米酵菌酸的检测（GB 5009.185-2016）——安谱实验一直在行动

受高温潮湿天气影响，河粉、肠粉、米线、银耳和木耳等食品容易受椰毒假单胞菌污染而产生米酵菌酸毒素，为预防米酵菌酸毒素中毒，近日广东省市场监督管理局特发布相关食品的消费提醒。米酵菌酸中毒不可小觑，安谱实验早在2017年就针对米酵菌酸的检测开发了方法，为食品安全的检测出谋划策。

米酵菌酸是椰毒假单胞菌酵米面亚种产生的一种可能引起食物中毒的毒素，发酵玉米面制品、变质鲜银耳及其它变质淀粉类制品是引起中毒的主要原因，银耳中米酵菌酸的限量值为0.25mg/kg。

下面跟随小编一起看看米酵菌酸的检测方法以及实验过程中的注意事项~

一、样品前处理

银耳样品粉碎均匀，称取2g 于50ml 离心管中，（基质加标：100ppm 40ul）加入20ml 甲醇- 氨水溶液，混匀，铝箔纸包裹室温浸泡1h，然后超声提取30min，4000r/min 离心5min，取上清液5ml，40℃氮吹至1ml 左右，加水定容至3ml，用氨水调pH 至9-10待净化。

二、固相萃取过程（避光）

SPE 小柱：CNW Poly-Sery MAX 混合型阴离子交换 SPE 小柱（SBEQ-CA3379 60mg/3ml）

活化：5ml 甲醇

平衡：5ml 水

上样：上样液用氨水调pH 至9-10，控制流速1d/s

淋洗：5ml 水和5ml 甲醇淋洗，弃去流出液，真空泵抽干

洗脱：2*3ml 2% 甲酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱液

洗脱液处理：40℃水浴氮吹至干，加入1ml 流动相，涡旋溶解，混匀，过滤后进行HPLC 分析（棕色样品瓶）。

三、色谱条件（避光）

色谱柱：Athena C18-WP 柱, 250*4.6mm，5μm

流动相：甲醇：水=75:25（水用冰乙酸调pH 至2.5）

流速：1.0mL/min

柱温：30℃

检测波长：267nm

进样量：20uL

四、实验谱图

图1、1ppm标准品谱图

图2、基质空白谱图

图3、1ppm基质加标谱图

五、实验数据

六、耗材推荐

      近年来，每年夏秋季节米酵菌酸中毒事件时有发生，近日，永城两名女子吃凉皮中毒致一死一伤，患者血液尿液均检测出高浓度米酵菌酸；2021年8月，一家三口因食用长时间泡发的木耳而导致米酵酸中毒，被医院ICU收治。2020年10月，黑龙江鸡西市鸡东县某家庭，因食用酸汤子，致9人抢救无效身亡，经流行病学调查和采样检测，在玉米面中检出高浓度米酵菌酸，同时在患者胃液中亦有检出。

米酵菌酸的危害？哪些食品一旦变质可能含有米酵菌酸？米酵菌酸的防控检测手段？下面带您了解。

1、米酵菌酸概述

      米酵菌酸是由椰毒假单胞菌属酵米面亚种产生的一种可以引起食物中毒的毒素。米酵菌酸最喜欢藏在这三类食物中：谷类发酵制品如玉米淀粉、发酵糯小米、河粉、糍粑、凉粉、米粉等；劣质的薯类制品如马铃薯粉条、甘薯面、山芋淀粉等，还有变质或长时间泡发的银耳、木耳。食入米酵菌酸毒素污染的食物可引起人或动物中毒，出现呕吐、恶心、腹泻等症状，严重者可导致死亡，致死率超40%。另外需要提醒的是米酸菌酸不怕高温，100℃高温无法消除，并且在医学上也没有快速解 毒的特 效药。

2、米酵菌酸毒素检测解决方案

      米酵菌酸毒素具有不易察觉，毒性强、病死率高等特点，所以谷物类食品加工过程中风险控制，和对米酵菌酸的检测防治就显得尤为重要。Pribolab提供米酵菌检测解决方案，包括液相色谱-质谱/质谱法方案和米酵菌酸快检解决方案，帮您及时应对米酵菌酸的分析，迅速建立方法，快速完成检测项目。

 2.1 液相色谱-质谱/质谱法方案

       目前市面上常用方法以及国标规定方法为固相萃取柱净化和液液萃取的净化方法，可能会面临操作复杂、有机试剂消耗大、干扰多、回收率低等问题，Pribolab技术研发中心基于现有的标准方法的不足和局限性，参考食品安全国家标准-食品中米酵菌酸的测定（GB 5009.189-2016），优化前处理方法，建立了多功能净化柱“一步法”净化，可用于液相色谱二极管阵列检测器或液相色谱串联质谱检测食品中的米酵菌酸残留，具有前处理简单快速、环保低有机试剂消耗、回收率高，净化效果好的特点，适用于各类食品基质中米酵菌酸的测定。

