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考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白质含量的优缺点?

夏龙天长地久 2008-10-24 01:02:21 689  浏览
  • 急需答案!先谢过了啊! 环境生物学方面的实验!

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全部评论(3条)

  • xuan5036126 2008-10-25 00:00:00
    是的

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  • ningboyang1215 2008-10-25 00:00:00
    优点:染色简单迅速,干扰物质少,灵敏度高。 缺点: 一般风光光度法都有较大的机器误差(重复性较差),为了数据准确需要每次进行标准曲线的测定。 生物测定常用试剂:sds和Triton对该方法有干扰,限制了该法的使用。

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  • 樱风旋律 2017-09-02 22:46:18
    Bradford法的突出优点是: (1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其Z低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。 (2)测定快速、简便,只需加一种试剂。完成一个样品的测定,只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程,大约只要2分钟即可完成,其颜色可以在1小时内保持稳定,且在5分钟至20分钟之间,颜色的稳定性Z好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。 (3)干扰物质少。如干扰Lowry法的K 、Na 、Mg2 离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。 此法的缺点是: (1)由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此Bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,在制作 标准曲线时通常选用 g—球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差。 (2)仍有一些物质干扰此法的测定,主要的干扰物质有:去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH。(如同0.1N的酸干扰Lowary法一样)。 (3)标准曲线也有轻微的非线性,因而不能用Beer定律进行计算,而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。

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凯氏定氮法测定豆乳中的蛋白质含量

1 前言

豆乳是黄豆加水、磨成汁后再煮熟的饮料。豆乳饮料营养非常丰富,且易于消化吸收,它是数百种天然植物中Z受营养学家推荐的食物。本文参照《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》标准,对某品牌浓香豆乳进行蛋白质含量的测定。

2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪,SH420F 石墨消解仪,分析天平。

2.2 试剂

硫酸(分析纯),催化剂片(分析纯无水硫酸钾 3g 和分析纯无水硫酸铜 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠。

3 实验方法

3.1 取样

称取样品 3.0g(精确值 0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化剂 3gK2SO4、0.2gCuSO4,加入 10mL 浓硫酸。

3.3 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数如表 1:

表 1 消解参数设置

             阶段            温度/℃          保持/min              备注
               1             200               20 不加排废罩,挥发水分
               2             230               20
               3             350               20
               4             420               90

3.4测试

将消化管放置于凯氏定氮仪上,定氮仪参数设置如表 2:

表 2 定氮仪参数设置

      硼酸    稀释水      碱液    蒸馏量  蛋白系数   蒸汽流量   滴定酸
     25mL     30mL     40mL      5min      6.25     0.1169mol/L

4 测试结果

4.1 实验结果

       名称   样品重量 g     氮含量%蛋白质含量%     平均值%       RSD%



       豆乳

      3.1171     0.4887     3.0541



      3.0592



        0.13

      3.0504     0.4901     3.0632
      3.1046     0.4899     3.0617
      3.1745     0.4892     3.0578

4.2 结论

通过实验数据可以看出,测定该豆乳样品的粗蛋白平均值为 3.0592%。

豆乳样品包装袋上营养成分表中蛋白质标示值为 3.0g/100g,样品测定的蛋白质平均值符合《GB 28050-2011 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则》要求的食品中蛋白质的允许误差范围≧80%标示值。

参考文献

[1] GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[S]. [2] GB 28050-2011 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则[S].


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凯氏定氮法测定干海苔中的蛋白质含量

1 前言

干海苔是经过一次加工后而成的海苔,它是一种高蛋白低脂肪的食物,五张海苔片的蛋白质含量约等于一个鸡蛋,并且富含维生素及钾、钙、镁、磷等微量元素。海苔中所含藻胆蛋白具有降血糖的好处。本文参照《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》标准,对某品牌海苔进行蛋白质含量的测定。


2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪,SH420F 石墨消解仪,分析天平、超高速粉碎机。


2.2 试剂

硫酸(分析纯),催化剂片(分析纯无水硫酸钾 3g 和分析纯无水硫酸铜 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠。


3 实验方法

3.1 样品制备

将干海苔片粉碎,过筛,105℃烘干 2 小时,放入干燥器中备用。


3.2 取样

称取样品 0.5g(精确值 0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化剂 3gK2SO4、0.2gCuSO4,加入 10mL 浓硫酸。


