裂解酶活性的测定—关于elisa试剂盒实验

来源：内容来源于网络浏览量：263次

【导读】实验原理醛缩酶催化1,6-二磷酸果糖裂解成一分子磷酸二羟丙酮和一分子3-磷酸甘油醛。血清醛缩酶活性的连续监测有两条途径：一种是3-磷酸甘油脱氢酶耦联法，在NADH存在下磷酸二羟丙酮...

实验原理

醛缩酶催化1,6-二磷酸果糖裂解成一分子磷酸二羟丙酮和一分子3-磷酸甘油醛。

血清醛缩酶活性的连续监测有两条途径：一种是3-磷酸甘油脱氢酶耦联法，在NADH存在下磷酸二羟丙酮还原成3-磷酸甘油，于波长340nm监测吸光度下降速率；另一种是3-磷酸甘油醛脱氢酶耦联法，在NAD存在下3-磷酸甘油醛氧化成3-磷酸甘油算，于波长340nm监测吸光度上升速率。应用Z多的是根据前一反应途径建立的测定方法。分析两法测定的主要干扰因素。前者受血液中丙酮酸的干扰，后者受血液中乳酸的干扰。一般情况下，以毫摩尔浓度相比，乳酸的含量要比丙酮酸的含量高十几倍。所以后者的干扰较大。

本方法在GALPD偶联反应前，加入乳酸脱氢酶以消除乳酸的干扰，然后加入底物，启动偶联反应，保证了测定结果的准确性。

实验方法

1.去血清0.05ml，加入1mlTEA缓冲液和0.05ml工具酶混合液，混匀后，置于37℃水浴中温育5分钟。

2.加入0.1ml54.5mmol/LFDP溶液，混匀，立即放入分光光度计中，在波长340nm处，延迟时间30秒，监测时间180秒，每30秒读一次吸光度，计算平均每分钟吸光度上升速率。

一般以吸光度上升速率表示酶活性的高低。

注意事项

各反应物的终浓度：三乙醇胺50mmol/L，1,6-二磷酸果糖4.5mmol/L，砷钠10mmol/L，氧化性辅酶I6mmol/L，3-磷酸甘油醛脱氧酶2500U/L，磷酸丙糖异构酶500U/L，乳酸脱氢酶1500U/L。

仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

2004-12-04 09:23:12

标签：

收藏(0) 赞(0) 踩(0)

随时了解更多仪器资讯，求购、招标、中标信息实时更新，厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网（yiqi.com）。扫一扫关注仪器网官方微信，随时随地查看仪器用户采购、招标需求！

您可能感兴趣

用检测试剂盒进行定量分析之前，该使用多少样品用于净化和萃取？ Megazym2004-08-20 09:23:04

Megazyme酶法食品检测试剂盒FAQs（16）Q:用检测试剂盒进行定量分析之前，该使用多少样品用于净化和
人Ⅸ型胶原蛋白（Ⅸ-C）试剂盒（ELISA）2004-09-12 09:23:03

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人Ⅸ型胶原蛋白（Ⅸ-C）的含量。有效期：6
人B7-1（CD80）试剂盒（ELISA）2004-09-12 09:23:03

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人B7-1（CD80）的含量。有效期：6个
人AKT蛋白（AKT）试剂盒（ELISA）2004-09-12 09:23:03

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人AKT蛋白（AKT）的含量。有效期：6个
人B7同源体3（B7-H3）试剂盒（ELISA）2004-09-12 09:23:03

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人B7同源体3（B7-H3）的含量。有效期
人Argonaut-2蛋白（Ago-2）试剂盒（ELISA）2004-09-12 09:23:03

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人Argonaut-2蛋白（Ago-2）的
标记试剂盒II型产品参数应用辛高素标记的探针，可用于在北部，南部和点杂2004-11-06 09:23:09

地高辛标记试剂盒II型六折促销产品简介：产品编号品名/Packsize的11585614910高辛高效DNA
大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽（PICP）试剂盒使用说明书2004-11-29 09:23:22

本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T15ng/L-400ng/L使用目的：大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽（PICP
大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽（PICP）试剂盒实验原理2004-11-29 09:23:24

本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T15ng/L-400ng/L使用目的：大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽（PICP
elisa试剂盒真假难辨，预防低价陷阱！2004-12-02 09:23:12

　　随着科研试剂行业发展elisa试剂盒也一路水涨船高供应商之间竞争也日益激烈，市场压力激增，由此引发了一些

版权与免责声明

①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。

②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。

③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。

④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi