小鼠脂联素ELISA试剂盒

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【导读】特异性：没有检测到与任何其他细胞因子的交叉反应性。储存：存放在4℃的频繁使用，在-20℃很少使用。避免多次冻融循环（随用湿冰）有效期：4个月，在4℃和8个月，在-20℃。应用：用于...

特异性：没有检测到与任何其他细胞因子的交叉反应性。储存：存放在4℃的频繁使用，在-20℃很少使用。避免多次冻融循环（随用湿冰）有效期：4个月，在4℃和8个月，在-20℃。应用：用于定量检测小鼠脂联素，血清，血浆，体液，组织裂解物或细胞培养上清。注意事项应用套件1。在使用试剂盒，旋转管到管底，并关闭所有元件。2。重复以及检测标准和样品测试。3，不要让96孔板中干，干板将活性成分失活板。4。为了避免边际效应的板孵化，由于温度差（反应可能会更强的边际井），ABC和TMB的解决方案摊薄预先加热，在37℃30分钟前使用。工具包组件1。冻干重组小鼠脂联素标准：10ng/tube×2。2。一个96孔板预涂与抗小鼠脂联素抗体。3。样品稀释缓冲液：30毫升4。生物素标记的抗小鼠脂联素抗体130μl稀释1:100。5。抗体稀释缓冲12毫升。：6。亲和素-过氧化物酶复合物（ABC）：130μl稀释1:100。7。ABC稀释剂的缓冲区：12毫升。8。TMB显色剂：10毫升。9。TMB一站式解决方案：10毫升。材料需要但不提供：1。酶标仪标准尺寸。2。自动洗板机。3。可调式移液器及吸头。多道移液器建议中的条件在检测大量的样品。4。清洁管和Eppendorf管中。5。洗涤缓冲液（中性PBS或TBS）。0.01MTBS的制备：添加1.2克的Tris8.5克氯化钠;450μl纯化的乙酸或700μl浓盐酸至1000mlH2，并调节pH值至7.2-7.6。Z后，调整至1L总体积。下游的0.01MPBS：上传8.5克氯化钠，1.4克的Na2HPO4和0.2g的NaH2PO4至1000ml蒸馏水，并调节pH值至7.2-7.6。Z后，调整至1L总体积。实验步骤ABC工作液和TMB彩色显影剂必须在使用前30分钟在37℃下保温。稀释样品和试剂时，必须将它们完全和均匀地混合。标准小鼠脂联素检测曲线。用户将决定样品稀释倍数的粗略的估计。1。的分装0.1毫升每20ng/ml，10ng/ml时，5ng/ml，2.5ng/ml，1.25ng/ml，0.625ng/ml，0.312ng/ml的小鼠脂联素标准的解决方案，预涂96板。添加0.1ml的样品稀释缓冲液到控制（零井）。添加0.1ml的每个适当稀释的人血清样品，血浆，体液，组织裂解物或细胞培养上清液中的每个空井。请参见“示例稀释指引“上面的内容，我们建议每个小鼠脂联素标准溶液和每个样品一式两份测定。2。密封板与盖和在37℃下孵育90分钟。3。取下盖子，舍弃板的内容，涂抹到纸巾或其它吸水材料板。不要让我们的井完全干燥，在任何时候。4。添加生物素标记的抗0.1ml的孵化板在37℃下60分钟。5。三次用0.01MTBS或0.01MPBS洗板，每一次让留在洗涤缓冲液井1分钟。弃去洗涤液，或其他吸水纸巾上吸干板材料。6。导入各孔中，并加入0.1ml的制备ABC工作液，在37℃下孵育板30分钟。7。将板洗涤5次，用0.01MTBS或0.01MPBS，每一次让洗涤缓冲液的孔中逗留1-2分钟。弃去洗涤液和纸巾或其它吸水材料上涂抹板。8。90微升制备TMB底彩色显影剂添加到每个孔中并孵育板在37℃下20分钟（深浅不一的蓝，可以看出，在井的四个Z集中的脂联素标准的解决方案;其他井没有明显的颜色）。9。每孔加入0.1ml的准备TMB的一站式解决方案。颜色立即变成黄色。10。阅读的OD在酶标仪在450nm处的吸光度，添加停止溶液后，在30分钟之内。为了计算，（相对OD450）=（的OD450）-（的OD450）。可以绘制成的相对OD标准曲线。的小鼠脂联素浓度的样品可以被内插。
注：如果测量的样品进行稀释，稀释前，乘以稀释倍数的浓度插值获得的浓度。摘要1。加入样品和标准品，并在37℃下孵育板90分钟。不要洗。2。添加生物素化的抗体，并在37℃下孵育板60分钟。将板洗涤3次，用0.01MTBS。3。加入ABC工作液，并在37℃下孵育板30分钟。将板洗涤5次，用0.01MTBS。4。加入TMB底彩色显影剂，并在37℃下孵育板20分钟。5。加入TMB一站式的解决方案和阅读。该产品规格有48T和96T两种规格，美国RD进口，质量非常好，保证质量，提供免费代测服务。elisa试剂盒为我公司主打产品，免费代测，品牌已经得到国家和客户认可，是信得过的品牌，请客户放心购买，如有质量问题，可拨打我公司售后热线，我们尽力为您解决。

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2004-08-30 09:23:16

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