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纯化工艺的又一“新选择 "——羟基磷灰石填料Ca++Pure

东曹(上海)生物科技有限公司 2020-12-23 10:52:40 716  浏览
  • 羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)是目前ZJ有特征的混合模式填料之一,由于其结晶的化学结构、立体构造的特点,羟基磷灰石与抗体的Fab片段、Fc片段可发生相互作用。所以至今为止,羟基磷灰石在抗体及蛋白质的纯化、多聚体和残留核酸的去除等工艺中,作为精细纯化步骤的填料被广泛使用。并且,该填料兼具离子交换和金属亲和力,具有其他填料不具备的特殊分离能力,能够为生物大分子分离纯化提供独特的解决方案。

    羟基磷灰石纯化工艺的“新选择”!

    Ca++Pure-HA羟基磷灰石填料由东曹公司采用了优质ding级材料,通过专有工艺研发生产的高纯度的10nm×100nm六边形截面晶体,凝聚成球状颗粒。经过高温烧结,提高了机械强度和化学稳定性,能够满足工业规模的纯化要求。Ca++Pure-HA强大的特性使其可以在高流速和大型层析柱中重复循环使用。

    Ca++Pure-HA的应用范围

    分离抗体及蛋白质的多聚体、异构体、分解物、电荷异质体等目标产品内源性杂质

    分离DNA、HCP、病毒等来自生产工艺或混入的外源性杂质

    适用于ZZ(精纯)步骤中的分离纯化

    酸性条件下各填料稳定性对比

    上图显示的是,在装填有高吸附型羟基磷灰石Ca++Pure-HA、市售高吸附型 (B公司Type I) 和高耐久型 (B公司Type II) 羟基磷灰石填料的层析柱中,连续用弱酸性蒸馏水通液时,层析柱的理论塔板数的变化情况。

    市售品在大约80~90小时通液后,理论塔板数下降10%以上。与之相比,Ca++Pure-HA的理论塔板数虽然也会缓慢减少,但在约160小时之前,理论塔板数仍保持在90%以上。也就是说,Ca++Pure-HA属于高吸附型,且在酸性条件下的耐久性更好。

    单克隆抗体多聚体分离实例

    下图是使用Ca++Pure-HA精纯IgG样品的分离实例。配合使用氯化钾洗脱缓冲液可以有效去除mAb中的聚集体和降解物。从分析结果中可以看到,单体峰和多聚体峰中间的分辨率较高。

    随后,对纯化后的IgG样品进行尺寸排阻色谱分析。结果显示,单克隆抗体中多聚体的总量从18.8%降到了1.1%,显著降低。

    优异的耐碱性能

    从下图中可以看到,Ca++Pure-HA在0.5 mol/L的NaOH溶液中具有良好的耐碱性,即使超过65个CIP循环后,动态吸附载量也没有明显降低。

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纯化工艺的又一“新选择 "——羟基磷灰石填料Ca++Pure

羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)是目前ZJ有特征的混合模式填料之一,由于其结晶的化学结构、立体构造的特点,羟基磷灰石与抗体的Fab片段、Fc片段可发生相互作用。所以至今为止,羟基磷灰石在抗体及蛋白质的纯化、多聚体和残留核酸的去除等工艺中,作为精细纯化步骤的填料被广泛使用。并且,该填料兼具离子交换和金属亲和力,具有其他填料不具备的特殊分离能力,能够为生物大分子分离纯化提供独特的解决方案。

羟基磷灰石纯化工艺的“新选择”!

Ca++Pure-HA羟基磷灰石填料由东曹公司采用了优质ding级材料,通过专有工艺研发生产的高纯度的10nm×100nm六边形截面晶体,凝聚成球状颗粒。经过高温烧结,提高了机械强度和化学稳定性,能够满足工业规模的纯化要求。Ca++Pure-HA强大的特性使其可以在高流速和大型层析柱中重复循环使用。

Ca++Pure-HA的应用范围

分离抗体及蛋白质的多聚体、异构体、分解物、电荷异质体等目标产品内源性杂质

分离DNA、HCP、病毒等来自生产工艺或混入的外源性杂质

适用于ZZ(精纯)步骤中的分离纯化

酸性条件下各填料稳定性对比

上图显示的是,在装填有高吸附型羟基磷灰石Ca++Pure-HA、市售高吸附型 (B公司Type I) 和高耐久型 (B公司Type II) 羟基磷灰石填料的层析柱中,连续用弱酸性蒸馏水通液时,层析柱的理论塔板数的变化情况。

