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蛋白质分子印迹选用什么洗脱液好

琳琳iloveu 2017-06-14 21:31:26 350  浏览
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参与评论

全部评论(1条)

  • sijie199396 2017-06-15 00:00:00
    分子印迹技术是制备具有分子识别能力聚合物的技术 ,因具有构效预定性、特异识别性和广泛实用性三大特性 ,而在分离纯化、生物化学、生物学以及医学等诸多领域具有广阔的应用前景。综述了蛋白质分子印迹技术的起源和发展、印迹聚合物的制备、印迹效果评价及在各个领域的应用 ,并对其应用前景进行了展望。

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苯并(a)芘检测又一利器:分子印迹小柱

       苯并(a)芘又称苯并芘,英文缩写BaP,是碳水化合物、蛋白质和脂肪在不完全燃烧时产生的高活性间接性致癌物质,广泛存在于烟熏、油炸、烧烤、烘焙等食品中。《GB 2762-2017 食品中污染物限量》明确规定,食品中苯并(a)芘限量指标:谷物及其制品不超过5 ppb,肉及肉制品不超过5 ppb,水产动物及其制品不超过5 ppb,油脂及其制品不超过10 ppb。

      《GB 5009.27-2016 食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定》规定:试样经过有机溶剂提取,中性氧化铝或分子印迹小柱净化,浓缩至干,乙腈溶解,反相液相色谱分离,荧光检测器检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。


方法优势

中性氧化铝柱:ProElut BaP

       迪马科技曾发布过植物油、肉制品、水产品、粮谷等基质中苯并芘检测方案,样品净化使用《GB 5009.27-2016》标准中中性氧化铝柱—ProElut BaP,使用者无需中性氧化铝活度调节,可完全重现标准,具有良好的重现性和回收率结果,用户使用后均反映效果良好。

分子印迹小柱:ProElut BAP-MIP

       在此基础上,迪马科技又开发出《GB 5009.27-2016》标准中另一净化技术分子印迹小柱—ProElut BAP-MIP,并应用于食用油中苯并(a)芘的测定,该方法具有以下优势:

       1)  对苯并芘专一性的吸附保留,优异的回收率及重现性结果;

       2)  能有效去除油脂干扰,除油效果良好;

       3)  分子印迹小柱规格小,溶剂消耗量少;

       4)  方法操作简单,净化速度快,时间短。


       以下为详细解决方案,敬请参考!


食用油中苯并(a)芘的测定


1 适用范围

本方法适用于食用油中苯并(a)芘的检测。


2 标准品配制

标准储备液:准确吸取一定量的500 μg/mL标准储备液(甲苯配),用乙腈配制成100 μg/L的标准储备液。


3 提取

取0.4 g样品于玻璃离心管中,加入5 mL正己烷,涡旋混匀,待净化。


4 净化

SPE柱: ProElut BAP-MIP 500 mg/6 mL(Cat#: 65939)

(1)活化:依次加入5 mL二氯甲烷、5 mL正己烷,弃去流出液;

(2)上样:将待净化液加入柱中,弃去流出液;

(3)淋洗:加入6 mL正己烷,弃去流出液;

(4)洗脱:加入6 mL二氯甲烷,收集流出液;

(5)重新溶解:将流出液在40 ℃水浴下缓慢通入氮气吹干,加0.4 mL乙腈,混匀,4000 rpm离心1 min,取上清,供HPLC分析。


5 HPLC条件

色谱柱:

Diamonsil C18(2),250 × 4.6 mm,5 μm ( Cat#:99603)

流速:1.0 mL/min   进样量:20 μL   柱温:35 ℃

流动相: 乙腈:水 = 97:3

检测器:荧光  Ex:384 nm      Em:406 nm


6 添加回收结果及色谱图

食用油中苯并(a)芘检测的添加回收结果(%):


苯并(a)芘标准品(0.5 μg/L)检测的液相色谱图

苯并(a)芘标准品(5 μg/L)检测的液相色谱图

苯并(a)芘标准品(10 μg/L)检测的液相色谱图

添加水平为0.5 μg/kg的橄榄油中苯并(a)芘检测的液相色谱图

添加水平为5 μg/kg的橄榄油中苯并(a)芘检测的液相色谱图

添加水平为10 μg/kg的橄榄油中苯并(a)芘检测的液相色谱图

添加水平为0.5 μg/kg的大豆油中苯并(a)芘检测的液相色谱图

添加水平为5 μg/kg的大豆油中苯并(a)芘检测的液相色谱图

添加水平为10 μg/kg的大豆油中苯并(a)芘检测的液相色谱图

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