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ELISA间接法不能直接用酶标记的原因何在?

来源:内容来源于网络 浏览量:4346次
【导读】在ELISA实验中,用间接法测定抗体,不能直接将待测抗体直接用酶标记,然后直接加底物。而要加酶标抗抗体呢?如果将酶标记到待测抗体上,相对经典的间接法更加繁琐,而且您在摸索标记条件时...

在ELISA实验中,用间接法测定抗体,不能直接将待测抗体直接用酶标记,然后直接加底物。而要加酶标抗抗体呢?


如果将酶标记到待测抗体上,相对经典的间接法更加繁琐,而且您在摸索标记条件时不能保证操作失误导致待测抗体失活;酶标二抗现在是已经商品化了的,被大规模生产,购买后使用方便。如果你的间接做的好的话,方法被优化了后,一抗二抗显色,总共的时间加起来,出结果不会超过2-3小时。


可以用直接ELISA法,就是用抗体包板,在抗原上标记酶,然后显色,这样与间接法相比就减少了一步,缩短了时间。


但是,直接法和间接法,他们各有优缺点,需要根据实验具体要求而定。
1、待测抗体一般是免疫后产生的抗体,其中有免疫失败和抗体过少等因素存在,用酶标记有许多不确定性,如用酶标记前期有测不出效价的可能,造成不必要的困惑。


2、ELISA酶联免疫中酶标抗抗体和抗体结合后有巨大的信号放大作用,可以将信号扩大千倍以上,适合于较低抗体量的测定。


3、ELISA试剂盒SCI文章筛出单抗后可以考虑直接酶标抗体,不过在确定测定体系上要费不少功夫。

上海仁捷生物致力于提供生命科学领域的技术服务,提供全方位实验技术服务,为广大科研工作者大大节省了重复劳动的时间和精力,我们有过硬的技术咨询和完善的售后服务,为您解决后顾之忧。


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2019-02-28 09:23:04
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