市售品在大约80~90小时通液后,理论塔板数下降10%以上。与之相比,Ca++Pure-HA的理论塔板数虽然也会缓慢减少,但在约160小时之前,理论塔板数仍保持在90%以上。也就是说,Ca++Pure-HA属于高吸附型,且在酸性条件下的耐久性更好。

单克隆抗体多聚体分离实例

下图是使用Ca++Pure-HA精纯IgG样品的分离实例。配合使用氯化钾洗脱缓冲液可以有效去除mAb中的聚集体和降解物。从分析结果中可以看到,单体峰和多聚体峰中间的分辨率较高。

随后,对纯化后的IgG样品进行尺寸排阻色谱分析。结果显示,单克隆抗体中多聚体的总量从18.8%降到了1.1%,显著降低。

优异的耐碱性能

从下图中可以看到,Ca++Pure-HA在0.5 mol/L的NaOH溶液中具有良好的耐碱性,即使超过65个CIP循环后,动态吸附载量也没有明显降低。

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如今,由成本和技术主导的市场中,使用效率是人们追求的目标。在实际生产中,热处理设备比较复杂,保存当前的生产和数据记录的重要作用不言而喻,针对热处理流量控制问题,武汉华敏研发的智能流量控制器,能够自动读取记录数据,保存历史记录,并以电子方式记录操作人员设定的数据值,这些新功能,摆脱了自动化操作过程中的人为因素,从某种意义上讲,减少您的成本的投入。而在技术层面上,影响流量波动的因素有很多,当实际流量和设定流量有差异时,通过比例阀开大/小自动调节,从而保证流量稳定,也是武汉华敏智能流量控制器的独特之处。

消费产品和工业产品的使用周期有很大差别,您的办公电脑预计每5年更换一次,但您现场使用的浮子流量计则可能使用20年。但如果决定更换时,请一定要采用新技术,因为它们很可能会成为一种主流。


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超声波清洗机清洗工艺及清洗剂的选择

超声波清洗机超声清洗的优越性
超声清洗目前已被认识到的优点如下:
高精度
      由於超声波的能量能够穿透细微的缝隙和小孔,故可以应用与任何零部件或装配件的清洗。被清洗件为精密部件或装配件时,超声清洗往往成为能满足其特殊技术要求的唯yi的清洗方式;
快速性
      超声清洗相对常规清洗方法在工件除尘除垢方面要快得多。装配件无须拆卸即可清洗。超声清洗可节省劳动力的优点往往使其成为Z经济的清洗方式;
一致性
      无论被清洗件是大是小,简单还是复杂,单件还是批量或在自动流水线上,使用超声清洗都可以获得手工清洗无可比拟的均一的清洁度。

超声波清洗机超声清洗工艺及清洗液的选择
在购买清洗系统之前,应对被清洗件做如下应用分析:
1.明确被洗件的材料构成、结构和数量;
2.分析并明确要清除的污物;
3.决定所要使用的清洗方法,判断应用水性清洗液还是用溶剂,Z终需做清洗实验。
只有这样,才能提供合适的清洗系统、设计合理的清洗工序以及清洗液。

化学药剂的选择
      考虑到清洗液的物理特性对超声清洗的影响,其中蒸汽压、表面张力、黏度以及密度应为Z显着的影响因素。温度能影响这些因素,所以它也会影响空化作用的效率。
      任何清洗系统必须使用清洗液。水性系统通常由敞口槽组成,工件浸没其中。而复杂的系统会由多个槽组成,并配备循环过滤系统、冲淋槽、干燥槽以及其它附件。
      对於使用溶剂的系统,多为超声波汽相除油脂清洗机,常配备废液连续回收装置。超声波汽相清除油脂过程是由溶剂蒸发槽和超声浸洗槽组成的集成式多槽系统完成的。在热的溶剂蒸汽和超声激荡共同作用下,油、脂、蜡以及其他溶於溶剂的污垢就被除去。经过一系列清洗工序后下料的工件发热、洁净、干燥。
      选择清洗液时,应考虑以下三个因素:
1.清效率:选择Z有效的清洗溶剂时,一定要作实验。如在现有的清洗工艺中引入超声,所使用的溶剂一般不必变更;
2.操作简单:所使用的液体应安全无毒、操作简单且使用寿命长;

3.成本:Z廉价的清洗溶剂的使用成本并不一定Z低。使用中必须考虑到溶剂的清洗效率、安全性、一定量的溶剂可清洗多少工件利用率Z高等因素。当然,所选择的清洗溶剂必须达到清洗效果,并应与所清洗的工件材料相容。水为Z普通的清洗液,故使用水基溶液的系统操作简便、使用成本低、应用广泛。然而对於某些材料以及污垢等并不适用於水性溶液,那么还有许多溶剂可供选用。

(来源:昆山市超声仪器有限公司)


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