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细菌电转实验流程

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概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

【概述】本文简单介绍Celetrix细菌酵母电转仪电转细菌的实验步骤

【实验/设备条件】

【样品提取】尽量选择处于指数生长期的细菌

【实验/操作方法】

细菌电转流程(以20ul电击管电转大肠杆菌为例):

1)  收集处于指数生长期的细菌,冰浴;

2)  4℃离心收集细菌;

3)  轻柔重悬细菌于4℃预冷的无菌水中,再次4℃离心收集;

4)  轻柔重悬细菌于4℃预冷的10%甘油中,再次4℃离心收集;

5)  重悬细菌于10%甘油中,配成细菌悬浮液;

6)  加入DNA,加入20ul电击管盖好,冰中冷却;

7)  电击管从冰中取出,放入Celetrix电转仪马上进行电转;

8)  取出电转完成的细菌,转移到培养液进行细菌复苏。

9)  恒温摇床恢复。

10) 根据需要稀释到一定比例涂板。

【仪器/耗材清单】Celetrix细菌酵母电转仪、Celetrix细菌试剂盒

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