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- 【导读】 制备液相色谱中,有三个可以观察到的状态:柱压、检测器基线、谱图。通过观察和记录这三个状态可以监测仪器是否正常。若某个状态出现异常,故障排查和解决方案如下。 1、柱压波动 1...
制备液相色谱中,有三个可以观察到的状态:柱压、检测器基线、谱图。通过观察和记录这三个状态可以监测仪器是否正常。若某个状态出现异常,故障排查和解决方案如下。 1、柱压波动 1)吸液管路进气泡 ①溶剂不足,吸滤头吸入空气,添加溶剂并排气泡。 ②吸滤头脏了或堵塞,用异丙醇(或5%稀硝酸)清洗。 ③溶剂中有气泡(尤其两种以上溶剂混合),超声(或抽滤)脱气。 2)泵流量不稳 ①单向阀堵塞,大流速purge,若不能解决,则需拆下单向阀(异丙醇)超声清洗清洗或更换单向阀。 ②柱塞密封圈磨损,更换密封圈。 ③泵头污染,柱塞杆往复活动受阻,清洗泵头。 3)柱床塌陷,维修或更换色谱柱。 4)流动相混合后吸放热导致温度变化,以致柱压波动,如乙腈和水混合吸热,甲醇和水混合放热。若影响实验结果,则增加柱温箱或流动相预混。 2、柱压升高或超压。 逐段排查堵塞的位置: 1)先拆下色谱柱,接上两通运行,若是色谱柱堵塞: ①进样后样品析出,用合适的溶剂反冲色谱柱。 ②缓冲盐析出,用大比例水相的流动相冲洗色谱柱。 ③机械杂质堵塞筛板,异丙醇小流速反冲色谱柱。 ④色谱柱污染严重,需维修或充填。 2)混合器堵塞,维修或更换。 3)六通阀堵塞,将泵液管路接到连接色谱柱的阀口处,将阀扳至load状态,用易溶样品的溶剂小流速冲洗。 4)压力传感器故障,维修或更换。 3、检测器基线波动 1)基线有规律波动,且幅度较大,则可能有气泡持续进入流通池。排查气泡来源并用异丙醇冲洗检测器或色谱柱。 2)基线小幅度规律波动,可能是检测器灯能量不足(能量下降后,低波长下灵敏度先下降。 3)基线漂移。 ①流动相在此检测波长下有吸收。更换流动相或改变波长。 ②色谱柱或检测池污染。以异丙醇冲洗色谱柱或检测池,或将检测池中透镜玻片取出清洗。 4、谱图重现性差 1)检查方法设置,包括流速、梯度、波长。 2)检查流动相配置是否有误,A、B两相是否放反。 3)检查柱压与之前是否有差异,若有变化,则前面1和2进行排查。 4)进样前色谱柱是否完全平衡好。 5)样品溶解方法。
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- 2004-07-27 10:57:40
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