- 美谷分子入驻丹家智选商城 开启全新购物体验
- 五一福利丨向中国科技工作者致敬!
- 产品推荐 | 自动化和机器人技术
- 电磁式振动台技术得到了新突破
- 【冠亚制冷】5月展会预告,期待与您相聚!
- 西安胜利仪器五一放假通知
- 敬劳动者|五一劳动节放假通知
- 来啦!五一劳动节放假通知
- 来源:内容来源于网络 浏览量:481次
- 【导读】本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血液,血清及相关液体样本中支原体(mycoplasma)水平。实验原理:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中小鼠支原...
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血液,血清及相关液体样本中支原体(mycoplasma)水平。
实验原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中小鼠支原体(mycoplasma)。用纯化的小鼠支原体(mycoplasma)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中支原体(mycoplasma)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的支原体(mycoplasma)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中小鼠支原体(mycoplasma)存在与否。
试剂盒组成:
试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存阴性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存阳性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:
编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。结果判定:
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10
临界值(CUTOFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品OD值<临界值(CUTOFF)者为小鼠支原体(mycoplasma)阴性
阳性判定:样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为小鼠支原体(mycoplasma)阳性
注意事项
1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词:
等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
- 2004-09-11 09:23:05
- 标签:
- 收藏(0) 赞(0) 踩(0)
- 随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
人P物质(SP)elisa酶联试剂盒使用说明书2004-07-13 09:31:27
人P物质(SP)elisa酶联试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:
-
小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒,(TNF-α)elisa检2004-07-13 09:31:27
小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒,(TNF-α)elisa检测试剂盒使用说明书本试
-
牛(Bovine)雌二醇(E2)ELISA检测试剂盒使用说明书2004-07-19 09:04:13
牛(Bovine)雌二醇(E2)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶
-
人( Human)生长激素( GH)ELISA 检测试剂盒使用说明书2004-11-27 09:40:25
人(Human)生长激素(GH)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附
-
小鼠(Mouse)转化生长因子β 1(TGF- β1 )ELISA 检测试剂2004-11-27 09:40:25
小鼠(Mouse)转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒使用说明书[本试剂盒只能用于科学研究,
-
人( Human)白细胞介素18( IL-18 )ELISA检测试剂盒使用说2004-11-27 09:40:25
人(Human)白细胞介素18(IL-18)ELISA检测试剂盒使用说明书[本试剂盒只能用于科学研究,不得用
-
大鼠( Rat )一氧化氮(NO)ELISA 检测试剂盒使用说明书2004-11-27 09:40:25
大鼠(Rat)一氧化氮(NO)ELISA检测试剂盒使用说明书[本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断]检
-
人( Human )维生素 D(VD )ELISA检测试剂盒使用说明书2004-11-27 09:40:25
人(Human)维生素D(VD)ELISA检测试剂盒使用说明书[本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断]
-
人 ( Human)白细胞介素 8( IL-8 )ELISA 检测试剂盒使用2004-11-27 09:40:25
人(Human)白细胞介素8(IL-8)ELISA检测试剂盒使用说明书[本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医
-
大鼠(Rat) 糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA检测试剂盒 使用2004-11-27 09:40:25
大鼠(Rat)糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA检测试剂盒使用说明书[本试剂盒只能用于科学研究,不
小鼠支原体(mycoplasma)ELISA说明书
-
您可能感兴趣
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi