Milli-Q®讲堂 |（超）纯水系统中微生物控制常见问题集

微生物是水中比较特殊的一类污染物，它本身具有繁殖、代谢的能力，释放盐、酸类物质，导致水质的二次污染，所以大家对微生物越来越关注。

1

为什么建议在（超）纯水系统

   停用期间冷藏纯化柱？

离子交换树脂是纯化柱中Z重要的填料成分之一，激活的离子交换树脂是一种半水化的形式。

如果不冷藏，离子交换树脂可能脱水。一旦离子交换柱脱水，其离子交换能力失效。在湿润的状态下，残留在树脂颗粒中的细菌可以迅速繁殖，在正常室温下残留下来的细菌会滋生扩散而堵塞整个柱子。控制微生物繁殖速度的一个办法就是冷藏法。

因此，短时间储存可以将纯化柱封口并置于冰箱冷藏（4℃）。

2

（超）纯水系统如何去除

    水中的微生物？

Milli-Q®水纯化系统，可以通过如下4种的方式，控制微生物的繁殖：

a.镀银活性炭

银离子的存在，可以YZ微生物的繁殖；

b.反渗透膜

非常关键的纯化技术，对所有污染物都有非常高的去除效率，可以截留99%以上的微生物；

c.265nm杀菌紫外灯

相对于传统的254nm紫外灯，该波长的紫外杀菌效率大幅度提升，已经应用于第7代纯水&超纯水一体机IQ 70XX系列的产品的管路及储存系统中；

d.筛式过滤或者超滤

通过其截留作用，拦截水中残留的少量微生物，保证取水微生物含量符合要求。

3

 多长时间清洗一次反渗透膜？

如果是因为反渗透膜被阻塞而需要清洗，那么用两种清洗剂（清洗剂A和清洗剂B）可以解决绝大多数问题。把清洗剂投入消毒口，然后启动清洗循环，清洗循环结束后，系统自动进入待机模式。

