原装进口elisa试剂盒操作流程

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【导读】原装进口elisa试剂盒操作流程1、在冰上预冷2支14-mlBDFalcon聚丙烯圆底离心管.1支用来转化样品,1支做pUC18对照.同时将NZY+broth培养基在42°C预热....

原装进口elisa试剂盒操作流程
1、在冰上预冷2支14-mlBDFalcon聚丙烯圆底离心管.1支用来转化样品,1支做pUC18对照.同时将NZY+broth培养基在42°C预热.
2、冰上融化感受态细胞.融化时轻轻将细胞混匀并分装成100ul/管.
3、每管中加入随试剂盒提供的4mlb-ME（巯基乙醇）.
4、温和转动试管,将细胞在冰上放置10分钟,每2分钟温和转动一下.
5、每管细胞加入0.150ng样品DNA（或2ml连接反应物）（参见DNA质量与体积说明.）用灭菌dH2O水按1:10稀释对照pUC18DNA,并取1ml稀释的pUC18DNA加入转化细胞.
6、温和转动试管,并在冰上放置30分钟.
7、试管在42°C水浴热激30秒.热激时间对转化效率极度重要.
8、试管冰浴2分钟.
9、每管加入0.9ml预热（42°C）的NZY+肉汤,37°C、225250rpm摇床培养1小时.
10、取200ml转化混和物铺带有相应筛选抗生素的LB琼脂糖平板（如果进行颜色筛选还需加入IPTG和X-gal）.pUC18阳性对照则取5ml铺氨苄青霉素LB琼脂糖平板.
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2004-09-26 09:23:03

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