Spinsights离心洞察第四期-衡量离心效率的关键指标—K因子

需要扩大样品体积或升高转速以提高效率时，离心参数转换时有发生。繁琐的计算复杂且耗时，贝克曼库尔特为您提供方便实用的软件工具及在线解决方案，实现离心参数无缝转换。

简化方案转换

RPM与RCF间的相互转换

根据来源不同，离心方案的描述单位可能是RPM（每分钟转数）或RCF（相对离心力）—— RCF又称g-force（xg），一般用来表示最 大半径（rmax）处的离心力。RCF和RPM可通过转头半径进行换算，如需将方案转换至新的离心管/瓶或转头，还需了解现有离心机及新离心机的更多信息。

衡量离心效率的指标—— k 因子

从一个转头（离心管）转换到另一个转头（离心管），rmin 和 rmax均会改变，而且最 大相对离心力不能体现效率。因为K因子综合了沉降路径与相对离心力，所以可以表示沉降效率。同时K因子也能用以计算运行时间，在使用不同转头、离心管（瓶）、适配器及加样体积的情况下，都能使方案转换变得简单轻松。

离心专家”替代转头运行“小程序 

适当转换离心方案不仅需要匹配 RPM 或 RCF 值，追踪转头及离心管尺寸规格也是一个繁琐的过程。Optima XPN超速离心机配备eXpert离心专家软件，其中的模拟功能可高效进行方案转换。此外，在线转头计算器同样可以实现方案转换。

小贝学习中心”离心参数计算器“

小结

在新的离心机上使用现有离心方案，必然涉及繁琐的手工计算。贝克曼库尔特为您提供便捷、快速的转换工具。

AAV （腺相关病毒）正迅速成为基因治 疗的首 选方法。对这些关键疗法的准确表征，在确保生产质量及患者安全方面事关重大。对实心颗粒、空心颗粒及不完全组装颗粒比例的审查尤为严格。AUC 作为空壳率检测的金标准，能提供远高于其他技术的检测精度。

利用 AUC 进行AAV分析

高分辨率 AAV 分析需求

众所周知，AAV 颗粒的遗传负荷具有可变性，只有含完整基因插入序列的颗粒才能获得预期功能。因此，对 AAV 进行纯化，只分离出实心颗粒至关重要。此外，对功能性（实心）及非功能性（空心/部分实心）颗粒比例进行表征，是优化细胞培养效率、了解生产一致性、确定剂量及确保患者安全的关键。

AUC：采用独特表征技术

分析型超速离心机（AUC）采用超速离心分离不同颗粒，并且使用光学检测器进行辅助检测。经 AUC 分析后的颗粒通常按不同沉降系数（S）分离 —— 沉降系数影响因素包括颗粒大小、质量、形状和密度。由于不同质量、密度的 AAV 颗粒其装载量也不同，而 AUC 擅长将溶液中的这些颗粒进行分离，并提供高分辨率分析数据，无需基质相互作用，检测结果更加可信。

AUC 提供分辨率更高的数据

AUC 已成为定量评价 AAV 颗粒质量及完整度的金标准。例如，相较于阴离子交换色谱（AEX），AUC 分辨率更高，可清晰鉴别颗粒，而 AEX 则表现逊色。这些高分辨率AUC分析结果不仅适用于最 终产品质量控制，对优化细胞培养方法提高实心颗粒产出率同样行之有效。

Analysis of empty (E), full (F), and partially-full (P) AAV particles with aggregates (X) via AEX (A) and AUC (B). Reproduced with permission from Wang et al.†

采用 AEX（A）及 AUC（B）分析空心（E）、实心（F）和部分实心（P）AAV 颗粒及聚集体（X）。

小结

AUC 可提供高分辨率 AAV 样品分析信息，可实现定量鉴别空心、实心、部分包装颗粒及聚集体并检测其含量。

1958年， Meselson和Stahl通过一个密度梯度离心实验，首次在分子水平上证明了DNA半保守复制法则。他们使用15N（氮的放射性同位素）标记0代大肠杆菌，然后将大肠杆菌转移到14N（氮的非放射性同位素）培养基中继续培养，按不同时间提取其DNA，采用氯化铯密度梯度离心法进行分析。

结果表明DNA分子在0代显示重密度（HH），1代全部为中等密度（HL），2代表现为中等密度（HL）与轻密度（LL）等量。成功证实了DNA的半保留复制。

Meselson--Stahl实验，证实DNA的半保留复制

当时该实验的巧妙之处令人称赞，因此也倍誉为最美的离心实验。看到这里，你是否也跃跃欲试？想利用密度梯度离心分离不同的样本？你是否也想系统学习一次离心方法及原理？你是否对实验条件无法得到优化而苦恼？

快来加入我们吧！

超离管理员培训是针对于制备型超速离心机量身打造的离心课程，涵盖离心原理介绍，差速离心法实操，密度梯度离心法实操，离心条件的设计，实验数据分析等众多环节，为各位实验室操作者提供从理论到实操的闭环课程。培训结束后，通过考核的实验者可获得贝克曼库尔特颁发的【超速离心机管理员资格证书】，并被邀请进入【贝克曼库尔特离心沙龙】，与全国各地的离心大师们共享经验。

5月31日超离管理员培训第四期已顺利落幕，一起来看看学员们的优秀表现吧！

理论与操作讲解：

小试牛刀，快封管封口操作：

进阶实验，密度梯度离心前铺设密度梯度液：

密度梯度离心后，使用使用馏分收集器回收样品，并用分光光度计进行检测：

授证与合影留念：

天生C位，玩转离心！

该培训由贝克曼库尔特主办，培训课程免费，住宿需自理。想要加入的小伙伴们只需选择合适的场次，然后点击文末链接报名，我们会尽快和大家取得联系。

培训日程安排

培训场次安排

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