用凯氏定氮仪测蛋白空真要不要加碱

1 前言

豌豆蛋白 粉是采用先进工艺采用低温低压技术从豌豆分离提取出的优质蛋白质，豌豆蛋白含有人体所有必需的所有氨基酸，属于全价蛋白质。蛋白质是生命的物质基础，是人体的三大组成部分。蛋白质缺乏会导致生长发育迟缓、免疫力低下，皮肤松弛和提前衰老。豌豆属于豆类植物，豌豆富含人体所需的各种营养物质，尤其是含有优质的蛋白质。而且豆类植物不含胆固醇，这一点优于动物蛋白。本实验参照《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》对方豌豆蛋白 粉中的蛋白质进行测定。

2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪，SH420F 石墨消解仪，分析天平 。

2.2 试剂

硫酸（分析纯），20g/L 硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂（3gK₂SO₄、0.2gCuSO₄），0.1mol/L 硫酸标准滴定液。

3 实验方法

3.1 取样

精密称取 0.2g 混匀的样品加入消化管中。加入混合催化剂 3.2g，加入浓硫酸 10ml。

3.2 消解

设定消解参数

表 1 消解参数设置

3.3 测试

表 2 定氮仪参数设置

4 结果与讨论

4.1 实验结果

表 3 豌豆蛋白 粉中蛋白质含量测试结果

4.2 结论

结果表明，豌豆蛋白 粉中蛋白质含量为 78.928%，蛋白质含量较高，且含有人体所有必需的所有氨基酸，是一种优质的蛋白食品。

参考文献

[1]GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[ S ] .

1 前言

       糙米中含有丰富的抗活性氧植酸、阿魏酸等，可以YZ黑色素的产生，使皮肤保持白净，并能促进新陈代谢，预防动脉硬化、内脏功能障碍和癌症等。糙米虽然具有很高的营养价值，但因为它的外围被纤维组织包裹起来，人体难以消化吸收。因此，提倡吃糙米饭是不切合实际的。随着食品科技的发展，食品新工艺的广泛应用，为开发糙米健康食品创造了条件，糙米粉、糙米羹、糙米饮料等的问世，既解决了糙米难煮、难吸收的问题，又保存了糙米的全部营养成分。本实验测试样品为糙米饮料的原料发芽糙米发酵液，参照国标《GB 5009.5-2016食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》进行该样品的蛋白质测定。

2 仪器与试剂

2.1 仪器

       K1160/K1100F 全自动凯氏定氮仪；SH420F 石墨消解仪；电子分析天平。

2.2 试剂

       硫酸（分析纯），20g/L 硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂片（3gK₂SO₄、0.2gCuSO₄），0.1mol/L 硫酸标准滴定液。

3 实验方法

3.1 取样

       准确称取混匀样品 5.0g（精确值 0.1mg）左右，加入消化管，再加入混合催化剂 3gK₂SO₄、0.2gCuSO₄，加入 10mL 浓硫酸。

3.2 消解

       利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，设定消解参数：

3.3 测试

       将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下：

4 结果与讨论 

4.1 实验结果

4.2 结论

       该糙米发酵稀释液的蛋白质平均含量为 1.4981 %，结果误差符合《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》标准要求的两个测定值的差值不得超过算术平均值的 10%。

凯氏定氮仪是什么？

凯氏定氮仪（Kjeldahl Nitrogen Analyzer）是一种广泛应用于实验室中用于测定有机物质中氮含量的仪器。通过经典的凯氏定氮法，它能够准确地测定各种样品，尤其是在食品、农业和环境科学等领域。本文将详细介绍凯氏定氮仪的工作原理、应用领域以及如何进行优化操作，以确保准确的分析结果。

凯氏定氮仪的工作原理

凯氏定氮仪的基本工作原理基于凯氏定氮法，这是一种通过酸性消化将氮化合物转化为氨气，再通过蒸馏和滴定的方法来测定氮含量的经典分析方法。具体来说，凯氏定氮法包括以下几个步骤：

1. 消化：将样品与浓硫酸（H₂SO₄）及催化剂（通常是硫酸铜）混合，并加热至一定温度，使样品中的氮元素转化为氨（NH₃）。
2. 蒸馏：将生成的氨气蒸馏到吸收液中，通常为硼酸溶液。
3. 滴定：使用标准酸液（如盐酸或氢氧化钠溶液）滴定吸收液中的氨，计算出氮的含量。