A.液相液质条件

D.结果分析

     米酵菌酸结构式含有3个羧基（-COOH），酸性较强，容易丢失质子而带上负电荷，其保留因子和选择性受pH值影响大，当流动相条件为酸性时可避免离子化从而得到对称色谱峰。因此液相色谱采用甲醇+1%乙酸水（80:20）为流动相，分离效果好，方法检出限为0.2μg/g。在液质检测中0.1%甲酸水-乙腈为流动相，同样酸性环境抑制了米酵菌酸的电离，使其以分子形式存在，在反向固定相中的保留增强，且减少了与固定相中残存硅醇基的结合，有助于改善峰型，方法检出限0.1μg/kg。

米酵菌酸检测采购指南

2.2 米酵菌酸快检解决方案

Pribolab提供米酵菌酸快速检测试纸条（研发中），本产品可快速检测米面发酵制品，银耳、木耳制品等中米酵菌酸残留，适用于各类企业、检测机构、监督部门的现场快速检测。本产品检测过程中应用了竞争法免疫层析原理。

结果判断

  阴性（－）：T 线（检测线）显色比 C 线（对照线）深，表明样品中米酵菌酸浓度低于检出限或无米酵菌酸残留。

  阳性（＋）：T 线显色与C 线一样深，或比C 线浅，或T 线无显色，表明样品中米酵菌酸浓度等于或高于检出限；

  T 线比 C 线越浅，表明样品中米酵菌酸含量越高。

  无 效：未出现 C 线，可能操作不当或检测条已失效。应再次阅读说明书，并用新的检测条重测。

Pribolab提醒您：夏日天热 需警惕米酵菌酸引起的食物中毒！

      近期，农业农村部发布了一系列GB23200的新国标，主要是针对植物源性食品不同农残的检测；12月份即将正式实施；安谱实验根据这些新标准，并结合农业农村部之前发布的征求意见稿，率先推出了食品安全国家标准的耗材配置方案。包括标准品，小柱，色谱柱，试剂等耗材。安谱实验以品类齐全，价廉质优的实验室耗材，灵活到位的服务，快速为各位老师排忧解难。

目前，市面上婴幼儿食品、配方奶粉经常被发现标签不合格，左旋肉碱、胆碱、铁镁元素等含量不符合国家标准，食品安全问题受到人们越来越多的关注。安谱实验针对GB29989-2013婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的检测，推出新品肉碱乙酰转移酶和乙酰辅酶A钠盐，为您提供配套试剂耗材一站式购买体验。

● 左旋肉碱不是跟减肥有关的吗，怎么会添加在奶粉中呢？

● 方法中用到很多试剂，在哪里可以一次性买齐？

● 实验遇到问题该怎么办？

不要急，

听安谱实验老师为您一一解答：

     左旋肉碱在脂肪转移代谢方面有关键作用，是婴幼儿必须的营养物质。因为婴幼儿左旋肉碱合成能力较弱，因此必须补充外源性左旋肉碱。国家食品安全标准GB29989-2013中规定了婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定方法。

安谱实验针对该国标不仅为您配备试剂耗材，还为您提供全套解决方案！

安谱实验与您一起测定婴幼儿奶粉中的左旋肉碱

1方法原理

2样品前处理

3标准曲线的建立

标准曲线

4市售品牌婴幼儿奶粉中左旋肉碱的含量检测

取A、B、C三品牌婴幼儿奶粉样品处理上清液各2 mL，按照标曲步骤进行检测并得到吸光度，代入标准曲线计算奶粉中左旋肉碱的含量，结果如下：

注意事项：

1）标准中显色剂配制使用的是2-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)，全称应为二硫代二硝基苯甲酸，注意不要使用2-硝基苯甲酸（C8H6N2O6）；

2）吸取乙酰肉碱转移酶悬浮液前，应先将其摇匀后吸取。

3）在比色皿中加入乙酰肉碱转移酶溶液混合均匀时，建议盖上比色皿盖子，上下摇晃均匀。

产品信息

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VX关注公众号：安谱实验学堂

乌兹别克斯坦代表团一行

参访安谱实验

尊敬的各位事业伙伴：

为实现品牌升级，为未来发展赋能，安谱实验已于2022年启用全新VI，品牌标识及slogan全线换新，并陆续开展在产品包装、企业文化展示、办公用品、企业环境、印刷出版等方面的应用。

此次，安谱实验对纸箱包装进行全面绿色升级。

一、展示多品牌矩阵 

本次纸箱包装更新在原有的安谱实验两大自主品牌ANPEL和CNW的logo之外，新增子公司义准生物及安谱璀世的logo，展示多品牌矩阵，助力多品牌战略布局。

二、采用新环保工艺 

安谱实验作为实验室创新服务领跑者，也争当“双碳时代”绿色发展的先行者。积极践行国家“碳达峰、碳中和”战略，本次纸箱包装更新采用获得“快递包装绿色产品认证”的产品，以实际行动助力绿色可持续发展。

温馨提示

新纸箱包装于2023年4月启用，因原纸箱包装尚有一定库存，所以未来一段时间内会存在新旧纸箱包装并发的情况。由此给您带来的困扰及不便，还请谅解！

再次感谢您一直以来的支持和信赖！

特此通知，敬请理解！我们将一如既往地专注于提供优质的产品和卓 越的服务，希望继续得到您的信任与支持。

上海安谱实验科技股份有限公司

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