制备型GX液相色谱仪

制备型HPLC是一种基于组分在固定相(柱填料)和流动相(淋洗液)中分配系数的微小差异,当二相作相对运动时,样品中的各组分将形成不同的迁移速度的谱带而实现分离的新型GX分离技术。对于制备型HPLC而言,装置不像对分析型HPLC那样关键,使用不很高级,价格较低的装置往往可以获得令人满意的分离效果。

制备型HPLC装置主要由输液泵、进样系统、色谱柱、检测器、馏分收集器、数据采集与处理系统等部分组成。

1、输液泵

在制备型HPLC不需要具有很高的输送压力,一般为19.6MPa。输液泵采用的是恒流的机械往复泵或恒压的气动放大泵较理想,因为它们具有较高的输送速率和连续输出溶剂的能力。然而当采用装入小颗粒固定相的粗柱进行制备型HPLC时,例外地需用能提供较大压力的泵。在某些场合,所需压力高达150bar,此时采用薄膜泵较合适。对于内径较小的制备柱可使用分析型的输液泵,内径较大的制备柱,输液泵所需的输送能力可从分析型柱子所做的实验条件参数计算出来。

2、进样系统

在制备型HPLC分离中,可以采用一个进样阀(如六通进样阀)将较大量的样品方便的注入柱子而不影响流动相流动。通过更换样品环可以方便的改变进样量,Z大可达10mL。如果使用注射器,一般采用停留进样技术,即样品在常压下注入,然后再从新起动泵。若样品量非常大,可以采用停留技术,借助于一台小体积泵将样品定量地注入柱中。也可采用隔膜进样法,用注射器将样品定量地注入柱中。

3、色谱柱

相对于分析型色谱,制备色谱的核心就是色谱柱。为提供既稳定又GX的色谱柱,并用小尺寸颗粒进行填充,Z常用也是Z易实现的效果较为理想的是动态轴向压缩柱(DACTM)技术。DAC技术为使用者提供了用任一种填料自己装填色谱柱、方便快速地调整柱长度的可能性。在制备型HPLC中,色谱柱的内径可在100～500mm之间。一般增大色谱柱的直径意味着可以承载更多的样品,从而增加产量。增加色谱柱的长度则意味着可加入的样品量和分辨率的增大,但同时也增加了柱压。研究表明对于难分离物系,可以采用直径较小的色谱填料,以提高分离效率,但在分离度可以满足分离要求的前提下,使用较大直径的色谱填料将更为有利。

4、检测器

在现有的检测器中,示差折光检测器通常适用于制备分离,不过在某些系统中为了准确地检测样品中所有峰,往往需要将示差与紫外分光光度检测器配合使用。也可用薄层色谱对高浓度的流出液各流分进行检测,所以当其他检测方法不适用时,可求助于薄层色谱检测。

5、馏分收集器

在制备型分离工作中,需使用大量的洗脱溶剂,因此要采用适当的收集器。若收集一个或几个已分离的组分,用手动馏分收集器即可。然而当大量样品组分必须一次分离或为了提高一个或多个组分的收集量而要进行多次重复性分离,使用自动馏分收集器更为方便。

如有可能,应对溶剂回收再用,因而也应尽量不使用混合溶剂[11]。在使用反相或聚合物吸附进行分离时,有时从水液中回收样品较困难。一种解决办法是蒸除其中的有机溶剂,然后用甲苯或氯仿提取残留水液。

6、数据采集与处理系统

国外的一些公司已经相继开发出商业化的具有某些人工智能特点的制备型HPLC整套设备。这些整套设备均是采用一台计算机控制整个仪器的运转,并进行数据的收集、贮存和处理等工作,从而使制备型HPLC的分离速度以及自动化程度等大为提高。