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解决方案
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饲料中泛酸的测定
发布:深圳市亿鑫仪器设备有限公司浏览次数:1761饲料中泛酸的测定
1 仪器及试剂
1.1仪 器
1). 分析天平一台(精度0.1mg);
2). 超声波水浴一台;
3). 容量瓶;
4). 微量进样器(5ul或10µl)一支;
5). 微量可调移液枪(1000ul)一支、吸头多个;
6). 旋涡混匀器一台;
7). 离心机一台;
8). pH计一台
9). LC-10TvpGX液相色谱仪;
1.2试 剂
1). 0.1%的磷酸溶液;
2). 1%的乙二胺四乙酸二钠(EDTA)溶液
3). 磷酸缓冲液
4). 1mol/L的盐酸溶液
5). 1mol/L的氢氧化钠溶液
6). 泛酸钙标准品:含量≥99%
7). 泛酸钙标准贮备液
8). 泛酸钙标准工作液
1.3标准溶液配制
泛酸标准贮备液:准确称取已知浓度的泛酸钙标准品0.02g,置于100ml棕色容量瓶中,用0.1%的磷酸溶解,定容至刻度,摇匀。
泛酸标准工作液液:准确吸取泛酸标准贮备液用水按1:10的比例稀释,现用现配。该溶液浓度为20µg/ml。
磷酸缓冲液:称取3.12 g 二水磷酸二氢钠溶于1L水中,用0.1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH为5.5,通过0.45滤膜过滤脱气使用。
2 样品制备
2.1复合预混合饲料:称取试样1-2g 或维生素预混合饲料0.25 -0.5g,极ng确至0.0001g,置于100 mL棕色容量瓶中。加60 mL水浸湿,摇匀,加10mL l%的二乙胺四乙酸二钠溶液混匀,置于超声波水浴上振荡提取15min。用水定容至刻度混合均匀,过滤或离心。再经0.45µm滤膜过滤,调整溶液的浓度大于1µg/mL,进样测定。
2.2浓缩饲料:称取试样2-5g ,极ng确至0.00 01g,置于100ml色容量瓶中。加60ml浸湿,摇匀,加10ml l%二乙胺四乙酸二钠溶液棍匀,置于超声波水浴上振荡提取15 min。提取液若出现混浊,需用几滴氢氧化钠溶液和盐酸溶液调节pH至4.5左右,至溶液澄清(用试纸显示)沉淀蛋白质,用水定容至刻度,过滤或离心。再经0.45µm滤膜过滤,进样测定。
3 色谱条件
色谱柱:Vertex C18色谱柱 150mm×4.6mm×5μm;
流动相:磷酸缓冲溶液;
流速:1.0ml/min;
温度:室温;
进样量:20μL;
检测波长:200nm。
4 色谱图
2018-11-01相关仪器 -
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