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每个ELISA试验都要做标准曲线,实验新手刚接触ELISA实验的时基本上都是不知所措,尤其是实验做完后需要分析数据绘制标准曲线图更是茫然。鉴于经常有实验新手客户向我司技术部反映标准曲线图绘制问题,欧阳技术根据自身多年的工作经验详细整理了绘制标曲的步骤流程,供广大新老客户参考。
1、拟和曲线:
输入diyi行:浓度值,如01050100400
输入第二行:该浓度下的调整后的od值,如00.5861.3971.9973.42
选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型"中选择“xy散点图";在“子图表类型"中选择“折线散点图",按“下一步";选择“系列产生在行",按“下一步";数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。
单击曲线,按右键,选择“添加趋势线",在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法:双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。
2、计算浓度:
diyi次实验:
标准曲线为:
y=-4E-05x2+0.026x
R2=0.9745
为例,已知OD值,计算浓度。
由于y=-4E-05x2+0.026x,所以可以得到:
4E-05x2-0.026x+y=0
ax2+bx+y=0
a=4E-05;b=-0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根))/(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
通用公式为:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-11-29 09:23:26
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