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液相色谱分离柱的使用与维护方法

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单
在前述仪器工作原理部分,我们已经指出,液相色谱仪的分离是在色谱分离柱中实现的我们目前工作中多采用反相色谱柱 ,如何保护好分离柱减少柱的污染是延长柱寿命的关键
3.1 怎样维护好色谱分离柱
加保护柱 (预柱 )是保护分离柱的有效办法保护柱是根内装填料与分离柱性质相近的短柱,接在分离柱之前,或代替流路过滤器保护柱的作用是收集和阻塞分离柱 口的化学垃圾 ,这些垃圾如果直接进入分离柱会逐渐堆积在柱头,Z终降低柱效能保护柱是消耗品,如分析血浆样品,一般分析 50个样品后需更换新柱芯避免高压冲击分离柱一般色谱柱都能承受得起高压,但经不住突然变化的高压冲击,这将改变柱床体积,影响柱效引起高压冲击的原因主要有:进样器的样品阀的缓慢转动泵启动太快柱切换等操作用手动进样阀时的压力变化不大 ,自动进样阀由于切换较慢,可能会造成压力冲击合理选择分离柱我们知道,选择色谱分离柱主要根据两点,一是根据待测组分的分子量的大小;二是根据流动相条件,包括 PH值离子强度和溶剂极性等传统硅胶基质的键合相柱要求流动相 PH值在 37之间,极端 PH值 (>8)的流动相能溶解硅胶,使键合相流失而目前利用先进的杂化颗粒技术研制的高纯硅胶颗粒填料
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