食品中有害微生物快速检测方法

　　(一)、概述　　食用被微生物污染的食品而导致的疾病，称作食源性疾病。导致这类疾病的微生物叫食源性致病菌。随着人们居住和卫生条件的不断改善，以及抗生素的滥用，人类对病菌的抵抗能力却在不断下降，食源性疾病一直呈上升的趋势。因此，对食品中致病菌的监测和检验也就越显示其重要性，常规的检验大多依靠培养目标微生物的方法来确定食品是否受到此微生物的污染，这些方法需要一定的培养时间，少则2～3天，多至数周，才能确定。而现行有效的一些快速检测方法不仅可以大大缩短检测时间提高微生物检出率并可用于微生物计数、早期诊断、鉴定等方面，以做到快速、简便、准确。快速方法包括了微生物学、分子化学、生物化学、生物物理学、免疫学和血清学等领域。　　（二）、常见、常用的快速、简便的检测微生物数量的方法如下：　　1、活细胞计数的改进方法　　（1）、旋转平皿计数方法　　（2）、疏水性栅格滤膜法（HGMF）或等格法（isogridmethod）　　（3）、血膜系统（Pertrifilm）　　（4）、酶底物技术（ColiComplete）　　（5）、直接外荧光滤过技术（DEFT）　　（6）、“即用胶”系统（SimPlate）　　2、用于估计微生物数量的新方法　　（1）、阻抗法　　（2）、ATP生物发光技术　　3、其他方法　　（1）、微量量热法　　（2）、接触酶测定仪　　（3）、放射测定法　　（三）、食品中沙门氏菌的快速筛检方法　　1、沙门氏菌显色培养基法　　2、免疫学方法　　3、分子生物学方法　　4、自动传导法　　（四）、大肠杆菌O157：H7快速检测方法　　大肠杆菌O157：H7肠出血性大肠杆菌的主要血清型，自1982年在美国被分离并命名以来，陆续发现本菌与轻度腹泻、溶血性尿毒综合症、出血性肠炎、婴儿猝死综合症等多种人类病症密切相关，是食源性疾病的一种重要致病菌。E.coliO157：H7属于肠杆菌科埃希氏菌属，为革兰氏阴性杆菌，有鞭毛。近年来作为食品卫生及流行病学的研究热点，E.coliO157：H7的分离和鉴定方法已取得了较大进展。利用其生化特征、免疫原性建立的方法以及现代分子生物学技术的应用，可以从多方面对E.coliO157：H7进行检测。　　1、E.coliO157：H7鉴别培养基及显色培养基　　2、免疫学检测方法　　3、分子生物学方法　　（五）、金黄色葡萄球菌的快速检测方法　　金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈普通串状排列无芽孢，无鞭毛，不能运动。该菌在自然界中分布广泛，如空气、水、土壤、饲料和一些物品上，是Z常见的化脓性球菌之一，食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌食物中毒是其肠毒引起的，目前已确认的肠毒素至少有A,B,C1,C2,C3,D,E和F8个型。由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的中毒爆发事件，近年来首推2000年日本“雪印奶粉”事件，14000多人受感染。因此，金黄色葡萄球菌的检测方法研究多集中于肠毒素的检测方法上。　　（六）、李斯特氏菌快速检测方法　　李斯特氏菌，特别是单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜致病菌，可引起人和动物脑膜炎、败血症及孕妇流产等疾病，且死亡率极高，可达30％～70％。该菌在自然界中广泛存在，肉、奶、蛋、水产品和蔬菜等均有不同程度的污染，该菌在4℃冰箱保存的食物中以可繁殖生长，使其危害性增加。Z初用于李斯特氏菌检验的方法为冷增菌法，此法培养物在4℃培养30天，有时甚至长达一年。现在采用的常规方法为常温培养方法，这些方法大部分需要将样品在增菌液中分别培养24h至7天，故需要7～11天才能分离鉴定出李氏菌。自1985年以来单克隆抗体、DNA探针和PCR等技术用于此菌的检验上已经取得了突破性的进展。　　（七）、弯曲杆菌快速检测方法　　该菌的检验有一定的难度，近年来，对该菌的检验方法研究有免疫学和分子生物学方面，主要有下面几种：　　1、酶免疫检测方法　　2、VIDAS方法　　3、乳胶凝集试验　　4、PCR方法　　5、DNA探针检测方法　　（八）、致病性弧菌快速检测方法　　致病性弧菌系指能够引起人类食物中毒或其他病症的弧菌属细菌，除了常见的霍乱弧菌和副溶血性弧菌外还包括其他10种致病性的弧菌，但至目前为止，致病性弧菌的快速检测方法研究还大多集中于霍乱弧菌和副溶血性弧菌，且霍乱弧菌由于是一类强致病菌，因此，对它的研究受到一定的限制，尤其是在食品中的检测方法研究，目前的方法研究多为临床诊断方面，应用于食品检验中的快速方法就很有限。　　（九）、其他检验方法和快速鉴定方法　　1、厌氧菌检测装置　　2、微生物快速鉴定系统

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