卸掉，然后把20ml的注射器取下针头，套上塑料管，然后在加上探针的连接，吸入和推出清洗液和蒸馏水，来完成清洗针内蛋白质以及其它沉淀物的目的。

　　2、实验室内环境和卫生的维护

　　血细胞分析仪在作用发挥过程中，实验室内的环境以及卫生将会直接对分析结果有着极大

　　血细胞分析仪工作过程中难免会出现各种故障，这对于分析结果精确性是极为不利地，因此必须及时的对血细胞分析仪运作过程中所存在的故障特点进行把握，并能够及时对故障进行排除，保证血细胞分析仪能顺利工作。

　　如何发现血细胞分析仪的故障?归纳起来，血细胞分析仪常常出现的故障有两大类：

　　1、有提示的故障：

　　一般比价的血细胞分析仪不仅有故障提示的功能，还有排除方法的提示，针对这些故障，可以根据提示逐步操作，很快就能解决。比如：计数错误。导致计数错误的原因可能有过滤器不畅、堵孔、样品量不够、程序出错等，出现错误时要逐个检查，才能找出主要的原因，并加以解决。

　　2、无提示的故障：

　　也有不少出现故障的血细胞分析仪，没有提示功能，也不能通过测试来了解，这时，操作者只有通过血细胞分析仪故障出现的现象进行仔细的观察和分析，如：血细胞分析仪探测不到试剂，导致这一现象的原因有很多，管道堵塞、压力降低、过滤器时间过长等，一定要在检查时综合多方面的因素逐条检查，弄清原因，然后处理故障。

　　血细胞分析仪是血常规检测的仪器，长时间使用后，如果过程中没有注意保养，势必会出现一些故障，但是有些常见故障是可以自行解决的，有哪些呢?

　　1、堵孔现象

　　故障原因：①血样中混入了棉签的纤维或其它杂质;②血液样本的抗凝处理没有做好，导致血液样本部分凝固;③使用血细胞分析仪后长期不清洗或未及时清洗，导致微小的通道口被堵塞。

　　处理方法：取血样时要采用干净的专用取血管，加入稀释液进行预稀释处理，血液样本不要放置过久，一般不能超过24小时;已经堵孔的血细胞分析仪，可启动仪器进行反复的清洗去杂质;严重堵孔需要拆卸仪器的，则需致电厂家，由专业人员前来处理。

　　2、血红蛋白结果偏低

　　故障原因：这是因为血红蛋白位于红细胞的内部，在测量血红蛋白时，需要添加溶血素将红细胞膜破坏，让血红蛋白释放

　　血细胞分析仪由于其含有丰富的诊断信息而备受医生重视，成为临床常规检查仪器。近年来，由于相关学科及基础理论研究的不断深入，血细胞分析仪无论是其检查项目的扩展还是对疾病诊疗的应用价值都发生了显著的变化。

　　传统的血细胞分析仪仅包括红细胞(RBC)计数，血红蛋白(Hb)测定，白细胞(WBC)计数及分类，血小板(PLT)计数。

　　随着血细胞分析仪性能的提高，逐渐增加了血细胞比容(HCT)，红细胞平均体积(MCV)，红细胞平均Hb含量(MCH)，红细胞平均Hb浓度(MCHC)，红细胞体积分布宽度(RDW)，血小板压积(PCT)，血小板平均体积(MPV)，血小板体积分布宽度(PDW)。

　　白细胞分类由人工显微镜分类到分析仪自动分类，根据血细胞分析仪的档次又分为三分类和五分类，仪器采用电阻抗原理可把WBC分成中性粒细胞，中间细胞和淋巴细胞三类，而仪器采用电阻抗、激光、射频、光散射、细胞化学等技术，把WBC精确到了五分类，即：中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜碱细胞、嗜酸细胞。

　　血细胞分析Z早仅是红细胞、白细胞的显微镜人工计数，由于其误差大、重复性差，影响因素多、效率低，自20世纪50年代逐渐由血细胞分析仪取而代之，80年代以前血细胞分析仪主要是半自动型，标本在机外预稀释后才上机检测，干扰和随机误差较大。

　　近年来，全自动血细胞分析仪不断涌现，在机内稀释加溶血剂，检测和换算报告，辅助功能越来越完善，提高了仪器的精密度和准确度。现在已有联合型血液分析系统问世，将先进的血细胞分析仪、涂片机、染片机、网织红细胞计数仪串联在一起，大大避免了实验的随机误差，提高了工作效率。

　　1、红细胞系列

　　血细胞分析仪的RBC计数、Hb测定、HCT主要用来判断有无贫血及贫血的程度，三者主要见于各种原因引起的骨 髓代偿性增生或者血液浓缩，如新生儿、高