3.3 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数如表 1:

表 1 消解参数设置


3.4 测试

将消化管放置于凯氏定氮仪上,定氮仪参数设置如表 2:

表 2 定氮仪参数设置


4 测试结果

4.1 实验结果


4.2 结论

通过实验数据可以看出,测定海苔样品的粗蛋白平均值为 33.0852%。

海苔包装袋上营养成分表中蛋白质标示值为 35.3g/100g,通过实验数据可以看出,该样品测定的粗蛋白平均值均符合《GB 28050-2011 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则》要求的食品中蛋白质的允许误差范围≧80%标示值。


参考文献

[1] GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[S]. 

[2] GB 28050-2011 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则[S].

2020-10-26 15:42:18 394 0
凯氏定氮法测定谷物粉中的蛋白质含量

1 前言

随着人们生活水平的提高,对健康的关注度也越来越高。谷物粉作为一种健康时尚,成了很多人都关心的话题。谷物粉是各种粮食、杂粮、豆类及药食两用类原料经研磨后再精制而成的一种粉剂类产品,其中包含如枸杞、茯苓、金银花、决明子、火麻仁、莱菔籽、山核桃仁、薏米、沙棘等 100 多种药食同源的食材,既保证了均衡营养的释放,又保证了膳食纤维的含量,也同时提高了身体得吸收既完整又有吸收能力。本文参照《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》测定谷物粉中的蛋白质含量。


2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪,SH420F 石墨消解仪,分析天平。


2.2 试剂

硫酸(分析纯),催化剂片(分析纯无水硫酸钾 3g 和分析纯无水硫酸铜 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠。


3 实验方法

3.1 取样

精确称取混匀样品 0.5g 左右(精确值 0.1mg),用称量纸包好放入消化管内,然后分别加入 3g 硫酸钾与 0.2g 硫酸铜,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数如表 1:

表 1 消解参数设置


3.3 测试

将消化管放置于凯氏定氮仪上,定氮仪参数设置如表 2:

表 2 定氮仪参数设置


4 测试结果

4.1 实验结果

4.2 结论

通过实验数据可以看出,测定谷物粉中蛋白质含量的平均值为 18.17%。

以上数据显示,使用 K1160 全自动凯氏定氮仪测定谷物粉中蛋白质含量,所得结果误差符合《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》标准要求的两个测定值的JD差值不得超过算术平均值的 10%。


参考文献

[1] GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[S].

2020-12-08 15:02:16 532 0
凯氏定氮法测定米饼中的蛋白质含量

1 前言

米饼是一种以大米为原料,主料是籼米或粳米,添加芝麻、粟和盐等配料,经浸泡、制粉、压坯成型、烘干、焙烤、调味等单元操作而加工成的糕点。它具有低脂肪、易消化、口感松脆等特点,米饼不使用黏接剂使米粒相连,是低热值的膨化制品。若用糙米,营养素含量多且高,又能满足人们对低热量和高膳食纤维的要求。本文参照《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》测定米饼中的蛋白质含量。


2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪,SH420F 石墨消解仪,分析天平,超高速粉碎机。


2.2 试剂

硫酸(分析纯),催化剂片(分析纯无水硫酸钾 3g 和分析纯无水硫酸铜 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠。


3 实验方法

3.1 取样

将样品粉碎,精确称取样品 0.5g 左右(精确值 0.1mg),用称量纸包好放入消化管内,然后分别加入 3g 硫酸钾与 0.2g 硫酸铜,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数如表 1:

表 1 消解参数设置


3.3 测试

将消化管放置于凯氏定氮仪上,定氮仪参数设置如表 2:

表 2 定氮仪参数设置


4 测试结果

4.1 实验结果


4.2 结论

通过实验数据可以看出,测定米饼中蛋白质含量的平均值为 6.61%。

以上数据显示,使用 K1160 全自动凯氏定氮仪测定米饼中蛋白质含量,所得结果误差符合《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》标准要求的两个测定值的JD差值不得超过算术平均值的 10%。


参考文献

[1] GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[S].

2020-12-21 13:24:17 503 0

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