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上海安谱实验科技股份有限公司
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蜂蜜中糖含量测试有问题?安谱实验有新招儿
发布:上海安谱实验科技股份有限公司浏览次数:3441蜂蜜具有很多养生和YY功能,既可食用又可YY,同时也可以作为辅料广泛应用于中药制剂与中药炮制中,在中药炮制和药物制剂生产中具有重要作用。蜂蜜的质控也越来越受到医药行业重视,糖含量测定是药典中蜂蜜的重要指标。2015版药典中推荐Prevail Carbohyrate ES色谱柱为糖含量测试色谱柱,但是2016年这款色谱柱停产。目前大家都使用氨基柱测试蜂蜜中糖含量,在测试过程中,经常会碰到一些问题,比如峰拖尾严重,葡萄糖和果糖没有实现基线分离,柱效低导致0.5mg/ml 麦芽糖检测不出,不同批次之间出峰时间差异大等等。
针对药典中蜂蜜糖含量的测试,安谱实验采用CNW Athena NH2-RP(糖分析专用)液相色谱柱做了一项完整的测试,测试结果如下:
实验条件
色谱柱:Athena NH2-RP 4.6*250mm,5um(LAEQ-462568)
流动相:乙腈:水(75:25)
柱温:30℃
流速:1.0ml/min
进样量:15ul
检测器:示差折光检测器,30℃
实验结果
系统适用性实验
在2015 版药典条件下,Athena NH2-RP色谱柱做蜂蜜项目,葡萄糖和果糖的分离度为2.7,果糖的柱效塔板数大于9000,远高于药典要求的2000。
RSD测试
在2015版药典中的条件下,Athena NH2-RP色谱柱做蜂蜜糖含量项目,连续进混合对照品5针,果糖和葡萄糖峰面积RSD<2%,蔗糖和麦芽糖峰面积RSD<5%,重现性良好。
标准曲线
分别测定5个不同浓度的混合对照品,以浓度为横坐标,以峰面积值为纵坐标,得到的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的回归方程,可以看出,各个组分的响应和浓度呈优异的线性关系。
供试品测试
根据标准曲线计算,供试品中果糖的含量为40.45%,葡萄糖的含量为34.28%,蔗糖的含量为1.23%,麦芽糖的含量为0.88%,满足蔗糖和麦芽糖分别不得过5.0%,果糖和葡萄糖的总量不得少于60.0%,果糖与葡萄糖含量比值不得小于1.0%的要求。
批次重现性测试
随机选用2个不同批次的Athena NH2-RP 色谱柱测试,果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的出峰时间重现性好,果糖的柱效均大于2000。
分离度改善摸索
本次测试考察了柱温和检测器温度对出峰的影响,发现将柱温和示差检测器的温度升高到40℃,果糖和葡萄糖的分离度更好,各个组分的柱效更高。
实验结论
在药典条件下,CNW Athena NH2-RP 色谱柱对果糖和葡萄糖的分离度良好,各组分峰形wan美,果糖的柱效塔板数超过9000,远大于药典要求的2000。连续进样,果糖和葡萄糖峰面积RSD<2%,蔗糖和麦芽糖峰面积RSD<5%,重现性良好。不同批次色谱柱对于各组分的出峰重现性良好,果糖柱效塔板数均远大于2000,符合药典要求,wan美解决了蜂蜜中糖含量测试常遇到的诸多问题。
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