这一系列步骤能够高效而准确地测定样品中的总氮含量，并且适用于多种不同类型的样品，包括食品、饲料、水质、土壤和植物等。

凯氏定氮仪的应用领域

凯氏定氮仪的应用非常广泛，尤其在以下几个领域表现突出：

1. 食品行业

在食品行业中，氮含量是衡量蛋白质含量的一个重要指标。因此，凯氏定氮仪在食品质量检测中发挥着关键作用。通过测定食品样品中的氮含量，可以推算出其蛋白质的含量，从而帮助检测是否符合相关标准。比如在奶制品、谷物、肉类及其制品等食品的检测中，凯氏定氮仪是不可或缺的工具。

2. 农业与饲料

在农业和饲料行业，氮是植物和动物生长的关键元素。凯氏定氮仪广泛用于测定土壤、肥料及饲料中的氮含量，以确保植物和动物得到足够的氮源，促进其健康生长。特别是在农业科研中，凯氏定氮仪为氮素循环、土壤肥力及作物营养研究提供了重要的数据支持。

3. 环境科学

在环境监测中，氮含量也是判断水质污染和土壤污染的一个重要参数。例如，通过测定水体中的总氮含量，可以评估水体的富营养化程度，进一步研究水污染的来源和治理方法。凯氏定氮仪在水质监测、废水处理以及环境保护中起到了至关重要的作用。

4. 化学研究和制药工业

在化学研究中，凯氏定氮法不仅可以用来分析各类有机化合物中的氮含量，还广泛应用于药品研发过程中的质量控制和标准化分析。

如何使用凯氏定氮仪进行优化操作

1. 选择合适的催化剂：不同样品对消化条件的要求有所不同，选择合适的催化剂和消化温度有助于提高消化效率并减少误差。
2. 确保消化完全：不完全消化可能导致氮的损失或测量误差。因此，要确保消化反应完全，并在适当的时间和温度下进行。
3. 定期校准设备：凯氏定氮仪的准确性依赖于设备的状态，定期校准仪器和检查滴定设备是保证分析结果精确的关键。
4. 优化样品处理流程：根据不同的样品特性，调整样品的处理方法（如预处理、稀释等），避免因样品处理不当引发的误差。

结论

凯氏定氮仪作为分析实验室中不可或缺的仪器之一，其通过凯氏定氮法提供了高效且可靠的氮含量测定手段。无论是在食品、农业、环境还是化学领域，凯氏定氮仪都扮演着重要角色。通过适当的操作和优化，能够确保得到的分析结果，从而在科研、质量控制和环境监测等方面提供强有力的数据支持。

凯氏定氮仪，是检测食品、谷物、土壤等物质中氮含量的专用仪器。根据蛋白质中氮的含量恒定的原理，通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。凯氏定氮仪因其测量结果的准确性和可靠性广受各大消费者青睐，那么它是如何来工作的呢？

凯氏定氮仪是利用凯氏定氮法来测量物质中氮含量的。凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1833年建立的，它是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。它是通过在催化剂的催化下，利用浓H2SO4消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为NH3，随水蒸气蒸馏出来并为过量的H3BO3溶液吸收，然后通过标准盐酸来进行滴定，通过计算得出样品中氮含量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

凯氏定氮法所涉及的化学方程式

2NH3+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 （其中CuSO4做催化剂）

(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4

2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O

(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3

(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3

 （相关内容来源于网络）

凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理，通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法，故被称为凯氏定氮仪，又名定氮仪、蛋白质测定仪、粗蛋白测定仪。广泛用于食品、农作物、种子、土壤、肥料等样品的含氮量或蛋白质含量分析。

凯氏定氮仪常见问题

答：自动定氮仪在设置好相应的实验室条件后整个实验过程无须人为干预。具有测试速度快、效率高，样品测试结果平行性好，危险系数低等众多优势。

答：影响回收率的主要因素有，蒸馏时间、加碱、硼酸是否过量，消化是否完全，仪器的密封性。冷却水水流、水压、水温过高。

2、蒸汽发生器的使用寿命短。蒸汽发生器内一定要使用蒸馏水或纯水，避免水垢的产生。

答：如果使用手工滴定的话可以选择其他的颜色指示剂。如果使用全自动仪器，应按照产品规定的比例配置颜色指示剂，不可更换其他试剂。产品内置颜色变化过程在出厂时已调至Z佳状态，保证了结果的准确性。

