抽提DNA去除蛋白质时，怎样使用酚与氯仿较好？

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  湖南金鼎赛斯电子仪器科技有限公司 2019-08-14 15:07:11

  <p><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);Microsoft YaHei&quot;, SimSun, arial, sans-serif; text-indent: 32px;" data-x-flag="15_6">水是极性分子，酞与氯仿是非极性分子，当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时，酚或氯仿就会挤去蛋白质分子之间的水分子，使蛋白失去水合状态而变性。变性蛋白质的密度经过离心以后大于水的密度，所以和水相分离，在水相下面沉淀，从而和在水相中溶解的DNA分开。而而酚与氯仿有机溶剂有着更大的比重，在Z下层保留。作为表面变性的酚与氯仿，对于蛋白质的去除，各有利弊，酚的变性作用更大，然而酚与水相有一定程度的互溶，在酚相中大约溶解0%~15%的水，所以使得这部分水相中的DNA损失了，然而氯仿没有如酚一般好的变性作用，然而氯仿与水不相混溶，，不会将DNA带走。因此在抽提过程中，想要达到Z好的效果，应当混合使用酚与氯。经酚diyi次抽提后有酚残留在水相中，因为酚与氯仿是互溶的，能够使用氯仿对蛋白质进行第二次变性，在这个时候，能够带走酚。也能够在第二次抽提时将酚与氯仿以1：1的比例混合使用。</span></p>

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