还有一种杀菌用的氯试剂片，也从消毒口投入。它在中性或者酸性液体环境中会生成次氯酸，能有效的杀灭细菌。建议每一个月进行一次氯试剂消毒。

4

 为什么终端过滤器的

孔径只有0.22μm，而不是0.45 μm？

绝大多数的细菌大小为1μm。目前所知的Z小细菌为特定条件下生长的假单细菌株，其大小为0.3μm。

因此，选用0.22μm的终端过滤器就能去除已知的Z小细菌株。

5

细菌会引起纯水中

   TOC水平的升高吗？ 

无论是活菌或是已经死亡的细菌，体内都含有复杂多样的的有机分子，伴随其代谢、死亡，这些有机分子会对TOC造成不同程度的影响，进而对实验结果造成影响。

6

 杀灭细菌的Z有效方法是什么？

有多种消毒试剂和方法可供选择。他们可以大致分为两大类：

➤化学方法：臭氧、氯、酒精、去垢剂等等；

➤物理方法：加热、渗透压、辐射和过滤：

• 氯处理是杀灭水中细菌Z有效的方法之一，氯和水反应会生成次氯酸：

  Cl2 + H2O = HOCl + H+ + Cl-；

  （低pH值更有利于次氯酸的生成）

• 等效的杀菌方法还包括臭氧处理以及紫外光氧化。

更多Milli-Q® IQ 7000 超纯水系统，请关注本展台，展台链接：www.yiqi.com/zt484

更多Milli-Q® IQ 7000 超纯水系统信息，请关注默克化工的展台，链接如下：http://www.yiqi.com/zt484/

复工了，大家又开始进入忙碌的工作中了，那么作为实验室的基础仪器之一，纯水系统的现状如何了？该对我们的纯水系统做哪些维护呢？

为了回答这个问题，首先来了解一下，经过了整个假期，我们的纯水系统可能会存在哪些风险呢？总结起来主要有以下两点：

一 系统内部管路和水箱带来的影响

▲ 图1 超纯水储存在聚乙烯容器所产生的有机溶出物< HPLC 的分析结果 >

我们知道，世界上没有完全不溶于水的物质。从上图可以看出，水存放越久，溶解的物质越多，因此，我们在用水之前一定要考虑好，新鲜的超纯水才是我们实验成功的保证！

二 水中微生物的污染

▲ 图2 纯水中的各种微生物

纯水中微生物的危害一般并不是个体，而是以菌膜（Biofilm）的形式存在且危害更加严重：菌膜会对环境释放出内毒素、细菌、酶及高分子有机分解物。

▲图3  水系统产生菌膜的电镜照片（放大5300倍）

水是生命之源，地球上只要有水就会有生命。而在水处理领域，与微生物的战争也将会持续下去，我们的方法就是YZ和杀灭。

既然水已经在系统内部或水箱中经过了长期存放，我们的水系统该做哪些维护呢？

简单来说有两点

需要我们特别关注

01

Milli-Q^®作为实验室纯水行业的ling导者之一，已经为用户想好了万分周全的办法。Lab close功能专门为假期而设计，可以使纯水机在放假期间保持Z低限度的运行。

如果您放假前设置好了Lab close功能，需要您手动解除以便使系统恢复预取水状态。只需点击右上角的Exit图标即可。

▲ 图4  Milli-Q^®水机的“Lab close”功能

02

如果您的水系统购买得相对较久而无此功能，那就需要您手动操作了。具体方式如下：

·纯水系统+水箱：在正式使用之前，将水箱彻底排空，再让纯水系统产新鲜水至水箱满，如果问题比较严重，也需要进行水箱的清洗消毒。具体清洗步骤请参考如下说明

·超纯水：如果必要请记得放水5-10升，以便将滞留系统内部的水排掉

·另外，经过了假期，系统再次工作时必须注意是否有报警发生。如果有，请将报警信息发送至纯水技术支持邮箱：

china.water@merckgroup.com

或技术支持热线400-889-1988转3号线

▲ 图5 Milli-Q^®水机的警报功能

更多系统维护的Tips请看这里

菌膜防范

✦ 水箱要配置好UV灯及空气过滤器，Z好能够避光；

✦ 定期清洗水箱(如每半年或一年)；

✦  按时更换耗材，不管用水量大小，因为凡是浸泡在水中的耗材，都会不可避免地形成菌膜；

✦ 合理的用水量，可以确保纯水系统的稳定。

水箱清洗

✦  清洗剂准备：以4克/升浓度的分析纯NaOH溶解于烧杯中，再倒入水箱。如30升水箱需加120克的NaOH，并请做好安全防护。（注意：不要用刷子抹布等接触水箱内部，以免造成表面的损伤，更易促进细菌的滋生。）

✦ 时间准备：NaOH溶液在水箱中浸泡需要至少1小时，然后排放所有废液后，由纯水系统产出的水（产水至水箱满）进行冲洗，直至水箱中水的PH值呈中性。一般冲洗三桶后PH值可恢复正常。

✦ 废液排放：如果对环保有要求，可以使用相等当量的HCl来中和NaOH后再行排放。

刚刚结束的五一小长假，Q博士见到越来越多的人出门踏青，这意味着国内疫情防控的常态化，人们对正常出街的安全性越来越有信心。然而不时发生的“假阴性”现象也仍然是科学家和普通群众愈发关心的关键问题。

今天Q博士带大家走入核酸检测的常用方法PCR方法，以及如何在PCR检测过程中降低检测结果假阴性概率。

什么是PCR技术？

PCR技术又称为聚合酶链式反应。是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的Z大特点是能将微量的DNA大幅增加。

在新冠病毒检测中，核酸检测被定义为临床诊断的金标准，RT-PCR技术被反复提到，它是一种将RNA反转录和PCR相结合的技术。首先在反转录酶的作用下，将提取到的RNA合成cDNA,再以cDNA为模板，在DNA聚合酶作用下不断扩增（变性-退火-延伸多个循环）合成目的片段并进行分析。

PCR用水

PCR技术目前多搭配试剂盒使用，也有用户自行制备反应体系，无论哪个过程都需要使用水。无论是近年来季节性爆发的甲流乙流，还是目前都在经历的新冠病毒，在检测过程中都涉及一个痛点，那就是如何尽可能提高核酸检测的准确性，减少假阴性结果出现的可能性。