答：不可以，每个厂家的消化管都有标准的尺寸和规格。尺寸不一样与机器的配套也就不一样，建议一定配置原厂生产的消化管。

答：理论上是可以的，具体的要看不同的实验，根据实验的不同需求而定。

答：样品回收率代表着仪器的准确性，也反映了整个仪器的制作工艺，因此样品回收率是评价设备好坏的重要指标。

4、按照国家强制规定所有消化实验必须在通风处内进行。

答：引起冷却水水流、水压不足的主要原因是：实验室自来水水压不足或使用自身水塔、楼层过高等原因引起，可以根据实验室的具体情况添加增压泵或自行调节水压。

答：目前9840没有查询功能，添加查询界面是为以后产品的升级做预留。

（来源：济南海能仪器股份有限公司）

答：定氮仪的设计使用寿命是10年，具体要根据自己的实验量的多少以及日常保养情况而定。

答：不会，因为在冷凝的过程当中会有空气跟随氨水一块进入吸收液中会产生气泡，属于正常现象，对实验结果没有影响。

答：定氮仪的易损件主要是消化管，因为是玻璃制品，在日常使用过程中难免出现碰撞、挂擦。建议多配置一部分消化管，产品的易耗品主要体现在日常实验用的试剂，主要是硫酸铜（催化剂）硫酸钾（提高硫酸的沸点）浓硫酸、硼酸、氢氧化钠，盐酸等。

答：需要，主要是天平，干燥箱、研钵、还有相关配置试剂的基础实验玻璃仪器。

答：配套其它品牌的消解仪需要确定消解仪的消化孔径与配套厂商是否一致。为保证整个实验结果的准确性与实验效率，建议购买原厂配套的消解仪。

半自动定氮仪只有蒸馏部分，全自动定氮仪是指含有蒸馏、滴定的一体机。

答：定氮仪的使用寿命取决于不同厂家采用的原材料，加工工艺和售后服务。因为凯氏定氮实验涉及强酸、强碱、高温等诸多因素，仪器的日常保养和维护也是决定仪器使用寿命的重要因素。

（4）超温报警：当蒸汽发生器的温度过高时，仪器自动停止工作并报警，保证仪器的使用安全。

答：定氮仪不在国家强制检定的产品目录内，不属于计量仪器，因此不需要质检部门的检定。

答：可以用已知样品含量的标准样品进行校验，一般常用配置好的硫酸氨进行仪器的标定校验。

（来源：济南海能仪器股份有限公司）

在农业、化工、环保以及食品检测等行业中，凯氏定氮仪是一种广泛应用的关键设备，用于准确测定物质中的总氮含量。其工作原理基于凯氏法，将样品中的氮转化为氨，然后通过蒸馏和滴定来确定氮的含量。尽管操作流程看似复杂，但只要掌握科学的操作步骤和注意事项，就能实现高效、准确的测试。本篇文章将为您详解凯氏定氮仪的具体操作流程，包括准备工作、操作步骤、结果分析以及维护注意事项，帮助您提升实验效率，确保数据的可靠性。

凯氏定氮仪的操作流程详解

一、准备工作与仪器调试

在开始正式检测前，首先要确保所有设备处于良好状态。清洁仪器的所有关键配件，包括反应管、蒸馏装置和滴定装置。采用适宜的试剂，如浓硫酸、硒酸或混合酸，依据样品类型选择。校准滴定管确保刻度准确，为测试提供基础保证。在操作前，检查所有连接是否紧固，无泄漏现象。

二、样品制备与加料

取适量的样品（根据样品性质和方法要求，一般在0.2-1.0克之间），放入消化管中。根据样品的氮含量预估加入适量强酸（如浓硫酸）以确保消化完全。必要时加入催化剂（如硒粉、铜片），提升消化效率。样品准备妥当后，加入适量的水或载体溶液，以便充分反应。

三、消化反应

将装置置于加热源上，开启加热，进行样品消化。消化过程中，注意控制温度，避免反应过度或不足。通常，消化时间在1-2小时之间，直到样品完全变成透明的酸性液体。这个步骤的关键在于确保所有样品中的氮成分都被转化为氨氮。消化结束后，让反应溶液自然冷却。

四、蒸馏提取

冷却后，将消化液倒入蒸馏装置中，加入适量的碱性试剂（如氢氧化钠），使氨氮在碱性条件下蒸馏出来。开启蒸馏装置，缓慢加热，捕集装置中的氨气，捕集到已知容量的吸收液中。蒸馏时间通常为5-15分钟，确保氨全部被转移。

五、滴定测定

蒸馏完成后，将吸收液取出，加入指示剂，进行滴定，直到颜色变化表示氨的终点。通过滴定所消耗的滴定剂体积，计算样品中的氮含量。此步骤的关键在于控制滴定速度和滴定终点的判定，以确保数据的准确。

