采用密度梯度离心法分离脐血干细胞

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【导读】利用3种质量浓度的聚蔗糖泛影葡胺分离液分离脐血单个核细胞，用细胞计数法、活细胞染色法及流式细胞计数仪分析单个核细胞的表面标志，以探讨密度梯度离心法分离人脐血干细胞分离介质的最佳浓度...

利用3种质量浓度的聚蔗糖泛影葡胺分离液分离脐血单个核细胞，用细胞计数法、活细胞染色法及流式细胞计数仪分析单个核细胞的表面标志，以探讨密度梯度离心法分离人脐血干细胞分离介质的Z佳浓度，建立临床级干细胞分离应用方案，使用的离心机设备为冷冻离心机

脐血由于其来源容易，所含细胞种类和数量比较多，比和外周血中的细胞更为原始，且其临床应用不涉及社会、伦理、法律方面的限制等优势。脐血间充质干细胞可以分化为成骨、软骨、脂肪细胞等，内皮干/祖细胞ZL缺血性疾病，已经在临床有突出的LX。

国内、外分离脐血干细胞方法常采用磁珠/流式细胞分选法、脐血库仪器/羟乙基淀粉沉淀法和密度梯度离心法。由于目的不同，各类方法有其自身特点

脐血库分离干细胞常用羟乙基淀粉沉淀和仪器离心分离法，分离的细胞量大、成分较多但混有大量红细胞，适合用作大量分离、储存干细胞。密度梯度离心法多采用Percoll、Ficoll分离液分离细胞，得到单个核细胞群，该细胞群成分复杂，纯度不高。但密度梯度离心法分离脐血单个核细胞由于细胞得率高、方法简单等突出优点，有望成为制备临床级干细胞的优选方法，分离介质以聚蔗糖泛影葡胺Z为常用。

应用脐血离心分离干细胞的目的是获得以干细胞(间充质干细胞、造血干细胞)为主要群体的单个核细胞群。用聚蔗糖泛影葡胺为分离介质研究何种密度状态下获得的干细胞Z多，目前尚未深入研究。文章在前期工作基础上，探索密度梯度离心法用3种不同质量浓度分离液分离脐血单个核细胞，比较分离单个核细胞不同亚群的比例和纯度，试图找出用密度梯度离心法获得干细胞比例和纯度较高的分离介质。

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2004-09-01 09:23:03

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