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上海长方光学仪器有限公司

荧光显微镜实验总结

来源:内容来源于网络 浏览量:1118次
【导读】荧光显微镜实验总结 用哪种固定方法一般认为有两种:冷acetone和4%PFA 我两种都用过,感觉用4%PFA做前固定过夜后糖脱水效果是最好的,但是有点费时费力,经过比较,用冷ac...

荧光显微镜实验总结 

用哪种固定方法一般认为有两种:冷acetone和4%PFA 
我两种都用过,感觉用4%PFA做前固定过夜后糖脱水效果是Z好的,但是有点费时费力,经过比较,用冷acetone做后固定5分钟4摄氏度的效果也说得过去,也很方便省时。比较推荐!

blockingsolution的配制和时间我用的是5%serum1%BSA0.05%TweenPBS室温染色盒内1个小时,如果不放心可以两个小时,但是一旦blocking了就要注意不能让切片干燥,所以个人认为一个小时应该够用了。(serum注意是和二抗同一种属)

blockingsolution的使用量我用的是每一张100μl

切忌保持湿度染色开始后切忌不能让片子干燥了,一旦干燥了就会很糟糕,我也在这个地方吃了很多亏。。。
一抗的名称使用浓度染色时间保持湿度遮光否
二抗的名称使用浓度染色时间保持湿度遮光否

洗净方法一抗之后我一般洗三次5分钟换一次PBS4摄氏度
二抗之后我一般洗四次5分钟换一次PBS4摄氏度

#封片剂干燥时间Z好是30分钟以上,干燥后马上观察效果公认是Z好的

#荧光显微镜的使用建议一定要跟着老师,前辈,多观摩几次之后再自己动手

简单罗列了几个个人认为需要提前做好提纲的关键词,刚开始做的时候有挺多困难的,慢慢摸索也许会比较辛苦,
但是一旦量变到质变之后再加上反复回头看反复总结经验,就会有提高。

 


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2004-08-10 10:25:45
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