我们首先分析一下假阴性结果出现的原因，以新冠病毒核酸检测为例，假阴性的主要原因有：

1 病人病程：不同病程，患者体内病毒载量不同；

2 采样部位：咽拭子、鼻咽拭子、痰液、肺泡灌洗液等不同采样部位病毒载量均不同；

3 采样准确性：拭子质量，工作人员操作等；

4 试剂盒的质量：引物设计以及水质控制。

为了顺利将提取到的RNA反转录并实现DNA的成功扩增，必须YZ核糖核酸酶（RNases）的降解作用，如果试剂盒用水内含RNases，将极有可能导致假阴性结果的出现。

去除RNases的主要方法

1 高压灭菌：即便是在180℃下高压灭菌4h之后，RNases仍保持某些活性，且某些细菌失活会释放更多的RNases；

2 DEPC法（二乙基焦碳酸酯处理法）：利用二乙基焦碳酸酯（DEPC）处理方法使酶失活是用来YZ水溶液中RNases活性的常见方法。然而，二乙基焦碳酸酯是一种可疑致癌物，处理须小心；同时该方法虽然能够使酶失活，却无法将其从水中去除，同时清除多余的DEPC过程中，会产生乙醇，二氧化碳等其他污染物；

3 超滤法：超滤是一种真正能够从水溶液中清除RNases的方法。默克Milli-Q^®选用内置在丙烯腈丁苯橡胶（ABS）外壳中的聚砜超过滤膜作为超滤柱的主要成分，在一定水流速一定浓度范围内，超滤具有充分的截留作用。超滤处理可有效取代DEPC处理方法生产无RNases水。

Milli-Q^®生产无RNases水解决方案

一个短视频告诉您

TA的黑科技

默克Milli-Q^® Biopak终端精制器

即使国内疫情已经基本控制，但Q博士提醒大家仍然要积极防护，保护自己。戴口罩，勤洗手。默克Milli-Q^®与您携手，早日结束这场攻坚战！

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水是实验室重要的溶剂，能配置溶液，又能参与反应。在做化学实验中，往往要用到不同的纯度的水，具体有哪些分类？

蒸馏水是实验室Z常见的一种纯水，它是指经过蒸馏、冷凝操作而得的水，蒸两次、三次的分别为重蒸水和三蒸水。蒸馏水能够去除自来水中的大部分污染物，但是仍然存在一些挥发性的杂质。

去离子水是通过离子交换树脂除去水中的离子态杂质而得到的近于纯净的水，但是水中仍然会存在一些可溶性的有机物，存放后容易引起细菌繁殖。

除了上述两种还有实验室纯水，根据《GB_T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法》，实验室纯水可分为以下三种：

一级水：用于严格要求的分析试验，比如HPLC分析用水，一级水可以用二级水经过石英设备蒸馏或离子交换混合床处理后，再经 0.2 μm 微孔滤膜过滤来制得。

二级水：用于无机痕量分析等试验，例如原子吸收光谱分析用水。它可以通过多次蒸馏或者离子交换等方式制备。

三级水：用于常规的化学分析实验，通过蒸馏等方法即可制得。

面对如此严格的标准，通过人工制得实验室纯水往往步骤较多，比较麻烦。如今实验室纯水机的大量应用帮助用户更加便捷的获得实验室纯水。

英国普拉勒是实验室纯水系统行业的主要供应商，主营： 纯水机、超纯水机、实验室纯水系统、实验室超纯水系统、实验室ZY纯水系统。普拉勒实验室超纯水系统 OmniaPure ASTM具有以下特点：

