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- 眼眸Suara 2014-09-07 00:00:00
- 过滤操作中的要点常简记为“一贴二低三靠” 一贴:过滤时,为了保证过滤速度快,而且避免液体顺着漏斗与滤纸间的夹缝流下,滤纸应紧贴漏斗内壁,且中间不要留有气泡. 二低:如果滤纸边缘高于漏斗边缘,过滤器内的液体极有可能溢出;如果漏斗内液面高于滤纸边缘,液体也会顺着漏斗与滤纸间的夹缝流下,这样都会导致过滤失败. 三靠:倾倒液体的烧杯口要紧靠玻璃棒,是为了使液体顺着玻璃棒缓缓流下,避免了液体飞溅;玻璃棒下端如果紧靠一层滤纸处,万一玻璃棒把湿的滤纸戳破,液体就会顺着漏斗与滤纸间的夹缝流下,导致过滤失败,而靠在三层滤纸处则能避免这一后果;漏斗下端管口的尖嘴要紧靠承接滤液的烧杯内壁,可以使滤液顺着烧杯内壁流下,避免了滤液从烧杯中溅出.
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- 83686802 2014-09-07 00:00:00
- diyi是,需要铺滤纸,第二是漏斗下壁需要靠着烧杯壁,玻璃棒需要靠在三层滤纸上,装液体的烧杯需要靠着玻璃棒,所谓的三靠。我相信你书上会有图片的,画出来太麻烦了
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- 过滤操作的要点有哪些,画出过滤装置图
- 过滤操作要点
- ELISA各个操作步骤的注意要点有哪些?
ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。
一、标本的采取和保存
可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
二、试剂的准备
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
三、加样
在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。
四、保温
在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成最多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA中一般不予采用。
保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20-25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。
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药品保存箱采购要点有哪些?
药品保存箱主要保存药品、试剂、疫苗、生物制品、人体检测样本等,一般是指温度范围在2-8℃内的,主要是应用在医院、科研院所、疾病预防控制中心、制药厂等。
海尔生物医疗药品保存箱部分机型图片
药品保存箱的特点
温度数字显示,箱内温度可知道;
温度调节范围2-8℃/4-38℃/4-48℃/2-48℃、精准度±1℃ ;
具有声光报警两种报警方式 ;
具有温度超高温,超低温,传感器故障等情况报警;
具有超温延时报警功能;
具有灯开关按钮,不开门就可开关内部LED灯;
多重保护参数可设定,满足用户的不同需求,并提供可靠的性能保证;
药品保存箱的分类
1、2-8℃药品(medicine)保存箱
2、2-8℃嵌入式药品保存箱
3、4-38℃多功能药品保存(Save)箱
4、2-48℃药品保存箱
药品保存箱和家用冰箱的区别
首先,实验室里用的冰箱有的要达到精确恒温的,对温度的控制性能要求比较高,比如有些血站的恒温柜必须要达到正副1度的精确控制.家里的冰箱一般对温度的要求低,温度均匀性更差。
其次,实验室冰箱在选材、板材厚度、发泡等方面要求都高,而家用冰箱由于售价较低,成本需要控制的很低,所以在压缩机、板材方面的选择都是成本第一位来考虑的。
再次,实验室冰箱绝大部分都是采用风冷原理的设计,而家用冰箱基本采用直冷的方式,当然也是成本的考虑。
另外,实验室冰箱要带温度显示面板,可以随时观察箱内的温度,防止一些不必要的损失,实验室冰箱要带安全锁,特别是对于一些特殊的实验物品,需要专人专管。
风冷方式和直冷的区别
实验室冰箱一般采用风冷的方式制冷,通过风扇实现在冰箱箱体里面形成稳定均匀的空气流,从而达到精确的控温,制冷系统里的蒸发器是采用翅片式的,成本较高。
家用冰箱基本上是采用直冷方式的,通俗来说就是接触制冷,一般不会有风扇,他采用的蒸发器是吹胀式的蒸发器,成本较翅片式蒸发器低很多,成本是降下来了,但温控性能就没法保障了。
如何选择合适的药品保存箱
一步:知道药品保存箱、实验室冰箱、医用冷藏箱;
二步:断定容积大小
三步:主要应从硬件、温控性能,售后服务等方面来考虑。
硬件方面,主要要考虑此品牌所使用的压缩机品牌,尽量选择好的压缩机,比较压缩机是制冷设备的心脏。
温控性能主要是要比较温度均一性,温控精度都差不多,温度范围一般在0-10度。
优势品牌推荐:
海尔生物医疗,始于生物医疗低温存储设备的研发、生产和销售,是基于物联网转型的物联网科技生态新物种。海尔生物以用户体验为目标,以物联网网器产品为基础,针对血液安全场景、疫苗接种场景、生物样本库场景、药品及试剂场景等提供物联网生物科技解决方案,链接各攸关方共创,形成人、网器、场景互联互通的物联网体验生态,驱动技术的迭代自演进。
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