哈灵生物实验室——血清常见问题及解决

哈灵生物实验室血清常见问题及解决

血清是细胞培养中Z重要的元素之一。因此，我整理了一些相关资料，也是实验室里常会遇到的问题，仅供大家参考：
1、保存血清Z好的方法？
我们建议血清应保存在-5C至-2OC。然而，若存放于4C时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。
2、如何解冻血清才不会使产品质量受损?
我们建议您将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8C冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
3、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理?
血清中沉淀物的出现有许多种原因，但Z普的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。
4.何谓热灭活?
一般是以56C，30分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤，可以使补体去活化，而补体所参与的反应有:溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
5、有必要做热灭活吗?
实验显示，经过正确处理的热灭HX清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒立显微镜下观察，像是"小黑点"，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37C环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
因此我们建议您，若非必须，您可以不需要做热处理这一步。如此一来，不但节省您宝贵的时间，更确保您血清的质量!另外，购买已灭活成品也不失一个捷径，请在购买的时候注意询问厂家是否是已灭HX清。
6、如何避免沉淀物的产生?
我们建议您在使用血清的时候，注意下列的操作:
*解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2O。C至4。C至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20。C至37。C)，实验显示非常容易产生沉淀物。
*解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生
*请勿将血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。
*血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。
*若必须做血清的热灭活，请遵守56。C，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

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