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- 【导读】环氧合酶2(COX-2)ELISA试剂盒(大鼠小鼠人等)检测样本:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆及相关生物液体等名称96孔48孔备注微孔酶标板8孔×12条8孔×12条2-8℃标准...
环氧合酶2(COX-2)ELISA试剂盒(大鼠小鼠人等)
检测样本:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆及相关生物液体等
名称96孔48孔备注微孔酶标板8孔×12条8孔×12条2-8℃标准品6支6支-20℃(用不完)样本稀释液6mL3mL按说明书进行稀释检测抗体-HRP10mL5mL2-8℃底物A6mL3mL2-8℃底物B6mL3mL2-8℃终止液6mL3mL2-8℃20×浓洗涤缓冲液25ml15ml无说明书1份1份无自封袋1个1个无封板膜2张2张无需自备的设备及试剂:
1.450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3.Eppendorf移液器.
4.蒸馏水或去离子水.
5.脱脂棉吸水纸.
6.37℃恒温箱.
7.100ml和1000ml量筒.
8.准备若干个标准品稀释管.
试剂盒的储存及有效期:
未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。
实验原理:
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
精密度:
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差:CV<10%Inter-批间差:CV<13%
稳定性:
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
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- 2004-12-17 09:23:05
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