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- 【导读】维生素C是一种水溶性维生素,是人体必需营养素,严重缺乏会导致坏血病,因此它又被称为抗坏血酸。人体无法对维生素C进行合成,只能通过食物摄取。婴幼儿配方奶粉中的维生素对婴幼儿的健康成长...
维生素C是一种水溶性维生素,是人体必需营养素,严重缺乏会导致坏血病,因此它又被称为抗坏血酸。人体无法对维生素C进行合成,只能通过食物摄取。婴幼儿配方奶粉中的维生素对婴幼儿的健康成长尤为重要,尤其对无法进行母乳喂养、将配方奶粉作为主要营养来源的婴儿而言。
本文对乳粉中维生素C的液相色谱法进行研究,对样品的提取溶液进行比较筛选,对去除蛋白、脂肪的净化分离条件进行优化,从而建立简便、有效可行的分析方法,适用于日常乳粉中维生素C的检测,同时本文对pH值影响维生素C溶液稳定性进行深入探讨。
1材料与方法
1.1材料与试剂
抗坏血酸标准品(纯度大于99%)Sigma公司;二硫苏糖醇(纯度大于99%)Sigma公司;甲醇(色谱纯);正己烷、磷酸二氢钾、偏磷酸、乙酸(分析纯);超纯水(由Mill-Q纯水器系统制得)。
1.2仪器与设备
GX液相色谱仪(配有岛津LC20AD泵,SIL20AC自动进样器,SPDM20A二极管阵列检测器、LCsolution色谱工作站);超声波水浴;高速冷冻离心机(德国Sigma公司);涡旋振荡器(德国Heidolph公司);水平往复振荡器(德国IKA公司)。
1.3标准工作液的配制
精密称取50mg(精确到0.1mg)抗坏血酸标准品于100ml容量瓶中,以3%偏磷酸水溶液定容至刻度,配成标准贮备溶液浓度为500mg/L。置于4°C冰箱避光保存,保存期1个月。临用前用3%偏磷酸水溶液将标准贮备溶液逐级稀释得到的浓度为0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10mg/L的标准工作溶液。
1.4色谱条件
色谱柱:AgilentTC-C18色谱柱,(250×4.6mm,5μm);流动相:0.05mol/L磷酸二氢钾(pH=2.5);流速:1.0ml/min;柱温:35°C;进样量:10μl;检测波长:240nm。
1.5样品处理
称取1.0g试样于50ml具塞塑料离心管中,加入1.0ml20mg/ml二硫苏糖醇,置暗处反应半小时,取出加入3%偏磷酸水溶液溶解并定容至10ml,涡旋混匀1min,置水平往复振荡器上振荡或超声波水浴中超声提取10min,取出,加入5ml正己烷涡旋混匀30s,以不低于4000r/min离心5min,下层水相过0.45μm水相滤膜后,供液相色谱测定。
2结果与讨论
2.1标准溶液稳定性
维生素C的标准工作液(10mg/L)在pH<2的偏磷酸溶液和pH=2的1%乙酸溶液中6h之内稳定,几乎不降解,24h后测定分别降低8%和26%,;在pH=3水溶液中6h降解32%,24h后测定降解94%;pH=4和pH=6溶液中2h分别降解52%和58%,24h后测定均降解1**%。
2.2提取溶液的选择
本方法选择3%偏磷酸溶液作为提取溶剂。
2.3色谱条件的优化
采用AgilentTC-C18分析维生素C标准品的液相色谱图见图1。
用不含维生素C的乳粉样品进行添加回收和精密度实验,样品空白和样品添加的色谱图见图2~图3,乳粉中添加维生素C的回收率和精密度实验结果见表1。
婴幼儿乳粉测定维生素C的测定结果如表2.
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- 2004-10-17 09:23:07
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