HPLC谱图常见故障及解决方法！关于色谱图你需要避开这些坑！

液相色谱中的许多问题都能在谱图上反映出来，其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。

一.拖尾峰

1.  筛板阻塞，柱子两头的过滤筛板如果堵塞，样品就会在筛板部分受阻而形成时间延迟，使得样品在柱后流出时峰型形成拖尾。需要通过反冲色谱柱，或者更换筛板。

2.  色谱柱塌陷，是指色谱柱由于其它原因引起了柱效率丧失，不能对物质形成保留，使得物质不在固定相上保留而随流动相流出，但是又还有一点柱效，因此形成拖尾。需要重新填充色谱柱或者更换色谱柱。

3.  有污染，即样品不在同一起跑线起跑，从后面开始跑得到达终点稍晚，表现出拖尾。更换色谱柱或者采用有机溶剂梯度洗脱1h以上，以冲洗柱子。

4.  流动相PH值选择错误，如某PH下有的样品存在分子型和离子型的动态平衡，离子型的陆续向分子型转化就会表现出拖尾。调节PH值可YZ分子解离，改善拖尾，对于碱性化合物，相对较低的PH值更有利于得到对称峰。

二.前沿峰

1.  样品过载，被保留的样品在正常出峰时间前陆续出来，形成前沿峰。降低样品含量。

2.  样品溶剂选择不恰当，当样品溶剂的洗脱能力大大强于流动相时会出现前沿峰，例如，在反相色谱中用已腈做样品溶剂，而流动相的洗脱力较弱时会出现前沿峰。选择流动相或者接近流动相的比例作为样品溶剂。

3.  色谱柱损坏，色谱柱柱效损失，不能对物质形成保留。更换色谱柱。

4.  在大峰前有小峰出现,假象前沿峰，即大峰前包埋了没有分开的小峰。调整流动相洗脱梯度。

三.基线漂移

1.  柱温波动，即使是很小的温度变化都会引起基线的波动，通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。使用柱温箱，控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器。

2.  流动相不均匀，流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。使用HPLC级的溶剂，流动相在使用前进行脱气处理。

3.  流通池被污染或有气体。用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用盐酸）。

4.  流动相配比不当或流速变化。更改配比或流速，为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。

5.  样品中有强保留的物质，以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。

四.出现宽峰

1.  色谱柱污染或失效，造成塔板数降低。更换同样类型的色谱柱，如果新柱子可以提供对称的色谱峰，则用强溶剂冲洗旧柱子。

2.  柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大。更换内径较小的短管路。

3.  检测器对反应时间或池体积响应过大。减少响应时间或使用更小的流通池。

五.基线噪音

1.  在流动相、检测器或泵中有空气（尖锐峰）。流动相脱气，冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。

2. 漏液。检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。

3. 流动相混合不完全。用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂。

4. 温度影响（柱温过高，检测器未加热）。使用柱温箱，减少温度差异或加上热交换器。

5. 在同一条线上有其他电子设备（偶然噪声）。断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。 采用精密级稳压电源。

六.分离度不够

1.流动相梯度洗脱设置不合理。优化梯度洗脱程序。

2.流动相污染或变质（引起保留时间变化）。重新配置流动相。

3. 保护柱或分析柱阻塞。去掉保护柱进行分析，如果必要则更换保护柱；如果分析柱阻塞，可进行反冲；如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏，建议使用恰当的再生程序；如果问题仍然存在，进口可能阻塞了，更换入口处的筛板或更换色谱柱。

氮气发生器是集氮、氢、空发生器为一体的仪器，它是在高纯氮发生器、高纯氢发生器和低噪音空气泵的基础上，融合现代，为适应市场的需要而开发、设计并向市场推出的一代产品。氮气发生器以崭新的结构设计，简单的工作程序，竭诚为操作者提供更加便捷、可靠的工作条件。采用的开关电源，提高了电解效率。操作简便，只需启动电源开关，仪器即可产气，输出压力稳定，氮、氢、系统设有流量显示，更醒目直观。不消耗电解质，电解质只起离子转换作用并不消耗，所以只需补充蒸发和电解损失的少量蒸馏水。设有多级保护装置，是、可靠、方便的结合。即可间断使用，又可连续使用且产气稳定、不易衰减。可取代高压钢瓶，使化验室仪器化。

氮气发生器可以根据用户使用气量的大小来进行自动控制排水；采用了航空材料作为二次减震装置，大大降低了仪器的噪音问题。氢气电解分离池采用了进口不锈钢316L材质，氢电解分离池电解面积大为325cm2，采用了贵金属作为电解材料及特殊材料作为分离膜加大了电解速率提高了气体纯度。

再好的设备也会有故障的时候，下面就来说说氮气发生器的常见故障及解决方法：

1、当氢气部份压力达不到设定值时，先观察流量表，如流量显示较平时偏大，基本可断定整个体系有漏气点。

处理方式：关闭电源，卸下气路，将氢气出口用密封螺帽封紧，开启电源，看压力能否达到设定值，并看流量显示能否达到“000”，如果流量显示能回零，说明仪器本身不存在漏气，请检查气体输出口以后的管路，及用气设备是否漏气。如流量显示不能回零，则仪器存在漏气点，请用皂液检查干燥管是否存在漏气现象。

2、当空气部份压力达不到设定值时，频繁启动时，可能存在漏气。

处理方式：关闭电源，卸下气路，将出口用密封螺帽封紧，开启电源，当压力上升，空压机停止工作后观察空压机是否会在30分钟内再次启动，如果空压机未在短时间内启动，说明仪器本身不存在漏气，请检查气体输出口以后的管路，及用气设备是否漏气。

氮气发生器的轴承损坏原因有很多，如灰尘侵入、安装不当或湿气侵入等，这是轴承早期损坏的常见原因。以下是对一些大型轴承常见损坏原因的分析及相应的解决方法，以延长轴承的使用寿命。

1、偏心率：偏心率、倾斜度或过大载荷可能导致几何应力集中或表面剥落。解决方法：轴承座和挡肩的精密加工。

2、润滑不足：润滑不足或不当可能导致部件磨损或轴承严重变形。解决方法：改善润滑系统，定期适当补充或更换润滑剂。

4、电流：当轴承旋转时，带电可能导致沟槽或刻痕。当轴承静止时，电气操作的不正确接地将导致轻微的防烧伤措施：在焊接除轴承以外的零件之前，减少或防止电流通过合适的聚酯连接件流过轴承。

3、操作不当：安装、操作或拆卸不当可能导致保持架变形或缺陷。解决方法：使用适当的操作、安装和拆卸工具。

5、生锈和腐蚀：与水接触可能导致轴承部件的腐蚀和生锈。轴承的腐蚀损坏可能导致运行中的防剥落措施：定期检查密封，确保良好的密封效果，正确存放轴承。

6、外部材料：磨粒污染和碎屑侵入可能导致轴承工作表面磨损、擦伤和凹陷。解决方法：清除侵入的颗粒和碎屑，更换润滑剂，并检查密封系统。