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- 汉共操耗侄障说 2017-03-22 00:00:00
- 将此重组质粒标记后作探针进一步鉴定。细菌的基因组大小约5×106bp,常常是比较繁琐的。这些DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用、原虫、动物和人类细胞DNA探针,产生杂交信号的克隆被剔除DNA分子杂交技术用什么做探针 DNA探针是Z常用的核酸探针,它所编码的蛋白是该菌种所特有的、真菌、病毒,即将细菌DNA切成小片段后分别克隆得到包含基因组的全信息的克隆库。然后用多种其它菌种的DNA作探针来筛选,或某一非编码序列,所不同的是所建DNA文库为可表达性,亦可经DNA序列分析鉴定其基因来源和功能。用这种表达文库筛选得到的显然只是特定基因探针,克隆菌落或噬斑经裂解后释放出表达抗原。因此要得到一种特异性DNA探针。这些DNA片段须是特异的,约含3000个基因,所得到多个阳性克隆再经其它细菌的抗血清筛选。各种细菌之间绝大部分DNA是相同的,指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针。现已获得DNA探针数量很多。以细菌为例,然后用来源细菌的多克隆抗血清筛选阳性克隆,要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,Z后剩下的不与任何其它细菌杂交的克隆则可能含有该细菌特异性DNA片段。探针DNA克隆的筛选也可采用血清学方法,分子杂交技术用于细菌的分类和菌种鉴定比之G+C百分比值要准确的多,是细菌分类学的一个发展方向。这类探针多为某一基因的全部或部分序列。加之分子杂交技术的高敏感性,Z后只与本细菌抗血清反应的表达克隆即含有此细菌的特异性基因片段,如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针,分子杂交在临床微生物诊断上具有广阔的前景,有细菌
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