量子点标记抗体离心后怎么分析

大海雯 2017-10-28 00:01:16 301 浏览

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苍飒飒之赵永 2017-10-29 00:00:00

　　HRP标记抗体纯化抗体浓度确定　　抗用量品目标含量相关含量较高需要用太抗免浪费条带太亮易析推荐采用厂家抗体浓度（义翘神州提供抗体用量、细胞株检测结）品与厂家种细胞尝试摸索两浓度梯度；　　二抗用量所实验室规用量现效理想状态二抗作用通阳性照阴性照、及其使用效看没问题

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量子点标记抗体离心后怎么分析:

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化学发光试剂吖啶酯在抗体蛋白上的标记

诊断试剂中化学发光底物吖啶酯的标记原理化学发光免疫检测中，我们用吖啶酯先标记上抗体蛋白，才能在免疫反应后对待测物进行检测，因此如何标记抗体就非常的关键了。吖啶盐和相关化合物已被广泛证明为非常有用的化学发光标记物，其稳定性、标记特异性和检测灵敏度都超越放射性同位素。

吖啶酯-NHS即吖啶琥珀酰亚胺酯(本试剂盒所提供)能与蛋白质的一级氨基发生反应。在碱性条件下，NHS作为离去基团被取代，蛋白质与吖啶酯形成稳定的酰胺键。反应完成后，多余的吖啶盐通过脱盐柱除去。在碱性过氧化氢存在下，吖啶标记的蛋白不需要酶催化就可自行发光。

因此激发液的加入导致反应体系立即释放约430nm的光子，通过使用标准光度计luminometer计数光子数量就可检测蛋白质的浓度。因为此发光过程是十分短暂(整个过程在2秒钟内完成)，样品必须直接放在光度计内部光子探测器前面。蛋白质、多肽、抗体、核酸都可以用吖啶酯标记。

化学发光试剂这里需要注意的是，溶解吖啶琥珀酰亚胺酯时，使用的DMF必须严格无水，防止吖啶酯水解不使用时，干燥密封-20°℃保存。针对传统吖啶酯，在其结构上进行了修饰，增大了位阻，增强了抗水解性。

如在室温下，在pH为7.0的PB缓冲液中很稳定。如果是不含-NHS的吖啶羧酸需要加入缩合剂EDCI等，才能与含胺基的蛋白发生偶联反应。吖啶酰肼，含有游离氨基，吖啶酰肼末端适用直接偶联含有醛基的多糖核酸或者蛋白质等。

德晟自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂，对新型Trinder's试剂、生物缓冲剂及化学发光试剂有着较深的研究,专业的研发团队和生产设备，目前，公司的生产设备、工艺和流程都是新升级的。每一件产品都经过专业质量人员检测认证，确保产品质量。可以放心购买。欢迎询价。

2021-09-01 11:46:11 751 0

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人HLA-DQ抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书

人HLA-DQ抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：

96T

10 pg/ml -420 pg/ml

使用目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中 HLA-DQ 抗体含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人 HLA-DQ 抗体水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入 HLA-DQ 抗体，再与 HRP 标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 HLA-DQ 抗体呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人 HLA-DQ 抗体浓度。

试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶
7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份
11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个
人HLA-DQ抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

360pg/ml

5 号标准品

150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液

180pg/ml

4 号标准品

150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

90pg/ml

3 号标准品

150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

45pg/ml

2 号标准品

150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

22.5pg/ml

1 号标准品

150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同 3。

8. 洗涤：操作同 5。

9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

10 分钟.

10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

人HLA-DQ抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书操作程序总结：

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6 个月

2021-10-27 13:20:06 369 0

人HLA-DR抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书: 人HLA-DR抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
96T
6 pg/ml -300 pg/ml
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中 HLA-DR 抗体含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人 HLA-DR 抗体水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入 HLA-DR 抗体，再与 HRP 标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 HLA-DR 抗体呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人 HLA-DR 抗体浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶
7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份
11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
240pg/ml
5 号标准品
150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
120pg/ml
4 号标准品
150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
60pg/ml
3 号标准品
150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
30pg/ml
2 号标准品
150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
15pg/ml
1 号标准品
150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
人HLA-DR抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书操作程序总结：
人HLA-DR抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月

人HLA-ABC抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书: 人HLA-ABC抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
96T
1 pg/ml -55 pg/ml
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中 HLA-ABC 抗体含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人 HLA-ABC 抗体水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入 HLA-ABC 抗体，再与 HRP 标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 HLA-ABC 抗体呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人 HLA-ABC 抗体浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶
7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份
11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个

标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
48pg/ml
5 号标准品
150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
24pg/ml
4 号标准品
150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
12pg/ml
3 号标准品
150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
6pg/ml
2 号标准品
150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
3pg/ml
1 号标准品
150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月
人HLA-ABC抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书