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- 2011chengmo 2009-01-21 00:00:00
- 可能就是红墨水 为的是能更清楚地观察细菌 像做洋葱表皮细胞切片时,就是需要红墨水的
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- 哥哥哥哥一888 2009-01-16 00:00:00
- 伊红美蓝 瑞氏(Wright's staim;美蓝-伊红Y)染色: 1.瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料黄色伊红(Eostm Y)合称伊红美蓝染料即瑞氏(美蓝-伊红Y)染料。 2.用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂,有两种作用: (1)甲醇使瑞氏染料中美蓝(M)与伊红(E)在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。 甲 醇 ME(瑞氏染料)----→M+ + E- 在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应。 (2)甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积,提高细胞对染料吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应。 3.瑞氏染液配制: (1) 瑞氏染液配制: 瑞氏染料 830gm或1g 甲醇(AR) 500ml或600ml ○先称干燥(事先放入温箱干燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着。 ○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(Z好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。 ○存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3个月以上为佳。 (2) 缓冲液: ●缓冲液作用: ○染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察pH值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。 ○缓冲液须保持一定的pH使染色稳定,PBS的pH 一般在***~6.8, ○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使pH恒定。 ●缓冲液配制(pH6.4~6.8,弱酸性): 配方1 : 配方2: 1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml 1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml H2O(新鲜) 加至1000ml 置室温黑暗处,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染则应报废。
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