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- 【导读】 1.样品预处理1mL尿液中加入500μL0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0),充分混合;2.SPE净化注意:所有过程流速均维持2~3mL/min。a.活化:SPE...
1.样品预处理
1mL尿液中加入500μL0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0),充分混合;
2.SPE净化
注意:所有过程流速均维持2~3mL/min。
a.活化:SPEC柱中加入200μL甲醇,静置1min;
b.上样:将预处理过的样品载入SPE柱,并打开真空阀抽吸;
c.淋洗:用500μL0.1mol/L的醋酸淋洗SPEC柱,增大真空度,维持1min,抽干;再用500μL甲醇淋洗SPEC柱,增大真空度,维持1min,抽干;
d.洗脱:用800μL洗脱溶剂(80mL乙酸乙酯,20mL甲醇,2mL氨水充分混合)洗脱,控制较温和的真空度,使洗脱溶剂缓慢流经SPEC萃取盘,收集全部洗脱液;
3.衍生化
a.洗脱液中加入50μL1%的酸性甲醇,充分振摇;
b.35℃氮吹干燥(要缓慢干燥);
c.加入50μL七氟丁酸酐(HFBA),密封后充分混合,70℃加热2min,冷却至室温;
d.加入700μL乙酸乙酯,密封振摇。
4.GC-MS检测
5.样品成分
甲
方法中使用的SPE柱:
SPECDAU(3mL,PN.A532DAU)。- 2004-07-20 10:02:38
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