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- 【导读】荧光显微镜实验总结 用哪种固定方法一般认为有两种:冷acetone和4%PFA 我两种都用过,感觉用4%PFA做前固定过夜后糖脱水效果是最好的,但是有点费时费力,经过比较,用冷ac...
荧光显微镜实验总结
用哪种固定方法一般认为有两种:冷acetone和4%PFA
我两种都用过,感觉用4%PFA做前固定过夜后糖脱水效果是Z好的,但是有点费时费力,经过比较,用冷acetone做后固定5分钟4摄氏度的效果也说得过去,也很方便省时。比较推荐!blockingsolution的配制和时间我用的是5%serum1%BSA0.05%TweenPBS室温染色盒内1个小时,如果不放心可以两个小时,但是一旦blocking了就要注意不能让切片干燥,所以个人认为一个小时应该够用了。(serum注意是和二抗同一种属)
blockingsolution的使用量我用的是每一张100μl
切忌保持湿度染色开始后切忌不能让片子干燥了,一旦干燥了就会很糟糕,我也在这个地方吃了很多亏。。。
一抗的名称使用浓度染色时间保持湿度遮光否
二抗的名称使用浓度染色时间保持湿度遮光否洗净方法一抗之后我一般洗三次5分钟换一次PBS4摄氏度
二抗之后我一般洗四次5分钟换一次PBS4摄氏度#封片剂干燥时间Z好是30分钟以上,干燥后马上观察效果公认是Z好的
#荧光显微镜的使用建议一定要跟着老师,前辈,多观摩几次之后再自己动手
简单罗列了几个个人认为需要提前做好提纲的关键词,刚开始做的时候有挺多困难的,慢慢摸索也许会比较辛苦,
但是一旦量变到质变之后再加上反复回头看反复总结经验,就会有提高。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-08-10 10:25:45
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