紧凑的外壳，易于操作和拆装；
几秒钟一体化纯化柱的更换；
可单独调节和净化的耐水减压装置；
宽范围的电源单元，自动电压调节为48伏，可以国际使用；
静压运行长寿命循环泵（<40dB），实现全循环，再循环，泵体安装在分配器顶部；
水中污染物综合预处理装置保证给水水质的清洁，降低使用成本；
紫外线波长为185/254 nm波长的微生物清洁度Z 高，TOC减少；
超无机净化装置去除无机物和残留无机离子；
集成超滤单元用于内毒素、蛋白质、DNASs和RNases的保留；
质量清洗冲洗阀，对接触介质的所有部件进行彻底消毒；
间隔模式下的质量清洗；
多语言微处理器用于所有操作和性能的控制、监视参数；
使用微滤的终端分配器可以对超纯水质进行纯化，进一步得到的无菌超纯水。

普拉勒实验室超纯水系统 OmniaPure ASTM技术规格：

  电导率μs/cm（超纯水柱）：0.055

  电阻MΩ×cm（超纯水柱）：18.2

  TOC-value*ppb (紫外)：5 – 10

  瞬时流速l/min：up to 2

  颗粒**/ml：< 1   

  细菌**CFU/ml：< 0.1

给水要求：

   离子交换、反渗透制备水、电渗析或蒸馏水

   给水温度°C：+ 2 up to 35

   输入电导率μS/cm：< 30

   TOC-value ppb：< 50

技术资料

工作压力：0.1 – 6

电源电压伏特/赫兹：90 – 240/50 – 60

连接负载千瓦：0.1

连接器尺寸mm：8 mm hose

环境温度℃：+ 2 up to + 35

整机尺寸mm****：390 x 720 x 525

重量kg ：19

依赖于给水质量

灭菌过滤器0.2μm

 Optifill取水分配器

（相关内容来源于网络）

《GB 5009.168-2016 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》适用于食用油、乳粉等食品中脂肪酸的检测。在开展食品脂肪酸的检测时，实验员经常会遇到各种小问题，小编今天整理了一些常见问题进行分享学习。

\ 脂肪酸甲酯和脂肪酸甘油三酯标准品如何选择？/

国标《GB 5009.168-2016 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》按照定量方法分为三个方法，分别是内标法、外标法和归一化法。内标法需要使用37种脂肪酸甲酯混标作为定性外标，十一碳酸甘油三酯作为定量内标；外标法需要使用相应的脂肪酸甘油三酯作为定量外标；归一化法需要使用37种脂肪酸甲酯混标作为定性外标。

\ 37种脂肪酸甲酯混标如何使用，

内标法如何配置标准曲线？/

上图为国标GB 5009.168-2016 标准截图，可以看出，内标法需要配置5mg/mL十一碳酸甘油三酯的内标溶液；而混合脂肪酸甲酯标液不需要配置标准曲线，仅用于定性和脂肪酸甲酯响应因子的计算。

如果选购安谱实验的37种脂肪酸甲酯混合标液（CDAA-252795-MIX-1ml，不同浓度于异辛烷，总计10 mg/mL），建议取1.0mL 混合标液稀释至5mL或10mL，得到总计2mg/mL或1mg/mL的37种脂肪酸甲酯混合标准使用液。

内标法的计算公式见上图，可以看出，脂肪酸甲酯混标的作用主要是用来计算脂肪酸甲酯相对十一碳酸甲酯的响应因子，因此进样单点的标准溶液即可；样品中脂肪酸甲酯的含量计算主要取决于样品中添加的十一碳酸甲酯内标的含量和样品中各脂肪酸甲酯的峰面积及其响应因子。样品中脂肪酸的含量需要由脂肪酸甲酯的含量再乘以转换系数得到。

\ 使用CD-2560进样37种脂肪酸甲酯为什么只出了36个峰？/

不同品牌、不同规格的色谱柱，色谱柱污染、柱效下降的色谱柱都可能导致37种脂肪酸的分离有所变化，建议可通过调整流速等参数优化色谱条件，以达到最 优分离度。

建议先在 0.8mL/min 的流速条件下查看目标峰的分离情况，根据出峰情况，如果是 31 号和 32 号峰分离变差就增加流速，如果是 24 号峰、30 号峰和 35号峰分离变差就减小流速，通过流速的微调以找到最 优的分离条件。具体调整方法可查看安谱实验相关的单页“37种脂肪酸甲酯分离的小秘密，你知道吗？”。

\ 外标法检测有哪些需要注意？/

如标准截图所示，外标法使用脂肪酸甘油三酯作为标准品，但需要将脂肪酸甘油三酯标准溶液经过酯交换转变为脂肪酸甲酯上机检测，不可直接将脂肪酸甘油三酯直接上机检测，也不可使用脂肪酸甲酯作为外标进行定量计算。

上图为外标法计算公式，可以看出，外标法是直接计算样品中脂肪酸的含量，不需要计算脂肪酸甲酯的含量。通过脂肪酸甘油三酯的单点外标法进行计算，计算结果主要与脂肪酸甘油三酯标准溶液的浓度、脂肪酸甲酯的峰面积和脂肪酸甘油三酯转化为脂肪酸的系数有关。脂肪酸甘油三酯标准溶液浓度的选择可根据实际样品中脂肪酸的含量进行优化调整，使其尽量接近样品中含量。

矿井水处理设备控制运行常见问题有哪些？

ZY纯水系统 由一台超纯水面制水，可以同时供应不同水质的纯水，满足众多的终端用水点使用。ZY超纯水系统采用集中主机制造出超纯水，再通过专用超纯水管道以“蛇形循环”方式输送到各个使用点，使用者在使用点即可方便地从超纯水龙头直接取用超纯水，终端取水点可以多至几百个。“蛇形循环”输送方式可有效保证管道内水质不会产生“死水”现象，保证循环水质。

      ZY纯水系统不仅有效的解决了分散购买水处理设备的问题，并且方便了集中管理。优普公司在ZY纯水系统方面国内创新，首推医院集中制水、分质供水，即应用一套纯水系统，按照各科室的不同水质要求分别供应系统采用一套大型水处理设备向不同的用水终端分质供水的国际先进理念，积极响应了国家关于节能环保的倡导也解决了集中供水的难题。

       集菌仪和微生物限度仪不是一回事，两只有些相同点也有一些区别。具体小编详细的给大家讲解一下。

集菌仪和微生物限度仪共同点：

1、集菌仪和微生物限度检测仪主要都是用作微生物、细菌之类的吸附、检查

2、二者都是采用薄膜过滤法

集菌仪和微生物限度仪区别如下

1、集菌仪是做无菌检测的，微生物限度检测仪是做有菌检测。集菌仪上面放反复使用培养器的话是可以做纯化水微生物限度的。

2、集菌仪是集菌培养器的配套使用仪器，通过集菌仪的定向蠕动加压作用，供试品被过滤并在滤器内进行培养，以检验供试品是否含菌。集菌仪的作用是检验供试品是否含菌的仪器，配套集菌培养器使用。主要用于注射用无菌制剂的无菌检测，包括抗生素类及含有抑 菌的药品、大输液、水针剂、灭菌医疗器具、无菌注射用水等。

       微生物限度检测仪一般采用不锈钢金属材料制成，配有内置或外置隔膜液泵，将供试品注入微生物限度培养器内，通过检验仪自的隔膜液泵负压抽滤，将供试品中微生物截留在滤膜上，用取膜器取出滤膜，转移至配置好的固体培养基上，菌面朝上，平贴。盖上盖子形成封闭的培养盒，置于相应的恒温培养箱内培养并计数。

       都是薄膜过滤法，集菌仪做无菌结果要求无菌，微生物限度的话是可以有菌的，集菌仪上面放反复使用培养器的话是可以做纯化水微生物限度的。微生物限度检测仪是做微生物限度检测用的，就是一个密封的滤膜过滤装置，后取滤膜到平板培养基上进行培养，集菌仪也有密封滤膜过滤装置，过滤后可直接灌注培养基到滤膜背面，然后直接就可以培养了！

       微生物限度检测装置采用不锈钢金属材料制成，将供试品注入微生物限度培养器内，通过检验仪自真空泵负压抽滤，将供试品中微生物截留在滤膜上，用取膜器取出滤膜，转移至配置好的固体培养基上，菌面朝上，平贴.盖上盖子形成封闭的培养盒，置相应的恒温培养处内培养并计数。

        以上就是集菌仪和微生物限度仪的相同和区别，希望能帮助到您。很多药厂，食品厂都要用到这两个设备，主要用于微生物和细菌之类的检测，用于下一步检测具体细菌类的前期处理设备。

《GB 5009.257-2016 食品安全国家标准 食品中反式脂肪酸的测定》适用于动植物油脂、氢化植物油、精炼植物油脂及煎炸油和含动植物油脂、氢化植物油、精炼 植物油脂及煎炸油食品中反式脂肪酸的测定。

在开展食品反式脂肪酸的检测时，实验员经常会遇到各种小问题，小编今天整理了一些常见问题进行分享学习。

01

要检测哪些反式脂肪酸，标准品怎么选择？

标准要求检测食品中C16:1t~C22:1t等16种反式脂肪酸。具体目标物信息可参见标准附录A中的“表A.1 脂肪酸甲酯化学信息表”，详见下图。

针对标准要求的反式脂肪酸，安谱实验推荐的标准品选择方案见下表，分别是6种反式单不饱和脂肪酸甲酯、4种十八碳二烯酸甲酯、8种十八碳三烯酸甲酯。

02

反式脂肪酸标品的使用有些什么注意点？

上述推荐的3种反式脂肪酸标准品中十八碳二烯酸甲酯和十八碳三烯酸甲酯均为同分异构体混合物形式，均无准确浓度，这是反式脂肪酸的性质及其生产工艺导致，但这并不影响结果的计算，因为标准中反式脂肪酸的定量方法是面积归一化法，并不需要确定某一个反式脂肪酸的准确浓度，此标准品更重要的作用是目标物的定性。

4种十八碳二烯酸甲酯混标和8种十八碳三烯酸甲酯混标中的目标物信息见下表，可以看出2个混标中分别含有顺-9,12-十八碳二烯酸甲酯（亚油酸甲酯）和顺-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯（亚麻酸甲酯）这两种顺式脂肪酸甲酯。因此推荐的3种混标产品中总共含有18个目标物。

03

检测食品中反式脂肪酸

还需要检测其他常见脂肪酸吗？

检测食品中的反式脂肪酸需要同时检测其他顺式脂肪酸，上图为国标中反式脂肪酸的计算公式，反式脂肪酸的定量计算是使用归一化法，从公式可以看出需要计算样品中所有脂肪酸甲酯目标物的校准峰面积。通常我们建议可以和《GB 5009.168-2016 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》同时检测，因此检测食品中反式脂肪酸还需要采购37种脂肪酸甲酯混标（货号：CDAA-252795-MIX-1ml）进行检测。

需要注意的是“GB 5009.168-2016”和“GB 5009.257-2016”两个标准中脂肪酸的归一化法的计算公式是并不一样，在实际检测过程中需要分别参照标准要求的公式进行计算。下图为使用“GB 5009.257-2016”标准检测大豆油样品中反式脂肪酸的计算公式模板。

04

标准品中有一些脂肪酸甲酯的CAS号和标准不一样？

因不饱和脂肪酸甲酯存在顺反异构，以及顺反物质的混合物，因此可能设计多个CAS号，所以需要对标准品的CAS号信息特别注意。特别是“GB 5009.257-2016”中的CAS号信息情况，详见下表，而在“GB 5009.168-2016”中目标物的CAS号信息均正确无误，各位老师可以结合“GB 5009.168-2016”进行目标物CAS号信息的确认。

05

有一些反式脂肪酸和顺式脂肪酸分离度较差怎么优化？

在脂肪酸检测过程中常常遇到的一个问题是，顺式脂肪酸 C18:3 6c,9c,12c 和一些反式十八碳三烯酸为同分异构体，且在色谱柱上出峰时间完成重合，无法分离，这样就会导致如果样品中有出峰，则无法判定该目标物是反式和顺式的结构，影响结果判定。小编今天提供2种色谱条件的优化方向供各位老师参考。

色谱条件优化1（降低初始温度，降低升温速率）：

该色谱条件下的谱图见下图：

色谱条件优化2（降低初始温度，降低升温速率，使用梯度流速）：

该色谱条件下的谱图见下图：