六、结果计算与数据分析

根据滴定消耗的体积，结合浓度，运用公式计算样品中的总氮含量。一些仪器配备自动化软件或数据处理系统，大大提高了操作的便利性。分析结果时，应考虑样品的稀释度和校准曲线的准确性，确保报告的氮含量精确可靠。

操作中的注意事项

• 安全第一：操作浓酸和加热设备时应穿戴防护手套、护目镜，确保操作环境通风良好。
• 试剂管理：使用新鲜配制的试剂，避免过期或变质影响结果。
• 仪器清洗：每次使用后要彻底清洗消化管和蒸馏设备，防止残留物影响后续检测。
• 校准与维护：定期校准滴定管、标定仪器的准确性，及时维护设备，延长使用寿命。

结语

掌握正确的凯氏定氮仪操作流程，是确保检测数据科学性与准确性的前提。通过科学的操作步骤、细致的实验准备以及及时的设备维护，可以显著提升检测效率，为科研、工业生产和品质控制提供有力支持。作为专业人员，不断优化操作技能和维护策略，将为您的分析工作带来更高的精确度和更强的可靠性。

凯氏定氮仪怎么分析：一站式了解分析原理与应用

凯氏定氮仪作为一种高效且精确的实验仪器，广泛应用于食品、环境、化学等领域中的氮含量分析。其分析方法通过将样品中的有机氮转化为氨，并测定氨的含量，从而计算出样品中氮的含量。本文将从凯氏定氮仪的工作原理、应用领域以及操作流程三个方面详细阐述，帮助读者全面理解凯氏定氮仪的分析过程和实际应用。

凯氏定氮仪的工作原理

凯氏定氮分析法早由丹麦化学家凯尔于1883年提出，这一方法基于氮在特定条件下的蒸馏和测定原理。凯氏定氮仪的工作流程分为以下几个关键步骤：

1. 样品消化：将含有氮的样品与浓硫酸混合，并加入催化剂如硫酸铜和硒粉，经过加热消化，样品中的有机氮转化为氨（NH₃）。

   
   

2. 氨蒸馏：加热后的混合液在蒸馏过程中，氨气体通过蒸汽被分离出来，并吸收在已知浓度的酸性溶液中。通常使用标准盐酸或硼酸溶液作为吸收液。

   
   

3. 滴定测定：氨被吸收后，溶液中氨的浓度通过滴定法测定。常用的滴定剂为标准氢氧化钠溶液，计算出氨的浓度后，根据公式计算样品中的氮含量。

   
   

凯氏定氮法的核心就是利用蒸馏技术将氨气从样品中分离，并通过酸碱滴定精确测定氨的浓度，进而得出样品中氮的含量。

凯氏定氮仪的应用领域

1. 食品行业：凯氏定氮法是分析食品中总氮含量的标准方法之一，尤其是在蛋白质含量测定方面。它能够准确测量食品中蛋白质的含量，从而帮助生产商优化配方，确保产品质量。

   
   

2. 环境监测：环境中氮的浓度直接关系到水体和土壤的污染情况。凯氏定氮法广泛用于水样和土壤样品中氮的检测，特别是在水质监测和污染源追溯方面，具有重要的应用价值。

   
   

3. 化学研究：在化学实验和工业生产中，凯氏定氮仪常用于有机物中氮元素的定量分析。通过测定原料中的氮含量，可以推算反应的产物和转化率，提供重要的反应数据。

   
   

4. 农业科学：农业中施肥的氮含量直接影响作物的生长与产量。凯氏定氮法被用来测量土壤和肥料中的氮含量，以优化施肥管理，提高农业生产效率。

   
   

凯氏定氮仪的操作流程

1. 样品准备：根据样品的种类和氮的含量，选取合适的样品量。对于不同类型的样品，需要调整消化剂的种类和用量，以确保消化反应的充分进行。

   
   

2. 消化过程：将样品与硫酸及催化剂加入消化瓶中，启动加热装置，进行消化反应。消化过程应保持一定的温度，以保证有机氮完全转化为氨。

   
   

3. 蒸馏过程：完成消化后，将反应液通过蒸馏装置蒸馏，分离出氨气，并将氨气吸收在标准酸溶液中。

   
   

4. 滴定测定：吸收液中的氨气会被滴定剂滴定，测量氨的浓度，根据滴定消耗的滴定剂量计算样品中的氮含量。

   
   

5. 结果计算：根据滴定数据，使用标准公式计算样品中的氮含量，并根据需要进行进一步的分析。

   
   

