- 相约杭州|安谱实验邀请您共赴 检测企业整合实践创新大会暨TIC私董会八周年年会
- 《白露惊秋!从候鸟迁徙到普仁仪器的神奇助力》
- 【今日白露】露从今夜白,夜自此日凉
- 展会回顾|指尖上的仪器“贵阳”人生初见暨广州市仪器行业协会贵阳行
- 白露时节|水上的安全守护
- CRISPR/Cas9诺奖得主携手荧光技术共探生命奥秘|前沿应用
- 解锁氧氮氢养护技巧,掌握拉曼样品准备妙招——9月12日 HORIBA 售后服务直播间精彩来袭!
- 鲲霆十年,一路相伴丨十周年庆福利活动第一弹
- 来源:内容来源于网络 浏览量:1196次
- 【导读】在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素:1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析,以便大家了解快...
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素:
1、模块升温和降温时间
2、模块与PCR管内温度平衡时间
3、延伸时间
4、循环次数
下面就以上几点做一点分析,以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。
1、模块升温和降温度时间
PCR仪一般会标明升温速度和降温速度,但标的大多是Zda变温速度,也就是说是瞬间达到的速度。而与实验相关的平均升降温速度只有极少量厂家标明。以平均2度和4度(能做到平均升降温4度的仪器极少)来计算,从95度降到55度,分别是20秒和10秒,每一个循环差20秒钟。以一般35个循环来计算,影响实验时间700秒,也就是不到12分钟。实际还要考虑过冲问题,影响时间还会少些。
2、模块与PCR管内温度平衡时间
模块温度达到后,PCR管内的温度远没有达到(塑料和水的导热系数比铝块差300倍以上),需要时间来使二者达到平衡。一般有四种办法来减少这一时间,一是让模块温度过冲,在管内温度快达到时降到目标温度,但太高的过冲可能造成实际温度过冲,影响PCR反应结果;二是减少PCR反应液的体积,但体积变小时PCR反应的可靠性会降低;三是降低PCR管的厚度,但太薄时强度不够;四是增加PCR管与模块贴附程度。
3、延伸时间
延伸时间与PCR产物的长度和DNA聚合酶的合成速度有关。如果PCR产物长度少于100bp时,可能考虑将延伸时间变为0(即两步法);采用高速的DNA聚合酶也是常用的方法,但并不是所有PCR实验都可以用高速的DNA聚合酶。
4、循环次数
循环次数与模板量及检测要求相关。
所谓快速PCR技术是将快速PCR仪与超薄管(或特殊贴附技术)以及高速DNA聚合酶等技术整合在一起,可达到较短时间完成PCR反应。而一些厂家在向用户推销PCR仪时,不去说明快速PCR技术,只强调PCR仪速度快(大都用Zda升降温速度来HuYou用户)。好像买了快速PCR仪后,原来1个半小时的扩增时间变会缩短成半小时似的。而用户采购了快速PCR仪后才发现并不那么回事。有不少用户采用快速模式根本就做不出好的实验结果。特别是进行多重PCR扩增的用户,如*系统用于身份鉴定的试剂。快速PCR技术与快速PCR仪是两回事。快速PCR仪Z多只能缩短PCR反应时间10分钟左右,要实现真正的快速PCR反应,还需要其他一些努力。大多数用户根本就不需要快速PCR技术。
上海嘉鹏科技有限公司专业生产:紫外分析仪、三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、暗箱三用紫外分析仪、暗箱紫外分析仪、手提式紫外分析仪、三用紫外分析仪暗箱式、紫外检测仪、部分收集器、恒流泵、蠕动泵、凝胶成像系统、凝胶成像分析系统、化学发光成像分析系统、光化学反应仪、旋涡混合器、漩涡混合器、玻璃层析柱、梯度混合器、梯度混合仪、核酸蛋白检测仪、玻璃层析柱、荧光增白剂测定仪、馏分收集器、切胶仪、蓝光切胶仪、层析系统等产品。欢迎来电咨询。
仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词:
等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
- 2004-10-16 09:23:05
- 标签:
- 收藏(0) 赞({{input('id')|returnCommentsOptionCount=23,###,1}}) 踩({{input('id')|returnCommentsOptionCount=23,###,2}})
- 随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
PCR新手指南:PCR仪的三种控温模式介绍2004-10-16 09:23:05
PCR新手指南:PCR仪的三种控温模式在进行PCR仪中控温模式设定时,一般有三个选项:Block、Tube及
-
新手指南:elisa的技术要点2004-09-11 09:23:05
ELISA的技术要点包括三个方面:试剂的制备、反应条件的选择和操作的标准化。一、试剂的制备ELISA的主要试
-
PCR新手指南系列:PCR产物电泳条带分析2004-10-16 09:23:05
PCR扩增后一般进行琼脂糖凝胶电泳分析,电泳后一般有以下几种条带:1、引物带。引物浓度过高或是扩增效率不是特
-
非线性恒温恒湿箱和线性恒温恒湿箱的技术区别2004-08-08 18:04:00
非线性恒温恒湿机和线性恒温恒湿机
-
PCR技术-solarbio2004-08-14 09:23:08
PCR技术 PCR:即聚合酶链反应(Polymerasechainreact
-
新型PCR分析方法毛细管PCR技术2004-09-01 09:23:07
新型PCR分析方法毛细管PCR技术常规PCR反应采用导热性较差的塑料管作为反应容器,对于100~1样品,样品
-
多聚酶链式反应技术(PCR技术)2004-09-11 09:23:05
多聚酶链式反应即PCR(polymerasechainreaction)技术,应用这一技术可以将微量目的基因
-
冷热冲击试验箱与高低温箱的三大技术区别2004-11-27 09:40:21
冷热冲击试验箱与高低温箱的区别一、降温过程:这两种试验箱都是给产品做高低温的试验。但是他们有一个最根本的区别
-
荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别2007-03-10 10:31:44
荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统
-
免疫荧光定量PCR技术介绍2007-06-05 08:09:18
免疫荧光定量PCR技术介绍 免疫定量 PCR 技术( real-timeimmu
PCR新手指南:快速PCR技术与快速PCR仪的区别
-
您可能感兴趣
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi