制备型液相色谱柱测柱效
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我的是制备型液相色谱柱,平时的进样量为1mL,我看说明书上的测柱效方法进样量只有5微升,会不会太少了?另外我需要用分析性液相来测么?用制备型液相测可以么?说明书上的样品有尿嘧啶、甲苯、丙基苯、戊苯,实验室现在只有甲苯,我只用一种可以么?分析纯的... 我的是制备型液相色谱柱,平时的进样量为1mL,我看说明书上的测柱效方法进样量只有5微升,会不会太少了?另外我需要用分析性液相来测么?用制备型液相测可以么?说明书上的样品有尿嘧啶、甲苯、丙基苯、戊苯,实验室现在只有甲苯,我只用一种可以么?分析纯的可以么需要用色谱纯么? 展开
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- 倾国倾城的哥 2016-04-19 00:00:00
- 一:液相色谱进样量不可能1mL的,都有个定量环,定量环多大体积,就有多少体积进入系统,你注入再多,它也是先进到定量环,再由定量环进到系统。你平时注1mL不是真正的进样量,你的定量环体积才是真正的进样量。 二:分析纯没有色谱纯级别高,它里面的杂志和细微颗粒都高于色谱纯,而杂志和细微颗粒有可能会降低色谱柱寿命,你实在要用,也可用真空泵通过微孔过滤膜过滤一遍。问题也不大,不过色谱纯肯定对色谱柱伤害要更小一些。 三:测柱效对于只有一种分离原理或以一种分离原理为主的色谱柱,是可以只用一种物质的。当然,多种物质测柱效参考价值更多。
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- 制备型液相色谱柱测柱效
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液相色谱柱是由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管的材质有很多,比如聚合物、玻璃、不锈钢等。但是建议柱管用不锈钢材质,因为不锈钢这种金属耐高压、耐腐蚀且硬度高,相比于玻璃等材质不易摔坏。不过当压力不高于70Kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管。对于液相色谱柱柱管内壁要求有很高的光洁度,不锈钢柱内壁会经过多次抛光,这是为提高柱效,减小管壁效应。恒谱生0.1μm高光洁度色谱柱柱管能够快速分析的同时保持超高的柱效;使用寿命长,不仅能够减少频繁更换色谱柱带来的重新进行方法验证、条件摸索等工作,还大大的降低了使用成本;具备优良的选择性和分离能力。
除了抛光,也有在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料来提高内壁的光洁度,其效果与抛光是相同的。色谱柱两端的柱头内装有筛板,通常是不锈钢和peek材质制作的,根据需求选择与色谱柱匹配的柱筛板,孔径取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。
液相色谱柱的柱长及内径的选择原则是什么?长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。250—300mm是普遍的柱长,实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子,一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物;500—600mm,要求较高分辨率的应用,—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。
内径:柱效率与柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也增加,允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时,则因柱内每块理论板内不能建立真正的平衡,将会导致色谱峰畸变,柱分辨率降低,重现性不好。因此对于复杂样品需要准确分离,必须使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物,为了增加样品容量就必须使用内径大的柱子,目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。
分析大分子量化合物选择大孔径色谱柱;对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱,以改善峰形,延长色谱柱使用寿命等。恒谱生液相色谱柱内径有2.1、3.0、4.6、10mm可供选择,不锈钢材质不易因为磕碰损坏柱管。
以上就是一些关于液相色谱柱柱长及内径的选择原则,供大家参考。 深圳市恒谱生科学仪器有限公司是致力于研发制造高质量色谱耗材的高科技生产厂家,我们在UHPLC超高压在线过滤器、色谱保护柱、液相色谱柱、色谱填料、鬼峰捕集柱、无气泡高净化能力的溶剂滤头、0.1μ高光内表粗糙度柱管等领域具有多年的生产经验和较强大的制造能力。
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一、制备型液相色谱仪的主要用途
制备型液相色谱仪主要用于将混合物中的目标组分分离出来,以获得高纯度的化合物或制备一定量的物质。与分析型液相色谱仪不同的是,制备型液相色谱仪侧重于大规模分离和纯化,不仅要求获得高分离度,还需确保高产量和高纯度。
目标化合物的分离和纯化
在科研和生产中,化学家和技术人员经常需要从复杂的样品中分离出特定的化合物。制备型液相色谱仪能够精确地分离混合物中的成分,以得到高纯度的目标化合物。这种分离过程对于药物开发、天然产物研究和合成化学中的产物纯化尤为重要。
药物成分的分离 制药行业对高纯度成分的需求较大,制备型液相色谱仪在药物的成分分离和制备过程中起到核心作用。例如,在药物研发过程中,科学家可以利用制备型液相色谱仪分离和纯化活性成分,确保药物的纯度和效果。这种技术还用于去除药物中的杂质,以提升产品的安全性和。
生物大分子的纯化
在生物技术和分子生物学研究中,制备型液相色谱仪常用于蛋白质、核酸、多肽等生物大分子的纯化。这些分子通常来源于复杂的生物体系,分离纯化过程需要高精度的设备和技术。
二、制备型液相色谱仪在各个领域的应用
制备型液相色谱仪的高效分离技术在多个行业中发挥着至关重要的作用。以下是该仪器在不同领域的具体应用实例:
化学和材料科学
在化学研究中,制备型液相色谱仪能够帮助科学家从反应产物中分离并纯化出所需的目标化合物。例如,在合成材料的过程中,研究人员常需要获得高纯度的单一组分。
食品和环境检测
在食品安全和环境检测中,制备型液相色谱仪主要用于分析和去除食品和环境中的微量污染物。这种应用对于食品添加剂、农药残留以及污染物的检测和去除非常重要。制备型液相色谱仪能够从复杂的样品基质中分离出微量污染物,以确保食品和环境的安全。
天然产物的分离与分析
天然产物如植物提取物、精油等常含有多种活性成分,制备型液相色谱仪在其中的作用尤为关键。
三、如何提高制备型液相色谱仪的使用效果
为了在实际操作中大化制备型液相色谱仪的效能,以下几个方面需特别注意:
合理选择色谱柱
色谱柱的选择对分离效果有直接影响。根据样品性质和分离目标,选择合适的填料类型和柱尺寸,以获得更高的分离度和更快的分离速度。
控制仪器参数
制备型液相色谱仪的操作参数(如温度、压力等)会对分离效果产生重要影响。科学地设置和控制这些参数,能够确保分离过程的稳定性和重复性,从而提高操作效率和样品产量。
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