官方微信
中国仪器网资讯中心
仪器网/ 资讯中心/人甲状旁腺激素(PTH)elisa试剂盒说明书

最新企业新闻

最新产品文章

热门标签

上海长方光学仪器有限公司

人甲状旁腺激素(PTH)elisa试剂盒说明书

来源:内容来源于网络 浏览量:369次
【导读】本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中甲状旁腺激素(PTH)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲状旁腺激素(PTH)水平。用纯化的...

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中甲状旁腺激素(PTH)的含量。

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲状旁腺激素(PTH)水平。用纯化的人甲状旁腺激素(PTH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲状旁腺激素(PTH),再与HRP标记的甲状旁腺激素(PTH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲状旁腺激素(PTH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人甲状旁腺激素(PTH)浓度。

试剂盒组成:

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份

封板膜

2片(48)

2片(96)

密封袋

1个

1个

酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品:540pg/ml

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶标试剂

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

样品稀释液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂A液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂B液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

终止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

浓缩洗涤液

(20ml×20倍)×1瓶

(20ml×30倍)×1瓶

2-8℃保存

样本处理及要求:

1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤:

标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为360pg/ml,240pg/ml,120pg/ml,60pg/ml,30pg/ml)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

注意事项:

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。

10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,

在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD

值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释

倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值

代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释

倍数,即为样品的实际浓度。

(此图仅供参考)

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。

2.批内与批间应分别小于9%和15%

检测范围:

16pg/ml-450pg/ml

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月


仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

相关热词:

等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜


2018-11-08 09:23:03
标签:
随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!

为你精选

  • 人细胞间粘附分子酶联免疫试剂盒厂家介绍

    人细胞间粘附分子酶联免疫试剂盒厂家介绍

    人细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒仅供研究使用人细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒实验目的本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体...
    2019-02-28 09:23:04 专业评测
  • 大鼠激活素A(ACV-A)ELISA试剂盒操作说明

    大鼠激活素A(ACV-A)ELISA试剂盒操作说明

    大鼠激活素A(ACV-A)ELISA试剂盒英文名称:RatACV-AELISAKit实验类型:夹心法检测范围:1.25ng/mL40ng/mL最低检测限:0.1ng/mL应用范围:...
    2019-02-28 09:23:04 专业评测
  • 植物激素或影响人类健康-上海仁捷生物

    植物激素或影响人类健康-上海仁捷生物

    一碗沙拉里不仅含有维生素和矿物质,还有植物激素。近日,科学家发现人类肠道微生物和细胞可能会对这些植物激素产生反应,甚至产生相似的分子。在发表于《植物科学趋势》杂志上的文章中(论文链...
    2019-02-28 09:23:04 专业评测
  • ELISA间接法不能直接用酶标记的原因何在?

    ELISA间接法不能直接用酶标记的原因何在?

    在ELISA实验中,用间接法测定抗体,不能直接将待测抗体直接用酶标记,然后直接加底物。而要加酶标抗抗体呢?如果将酶标记到待测抗体上,相对经典的间接法更加繁琐,而且您在摸索标记条件时...
    2019-02-28 09:23:04 专业评测
  • 推荐鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒厂家

    推荐鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒厂家

    鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒仅供研究使用鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒实验目的本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中鱼...
    2019-02-28 09:23:04 专业评测