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上海长方光学仪器有限公司

加A试剂盒说明书

来源:内容来源于网络 浏览量:744次
【导读】加A试剂盒说明书A-TailingKit加A试剂盒目录号:YJ0803保存条件:-20℃保存。组分说明Cat.No.YJ0803Size20次A-TailingEnzyme(5U/...

加A试剂盒说明书

A-Tai领Kit

加A试剂盒

目录号:YJ0803

保存条件:-20℃保存。

组分说明

Cat.No.YJ0803

Size20次

A-Tai领Enzyme(5U/μl)25μl

10×A-Tai领Buffer120μl

dATP,2mM25μl

本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途

产品简介

  利用具有3’-5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶,如Pfu等进行PCR扩增时,其PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段,如想将该片段克隆到T载体上,需要先利用A-Tai领Enzyme在平末端片段后加上A尾后才能与T载体上3’末端的T碱基互补连接。

本产品是在平末端DNA片段的3’末端添加一个A尾,使平末端的DNA片段进行TA克隆

成为可能。本试剂盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在30分钟完成整个过程。与平

末端DNA片段克隆相比,TA克隆具有较高的克隆效率,可大大提高实验成功率。

使用方法

1.将平末端PCR产物进行纯化,若PCR无非特异扩增可用DNA产物回收试剂盒进行纯化,若PCR产物有非特异性扩增可用胶回收纯化试剂盒进行纯化。

2.将以上纯化好的平末端DNA片段按以下反应体系加A尾:

试剂10μl体系

平末端DNA片段Xμl(<1μg)

dATP1μl

10×A-Tai领Buffer1μl

A-Tai领Enzyme1μl

RNase-FreeWater补足至10μl

3.轻轻混匀后72℃孵育30min。

注意:加A尾的产物可以不需要再次纯化,可直接用于连接反应。


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2004-08-31 09:23:06
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