氯霉素,是不是听着很耳熟?
曾经是作为治 疗伤寒、立克次氏体病及其他感染性疾病的特 效抗生素药物,如今由于其对人体造血系统产生严重的不良反应,已经渐渐离开了大众的视野,2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的2A类致癌物清单上,氯霉素榜上有名。
后来,其作为广谱抗生素常用于动物疾病的预防和治 疗,但由于氯霉素类药物会在动物的内脏和肌肉组织中吸收积累,人在食入之后,消化系统及造血系统均会受到不同程度的影响,甚至诱发癌变。于是在2019年12月27日,氯霉素被列入食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单。现在不论肉制品、奶制品还是水产品,只要是食物,氯霉素都是禁止检出的。
目前现行有效的氯霉素检测方法有GB/T 20756-2006 《可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》,2022年11月4日中华人民共和国农业农村部发布了第594号公告--《食品安全国家标准 食品中41种兽药最 大残留限量》(GB 31650.1-2022)及21项兽药残留检测方法。其中《食品安全国家标准 水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量的测定 气相色谱法》(GB 31656.16-2022)将水产品的检测方法单独列出。标准将于2023年2月1日实施。
接下来,小编基于还在施行的GB/T 20756-2006为大家分享氯霉素类药物残留量的测定。
氯霉素类药物残留量的测定
实验原理
用乙酸乙酯提取样品中的氯霉素类药物。提取液经正己烷脱脂后旋转蒸干,使用液相色谱仪-串联质谱仪定量。
操作步骤
2.1 从样本中取有代表性的样品1kg,均分为两份,取其中一份搅碎备用,样品需储存于-18℃下。
2.2 称取试样2g(精确至0.01g)样品于50mL离心管中,加入内、外标液和15mL乙酸乙酯,涡旋混合均匀。
2.3 超声提取10min,4000r/min离心10min,取上清液于鸡心瓶中,试样中再加入15mL乙酸乙酯重复提取一次。
2.4 合并两次提取液,旋蒸至近干,残渣用乙腈:水(1:9)复溶。加入10ml正己烷混合均匀,吸取下层澄清液体过0.22um有机相滤膜,待测。
仪器方法
检测方法:LC-MS/MS
色谱柱:Athena C18-WP,2.1*150mm,5um
流速:0.15ml/min
进样体积:5μl
柱温:30℃
流动相:A: 水;B: 甲醇
梯度洗脱条件如下:
梯度洗脱条件
质谱离子源:电喷雾离子源(ESI源);
扫描方式:负离子扫描;
检测方式:多反应监测(MRM);
电喷雾电压:- 3500 V;雾化器压力:50 psi;离子源温度:300℃;
定性离子对、定量离子对
注:*为定量离子对。
实验原理
4.1 准确加标并做试剂空白。
4.2 离心结束后尽快转移上清液,避免底部残渣散开,影响取液。
4.3 控制旋蒸温度和压力,避免速度过快导致目标物损失。
4.4 操作过程严禁涂抹护手霜等含有氯霉素类药物的护肤品。
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