Elisa检测双抗体夹心法原理介绍

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双抗体夹心法原理：固相载体上包被抗体，再加入待测抗原(可以是血清或者其它样本)，洗板(洗掉非特异性吸附)，再加入酶标抗体，再洗板(洗掉非特异性吸附)，再加底物显色。这里有几点需要注意：①抗原是大分子抗原，具有2个以上的抗原表位；②包被抗体和酶标记的抗体都是针对抗原的特异性抗体，只不过它们分别针对的是不同抗原表位，经常被称作一抗和二抗；③酶是催化底物显色的，起到一个信号放大作用。操作步骤：1.将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2.加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3.加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4.加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。
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