实验室仪器使用宝典 | 沃特世UPLC

沃特世超GX液相色谱仪ACQUITY UPLC，拥有高度稳定，重现性好的色谱系统，已经成功在各大实验室的各种分析领域中被广泛应用。包括食品安全、生物分析、临床、代谢物鉴定、代谢组学、方法开发等。检测家搜集了去年一年采访过的实验室，他们在平时液相分析工作中遇到的各种各样的问题，此次视频为大家总结了UPLC操作规程和基线噪音问题排除方法。

▌UPLC操作规程

实验室仪器的使用方法和注意事项，是保障仪器正常工作的前提，很多说明看似简单，却也不可忽视。不然仪器“罢工”会严重影响实验进度。知道很多小伙伴没耐心去看说明。所以，小助理帮助大家整理了一篇UPLC操作规程！

操作视频请移步检测家公众号（ID：e-superlab）

▌UPLC基线噪音排除

实验室经常会传来这样的声音“咦，基线噪声怎么这么大？维修工程师赶不过来，我这实验数据得马上出，该怎么办？” 今天小助理从实际应用角度出发，告诉大家如何减小和消除噪音。

操作视频请移步检测家公众号（ID：e-superlab）

基线噪音大

• 卸下色谱柱 – 冲洗系统，直至基线稳定；

• 渗漏 – 此时应修复渗漏，重新连接或更换接头；

• 流动相中有气体 – 溶剂脱气；

• 流动池中有气泡 – 在检测器出口处使用0.009的管路；

• 检测器使用记录 – 例如紫外灯，查看是否需要更换灯，是否能量低，光路系统是否正常；

• 灵敏度太高 – 使用合适的采样频率；一味追求高采样频率，可能对灵敏度没有任何帮助，同时也会产生比较大的噪音：UV检测器推荐降低采样频率，HPLC推荐1-5HZ，UPLC推荐20HZ。

• 保持良好的操作习惯 – 一如UPLC仪器水相流动相每天更换，添加了缓冲盐的流动相过0.2 μm溶剂过滤膜等，都会减小基线噪音的产生。

ACQUITY UPLC系统分析过程中，在保证分析结果质量的同时，实现了从每个样品中节省大量的时间与金钱。实验室拥有UPLC，检测员拥有在线解答的小助理，可谓人生赢家！

END

近日，沃特世公司宣布推出RapiZyme胰蛋白酶，这种经过化学优化的重组胰蛋白酶不仅堪称性能标杆，还能将冗长的酶解时间从3个多小时缩短为仅30分钟。

图.RapiZyme胰蛋白酶有助于改善生物制药肽图分析或自下而上蛋白质组学研究中的蛋白质酶解效果。

RapiZyme胰蛋白酶具有业内出色的抗自切性，因此可以在更高的酶:蛋白质1:5比例下使用，不依赖高温条件就能在30分钟内快速完成酶解，而且酶解性能丝毫不受影响。这降低了因热诱导产生干扰峰的风险（例如人工脱酰胺或氧化），而不会影响酶解性能、重现性或序列覆盖率。 

RapiZyme胰蛋白酶采用特殊冻干工艺，冻干时添加了LC-MS兼容的添加剂，其目的是在提高酶稳定性和样品回收率的同时保持复溶后的高活性。  

酶解时间长和性能不理想是蛋白质酶解的两大难题。包含各种非目标峰的复杂肽图会降低工作效率并影响数据分析，进而减慢肽图分析，对结构表征、蛋白质鉴定以及整个生物制药行业的其他许多重要应用产生不良影响。

在开发生物制药分析方法时，肽图中的所有峰（即使是很小的峰）都必须在监管文件中明确标识。化学、制造和控制(CMC)领域的分析科学家们希望酶能生成无噪音的完 美基线。RapiZyme胰蛋白酶就能做到这一点，它让科学家们无需耗费时间去鉴别和分析非目标峰。 

 沃特世公司宣布对旗下产品Waters LC/GC认证样品瓶实施全新的测试方案，同时为Waters TruView pH控制LC/MS认证样品瓶系列添加新的测试项目。

Waters LC/GC认证样品瓶的全新UPLC-UV认证测试在195 nm下进行，灵敏度非常高，合格标准为污染水平低于100 ppb，该测试旨在确保瓶盖和隔垫也和样品瓶一样洁净无污染。通过该测试的样品瓶足以确保在典型LC-UV条件下运行时避免出现污染物峰。

新推出的 Waters TruView pH控制LC/MS认证样品瓶具有改性玻璃表面，可阻止游离钠离子浸出到溶液中。这能避免pH值偏离中性，从而减少不良化学反应和由此产生的鬼峰。这款样品瓶还能减少因吸附极性碱性物质而导致的分析物损失。

尽管实验室在努力消除产生错误结果的风险，但在接受沃特世调研的客户中，仍有超过50%的客户表示他们偶尔甚至经常遇到污染或鬼峰问题。沃特世样品瓶产品系列的这些新成员有助于消除样品瓶导致的不合格结果。

拜耳公司供应中心（德国贝格卡门）质量控制主管Hartmut Kagerer博士说：

样品瓶中的pH值变化导致分析物降解，还有色谱图中出现鬼峰，这些一直都是我们在工作流程中遇到的挑战。随机出现的未知峰会减缓研究工作进度，还会威胁结果质量。我们一直在寻找能避免pH值偏离中性的样品瓶。使用表面性能受控且重现性出色的样品瓶一方面能提高数据质量，另一方面减少了结果解析的不确定性，可谓变革之举。