在操作过程中，精确的加热温度、消化时间以及滴定的准确性都对结果产生重要影响，因此操作人员需严格按照操作规程进行操作。

专业分析与总结

凯氏定氮仪以其高精度和可靠性，在各个领域中都扮演着重要角色。通过简单的蒸馏和滴定过程，凯氏定氮仪能够有效地测定各种样品中的氮含量，尤其在食品、环境以及化学等行业具有不可替代的作用。对于需要进行氮元素定量分析的研究人员和实验室，凯氏定氮仪无疑是一个强大的工具。为确保分析的准确性，操作人员必须具备丰富的实践经验，并严格遵守仪器操作规范，确保每一步骤都能得到充分的执行。

凯氏定氮仪作为分析仪器中的重要工具，凭借其精确度和高效性，已经成为许多行业氮元素分析的标配设备。随着技术的不断进步，凯氏定氮仪的应用领域也将不断拓展，带来更多可能性。

了解凯氏定氮仪的使用方法对于实验室工作人员、食品检测员以及农学研究者来说至关重要。高效、准确的氮含量测定不仅影响着产品质量、安全检测和科研结论，也关系到生产成本与运营效率。这篇文章将详细介绍凯氏定氮仪的操作步骤、使用注意事项以及优化技巧，帮助用户在实际应用中达到理想的检测效果。

一、凯氏定氮仪的工作原理与核心组成 凯氏定氮法是一种经典的蛋白质含量测定技术，通过酸催化和蒸馏等步骤，将样品中的有机氮转化为氨气，然后进行定量分析。这一仪器主要由样品分解装置、蒸馏装置（包括接收瓶）、加热源、冷凝器以及检测设备组成。现代凯氏定氮仪配有自动控制系统，能实现自动化操作，提升检测的度与效率。

二、使用前的准备工作

1. 样品准备：无论是干样品还是液体样品，都应符合仪器检测要求。需确保样品纯净，无杂质或干扰成分。
2. 试剂准备：操作过程中常用硫酸、碱液、缓冲液等，必须按标准比例配制，避免浓度误差影响结果。
3. 仪器检查：确保仪器各部件清洁、连接紧密，接收瓶、冷凝器无堵塞。检查加热系统正常运作，并提前预热到工作温度。

三、凯氏定氮仪的具体使用步骤

1. 样品装载：将样品放入专用的消解管（也称为消解筒），加入适量硫酸，确保样品完全被浸湿。
2. 核心消解：将装有样品的消解管放入加热平台，启动消解过程。通常需要加热30至60分钟，直到样品完全分解，样品液变淡，且有特定的色泽变化。
3. 冷却与中和：消解后，取出消解管，待其自然冷却至室温。加入适量氢氧化钠溶液，中和反应，产生氨气。
4. 蒸馏操作：将中和后的消解液转移到蒸馏装置中，启动蒸馏程序。氨气在加热作用下被释放，经过冷凝器冷却后，留存于接收瓶中。
5. 定量分析：使用适配的硼酸吸收液捕集氨气，然后通过滴定或光度检测等方法确定氮含量。确保操作过程中滴定及时、准确，以获得可靠结果。

四、操作中的注意事项

• 调节温度：加热温度应稳定在设备规定的范围内，以避免样品过度分解或不足分解。
• 试剂浓度控制：正确配置试剂，避免浓度偏差导致氮浓度的误差。
• 气体泄露：确保蒸馏系统密封良好，避免氨气泄露，确保安全。
• 设定时间：遵循标准操作时间，防止过度或不足的消解和蒸馏。

五、常见问题与解决方案

• 氨气泄露：检查密封件和冷凝系统，必要时更换密封圈。
• 样品未完全消解：延长消解时间或增加加热强度，但不应超出设备允许范围。
• 测定结果偏差：重新校准仪器，确认试剂和操作流程符合标准。
• 蒸馏不充分：确保冷凝器正常工作，调整加热温度，提高蒸馏效率。

六、凯氏定氮仪的维护与优化

• 定期清洁：每次使用后清洗消解管和冷凝器，防止沉积物堆积影响性能。
• 校准检测：定期用标准含氮物质校准仪器，确保数据准确。
• 软件升级：保持设备软件最新，提高操作流程的便捷性和数值的可靠性。
• 操作培训：强化操作人员的技能培训，确保每个步骤得以正确执行。

总结 有效使用凯氏定氮仪，依赖于规范的操作流程、细致的维护和合理的优化策略。面向未来，随着科技不断进步，自动化与智能化的升级将进一步提升测定的准确性和操作的便捷性。专业用户应不断学习新技术，结合实际需求，发挥凯氏定氮仪在各领域的巨大潜力，为科学研究和产业发展提供坚实的数据支持。