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- 悲伤请止步I 2017-03-12 00:00:00
- 反射波谱反应地物本质特征,不同物质对不同光谱波段的吸收反射特性不同,理想条件下,特定的物质都有特定的光谱曲线
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吖啶酯DMAE-NHS的发光动力学
吖啶酯DMAE-NHS的发光为闪光,0.4s时发光强度达到zui大,前2s钟内发光强度下降很快,此后下降比较慢,发光半衰期约为0.9s。DMAE-NHS的发光动力学性质不受DMAE-NHS浓度的影响,改变DMAE-NHS浓度只影响发光强度的大小,但不影响其达到zui大发光强度的时间和半衰期。
吖啶酯DMAE-NHS的发光强度
DMAE-NHS的动力学检测范围为1.25×10-11~1.25x10-17mol,发光强度为6.11×1018cps/mol或1.03×107cps/ng。用DMAE-NHS标记TSH单克隆抗体,DMAE-NHS与Ab的分子比为2.4的情况下,实验测得DMAE-NHS-Ab的发光强度为1.8×1019cps/molAb或1.125×105cps/ngAb。DMAE-NHS-Ab的动力学检测范围为1.0×10-12~1.0×10-18mol。
发光启动试剂对DMAE-NHS发光强度的影响
吖啶酯发光通常采用的发光启动试剂有三种配方:
二种物质的配方是H2O2和NaOH;
三种物质的配方是HNO3(有些用HCL代替)、H2O2和NaOH;
四种物质的配方为除上述三种物质外还加入一种表面活性剂。如CTAC、TritonX-100、Tween-20等以增强发光。
发光启动试剂使用的HNO3,H2O2,和NaOH的浓度和体积不同,DMAE-NHS发光强度不同,采用如下组成时发光强度zui大,即(1)100μl0.1mol/LHNO3+0.1%H2O2(2)100μl0.25mol/LNaOH。
加入表面活性剂能增大DMAE-NHS的发光强度,试验了三种表面活性剂∶CTAC,TritonX-100,Tween-20对DMAE-NHS的发光强度的影响,2%TritonX-100的增强的效果量好,能使DMAE-NHIS的发光强度增大4.5倍,2%Tween-20和0.2%CTAC使DMAE-NHS的发光强度分别增大3.5和2.8倍。加入TritonX-100或Tween-20能增加DMAE-NHS的发光强度而不引起本底增加,但加入CTAC时引起本底增加很多,故不宜使用CTAC做增强剂。
吖啶酯DMAE-NHS的热稳定性
DMAE-NHS的热稳定性随pH值增大和温度升高而降低,室温(20℃)下,DMAE-NHS在pH为5.8,7.0,8.0的PB缓冲液中均较稳定,16天后发光活性分别降低1.6%、3.6%和8.3%。37℃下,DMAE-NHS在pH为5.8,7.0,8.0的水溶液中,经过16天后的发光活性分别降低8.9%、22%和42%。
吖啶酯DMAE-NHS的水解性
DMAE-NHS在水溶液中的发光活性随时间而降低的原因是因为发生水解,在碱性环境中有利于水解,升高温度也有利于水解,即DMAE-NHIS的水解速度随溶液pH值增大和温度升高而加快。在4℃或冰冻条件下,DMAE-NHS在pH为7.0的0.1mol/L PB缓冲液中稳定,保存半年后,其发光活性没有下降。
德晟吖啶酯DMAE-NHS的优势
吖啶酯DMAE-NHS与传统吖啶酯相比,发光效率更高,热稳定性更好,亲水性更强一些,该化学发光试剂光量子产率高、背景低,与蛋白、抗原,抗体等偶合后,发光效率几乎不受影响,从而成为优良的化学发光免疫分析标记试剂。
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大鼠ELISA试剂盒运用的基本原理就是将抗原抗体固定到特定的载体上进行反应,并通过酶催化底物发生化学变化,将抗原抗体反应通过颜色的办法显现出来。
固相吸附蛋白对错特异性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才华,为了确保抗原抗体反应的特异性,因而被剩余的固相表面应该用抗原抗体反应无关蛋白封闭,也可用脱脂奶粉、明胶、牛血清代替。酶可以通过共价键与抗原或抗体衔接构成结合物,当抗原抗体反应的时分,被检测靶方针中也结合了酶分子。
大鼠ELISA试剂盒该还具有以下特性:
特异性:大鼠ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的要害组分、抗体对有关,若抗体对中为多抗,另一个有必要为单抗,建议运用双单抗;
简便性:在高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越简略遭到用户等候,这也无妨作为选择试剂盒的一个方针;
简易:以简略的一步反应取代惯例法的五个进程;
通用:适合于绝大多数一抗体,并且不需要二抗体反应;
便利:以1个小时取代惯例法的3-5个小时;
活络:具有与惯例法相似的活络度;
重现性好:实验成果重现性好;
经济:抗体和试剂可重复运用4-5次。
结合在抗原抗体中的酶分子,可以促进底物发生颜色反应,检测人员可以裸眼查询,可以通过颜色来断定是否有免疫反应的存在,通过颜色的深浅判别标本中相应抗原或抗体的含量,也可借用酶标仪在恰当的波长读取吸光度值。
将抗原抗体反应固相化,即实验中的包被环节,使抗原或抗体吸附于固相载体表面。其机制可能是聚苯乙x表面间的疏水基团可以无选择性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不损坏蛋白分子结构,坚持其生物学特性和免疫学活性。
大鼠ELISA试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
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