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生物技术在环境中的应用?

单词ieq 2018-12-05 21:12:56 388  浏览
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2018-12-05 21:12:56 388 0
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各种物料在离心喷雾干燥机中的温度环境应用

离心喷雾干燥机采用高速离心运动的盘式雾化,将物料雾化成雾状液滴,与经过特殊分布进入塔体的热空气在相配合的运动轨迹中同时进行热交换,在极短时间内蒸发掉水份,形成均匀有粉状干成品。离心喷雾干燥机广泛用于化工、食品、医药、石化、轻工、农药等行业的干燥作用。

离心喷雾干燥机干燥速度快,料液经雾化后表面积大大增加,在热风气流中,瞬间就可蒸发95%—98%的水份,完成干燥时间仅需数秒,特别适用于热敏性物料的干燥。产品具有良好的均匀度、流动性和溶解性,产品纯度高,质量好。生产过程简化,操作控制方便。对于含湿量40-60%(特殊物料可达90%)的液体能一次干燥成粉粒产品,干燥后不需粉碎和筛选,减少生产工序,提高产品纯度。对产品粒径,松密度,水份,在一定范围内可通过改变操作条件进行调整,控制和管理都很方便。

喷雾干燥过程完全依赖于组合物的产品。有些是非常容易和其他非常难以干燥。

排出的空气的总水分含量是*重要的参数之一。这取决于组合物的产品,例如在排出空气中的总水分含量高,可干燥的产品具有高的蛋白质含量,而高碳水化合物含量要求低的水分含量,以避免粘在腔室,管道和旋风粉末。

这也是为什么在周围空气中的总水分含量是一个重要的参数,知道前工厂的设计,作为减少,如果周围环境的总水分高“干燥电位”。

知道的另一个重要参数是在浓缩物中的*大固体含量。这是粘度驱动的,因此也取决于该组合物的产品。作为一个经验法则适用以下情况:

脂肪含量高:允许更高固形物含量。需要较低的干燥温度,以避免粘(即在排出的废气中的总水分含量低)。

蛋白质含量高:要求较低的固体含量,由于粘度(水解蛋白除外)。允许较高的干燥温度不沾(即总水分含量高的废气)。的蛋白质含量较高,更难以成为附聚过程。

碳水化合物含量高:允许更高的固体含量(除淀粉,由于其高粘度)的浓缩物。允许较高的喷雾干燥温度不沾,如果碳水化合物的高分子量型(例如,麦芽糖糊精和淀粉),这会导致在玻璃化转变温度的增加。腔室排出的空气中的水分含量可以更高的干燥粉末时,具有较高的玻璃化转变温度,从而在更经济的干燥。

如果碳水化合物是低分子量型(如:糖,乳糖和葡萄糖浆),它会导致在玻璃化转变温度,它要求较低的喷雾干燥温度,以避免粘(即在较低的总水分含量减少排出的空气)。


2022-04-06 10:21:03 259 0
MBP标签:深度解析其蛋白大小、序列及其在生物技术中的应用

MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。

 

MBP标签序列:396 AA

 

纯化:融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化。结合的融合蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。结合亲和力在微摩尔范围。一些融合蛋白在0.2% Triton X-100或0.25% Tween 20存在下不能有效结合,而其他融合蛋白则不受影响。缓冲条件为pH7.0到8.5,盐浓度可高达1M,但不能使用变性剂。如果要去除MBP融合部分,可用位点特异性蛋白酶切除。

 

 

mbp标签优缺点:

简单亲和纯化即可实现;

增加蛋白表达量和蛋白稳定性;

促进蛋白的可溶性和正确折叠;

标签较大,对蛋白的结构/功能会有一定影响。

 

常见的蛋白标签:

 

常见的融合标签包括谷胱甘肽S-转移酶 (GST)、麦芽糖结合蛋白(MBP)、几丁质结合蛋白(CBD)、硫氧还蛋白(Trx)、链霉亲和素、多聚组氨酸(Poly-His)、小分子泛素样修饰蛋白(SUMO)和血凝素标签(HA)。

 

GST:

 

GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解-毒过程中起到重要作用的转移酶,它的天然大小为26KD。将它应用在原核表达的原因大致有两个,一个是因为它是一个高度可溶的蛋白,希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性;另一个是它可以在大肠杆菌中大量表达,起到提高表达量的作用。GST融合表达系统广泛应用于各种融合蛋白的表达,可以在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达。结合的融合蛋白在非变性条件下用10mM 还原型谷胱甘肽洗脱。在大多数情况下,融合蛋白在水溶液中是可溶的,并形成二体。GST标签可用酶学分析或免疫分析很方便的检测。标签有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性。在大多数情况下GST融合蛋白是完全或部分可溶的。纯化:该表达系统表达的GST标签蛋白可直接从细菌裂解液中利用含有还原型谷胱甘肽琼脂糖凝胶(Glutathionesepharose)亲和树脂进行纯化。GST标签蛋白可在温和、非变性条件下洗脱,因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在变性条件下会失去对谷胱甘肽树脂的结合能力,因此不能在纯化缓冲液中加入强变性剂如:盐酸胍或尿素等。如果要去除GST融合部分,可用位点特异性蛋白酶切除。检测:可用GST抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。

 

HA:

HA标签蛋白,标签序列YPYDVPDYA,源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇,9个氨基酸,对外源靶蛋白的空间结构影响小, 容易构建成标签蛋白融合到N端或者C端。易于用Anti-HA抗体检测和ELISA检测。用HA peptide可实现带HA tag的蛋白洗脱,0.15M Arginine-HCl缓冲液, pH3.0可实现蛋白纯化beads 的重生。

 

……

 

更多关于蛋白标签详情可以关注:https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag


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