简述721分光光度计的使用方法

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  c1208好 2018-03-11 12:11:35

  【实验操作】 1.检查721A型分光光度计的旋钮和开关，使其回复零点。 2.按要求接通电源，按下“T键”，打开暗盒盖和电源开关，指示灯亮。预热20分钟。 3.调节波长旋钮至所需波长。 4.取比色皿分别盛装B、S、U液，置入检测室（比色皿先用蒸馏水洗后，再用比色液润洗才能装比色液）。B液对准光路。 5.调节面板“零位细调”，使指示为00.0，即透射比“T”的零点，同时“一”号闪跃。 6.合下检测室盖.调节“光量粗、细调”电位器，使指示为100.0，须反复5、6两点操作达到稳定。 7.按下“A”键，指示为“.000”同时“一”闪跃，如果指示读数不是比值时，应调节“消光调零“电位器，使其达到要求。 8.拉出或推入拉杆，使U、S液分别置于光路读取A值，然后移动拉杆，读B管A值，如为0，则前述A值有效。 9.在稳定时，重复读数一次，并按下“T”键。 10.打开检测室盖，取出比色皿，倾去比色液于水槽中，用自来水冲洗干净，倒置于表面皿（铺有滤纸）中。 11.关上电源开关，拔出电源插头，取出比色皿架，检查检测室内是否有液体溅出，并擦净。检测室内放入硅胶袋，合上盖，套上仪器罩。 【计算】 1.利用标准管计算测定物含量 实际测定过程中，用一已知浓度的测定物按测定管同样处理显色，读取吸光度，再根据（6）式计算，即 A1= K1C1l1 A2= K2C2l2 式中A1、A2分别为已知浓度标准和未知浓度测定吸光度。 c1、c2分别为已知浓度标准管和未知浓度测定管中测定物浓度。 因盛标准液和测定液的比色杯径长相同（l1=l2），故上二式可写成： A1/K1C1= A2/K2C2……………………………………………(7) 因标准液和测定液中溶质为同一物，K值相同，即： （7）式可换算成下式： C2=（A2/A1）× C1 …………………………………………(8) 因测定液和标准液在处理过程中体积相同，故（8）式可写成： m2 =（A2/A??1）×??m1…………………………………………(9) 式中m1、m2分别表示标准液和测定液中待测物的含量。 （9）式为实验操作中常用计算式。 【注意事项】 1.仪器须安放在稳固的工作台上，不能随意搬动。严防震动，潮湿和强光直射。 2.盛装比色液时，约达比色皿2/3体积，不宜过多或过少。若不慎使溶液流至比色皿外面须用棉花或拭镜纸擦干，才能放入比色架。拉比色杆时要轻，以防溶液溅出，腐蚀机械。 3.千万不可用手或滤纸等物摩擦比色皿的透光面。 4.比色皿用后应立即用自来水冲洗干净，若不能洗净，用5%中性皂溶液或洗衣粉溶液浸泡，也可用新鲜配制的重铬酸钾洗液短时间浸泡，然后用水冲洗干净，倒置晾干。 5.每套分光光度计上的比色皿和比色皿架不得随意更换。 6.试管或试剂不得放置于仪器上，以防试剂溅出腐蚀机壳。 7.如果试剂溅在仪器上，应立即用棉花或纱布擦干。 8.测定溶液浓度的光密度值宜在0.1—0.7之间Z符合光吸收定律，线性好，读数误差较小。如光密度超过0.1—1.0范围，可调节比色液浓度，适当稀释或加浓，再进行比色。 9.合上检测室盖连续工作的时间不宜过长，以防光电管疲乏。每次读完比色架内的一组读数后，立即打开检测室盖。 10.仪器连续使用不应超过2小时，必要时间歇半小时再用。 11.测定未知液时，先作该溶液的吸收光谱曲线，再选择Z大吸收峰的波长作为测定波长。 12.721分光光度计的放大器暗盒及单色器箱处放有两个硅胶筒，检测室内放硅胶袋，应经常检查，发现硅胶变色，应更换新硅胶或烘干再用。 13.仪器较长时间不使用，应定期通电、预热。 14.仪器用完之后，须拔去电源，套上仪器罩。

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