仪器网(yiqi.com)欢迎您!

| 注册2 登录
网站首页-资讯-专题- 微头条-话题-产品- 品牌库-搜索-供应商- 展会-招标-采购- 社区-知识-技术-资料库-方案-产品库- 视频

问答社区

请问检测动物机体免疫功能的方法都有哪些?

king鈾涘竼 2009-06-24 12:15:43 380  浏览
  • 我需要比较详细一些的,谢谢

参与评论

全部评论(1条)

  • 我前天订的 2009-06-25 00:00:00
    细胞免疫(CMⅠ)是由多种细胞相互作用的结果。免疫细胞间相互作用导致多种细胞因子的释放。因此细胞功能测定不仅涉及T细胞的数量和功能与包括各类因子活性测定,因此评价机体的细胞免疫功能不仅程序复杂,且很难标准化 一、迟发型过敏反应的体外检测方法 皮肤试验和接触性过敏的诱发是检测迟发型过敏反应(DTH)的两种常用方法。皮肤试验中诱发对曾经使病人致敏的抗原的再次应答,而接触性过敏是测试受者对从未接触过的物质发生致敏的能力。 1.皮肤试验 用皮肤试验诊断DTH,常用的抗原有结核菌纯蛋白衍生物(PPD)、腮腺炎病毒、念珠菌素等,在人类试验时在前臂皮内注射少量可溶性抗原,24~48小后,测量红肿硬结的大小,硬结直径大于10mm即被看作为阳性。表明受试者对该病原菌有了一定的细胞免疫能力,若皮试无反应,可用更高浓度的抗原重复试验,若仍无反应即为阴性,需排除皮试技术误差,也可能受试者从未接触过此抗原,也可能由于细胞免疫功能缺损,或由于细胞免疫功能缺损,或由于严重感染(麻疹、慢性播散性结核)造成的无反应性。 2.接触性过敏常应用低分子量化合物如二硝基氯苯(DNCB)诱生接触性过敏。化合物与皮肤蛋白质结合而导至DTH反应。在动物试验时,初次皮肤上涂抹DNCB后间隔7~10天再激发刺激,则皮肤出现即为阳性。此试验人类已不使用。 二、细胞免疫的体外检测方法 体外检测淋巴细胞的数量和功能,Z易采集的是血标本,首先需分离或纯化淋巴细胞,一般使用萄聚糖-泛影葡胺配成比重为1.077的淋巴细胞分层液,当将血液重叠于淋巴细胞分层液之上离心时,由于红细胞(1.092)、多形核白细胞(1.090)、淋巴细胞(1.070)的比重不同而相互分开。淋巴细胞和单核细胞在血浆和分层液交界处形成一薄层。仔细分出这一薄层的细胞,其中淋巴细胞占80%,单核细胞占20%,淋巴细胞中T细胞占80%,B细胞占4%~10%,其作为非DT、非B细胞。 1.T细胞计数 (1)E花环法:人类T细胞表面有SRBC受体(CD2)能与SRBC结合形成玫瑰花环样结构,将经分层液分离现的RBM悬液与SRBC在含有血清的平衡盐水中混合,经37℃培养5~10分钟放4℃过夜,取细胞悬计数,外周血淋巴细胞中约70%~80%淋巴细胞结成花环即为T细胞。目前此方法已用来分离T细胞,而不用做T细胞计数。 (2)用单克隆抗体计数T细胞:将人的PBM分成三等份,分别用小鼠抗人CD3、CD4和CD8的单克隆抗体作diyi抗体与细胞结合,再用FITC标记的兔抗小鼠IgG抗体作第二抗体进行间接免疫荧光染色,在荧光显微镜下或流式细胞仪检测结果,在PBM中被CD3抗体染上荧光的细胞称为CD3+细胞即总T细胞。正常人在PBM中T细胞占70%~80%。正常人的CD4+细胞和CD8+细胞之和应与CD3+细胞数一致。CD4+细胞与CD8+细胞的比值正常人约为2/1而艾滋病患者则比值小于1.7。 2.T细胞活化试验 T细胞能被非特异的物质称为有丝分裂原所激活而向淋巴母细胞转化。T细胞转化过程可伴随有DNA、RNA、蛋白质的合成增加,Z图导致细胞分裂。在光学显微镜下可计数转化后的淋巴细胞数,也可用氚标记的胸腺嘧啶核苷(3HTdR)掺入正在分裂的淋巴细胞,用液闪测定仪检查掺入正在分裂的淋巴细胞,用液测量仪检查掺入的3H-TdR的多少确定淋巴细胞转化率。Z近有一种不用同位素,又可用仪器测量的淋巴细胞增殖反应的检查法,称为MTT检测法,MTT是一种甲氮唑盐,它是细胞线粒体脱氢酶的底物,细胞内的酶可将MTT分解产生蓝黑色甲(fromazan)产物。该产物的多少与活性细胞数正相关。结果可用酶标检测仪(595mm)测量汇丰银行密度,做为MTT法的检查指标。此法的结果与3H-TdR掺入法平行,并能反应试验中的活细胞数(表20-3)。 表20-3 淋巴细胞增殖反应的刺激物 分裂原 T细胞 B细胞 植物血凝素(PHA) + - 刀豆蛋白A(ConA) + - 美洲商陆(PWM) + + 葡萄球菌蛋白A(SPA) ±* + 副伤寒杆B(SPB) ± + 注: PWH主要是T细胞分裂原,也可通过刺激T细胞分泌可溶性因子诱导B细胞增殖分化; *SPA诱导B细胞分裂不需要T细胞协助,但诱导B细胞激活抗体分泌细胞需要T细胞协助 3.细胞毒试验 TC细胞、NK细胞、LAK细胞、TIL细胞对其靶细胞有直接的细胞毒(杀伤)作用。常用的栓测细胞毒效应的方法是51Cr-Na2Cro4盐水溶液与靶细胞胞混合,于37℃培养1小时左右,51Cr即可进入靶细胞,与胞浆蛋白结合,洗去游离的51Cr后,即可得到51Cr标记的靶细胞,将待检细胞毒性的细胞与51Cr标记的靶细胞混合(比例约为50:1或100:1)靶细胞被杀伤越多,释放到上清液中的液游离的51Cr越多,且不能被其他细胞吸收。用γ射线测量仪检测上清液中的cpm值,即可计算出待检细胞杀伤活性的高低。 细胞毒试验检测Tc细胞效应功能是否健全,及经IgG介导的ADCC效应,或NK细胞在抗肿瘤免疫中的作用是有意义的。 4.混合淋巴细胞的反应(MIR) 是体外研究T细胞的较好的方法,双向MLR常被用来筛选移植的供体。来自不同供体的淋巴细胞分别与病人的淋巴细胞混合培养4~5天,在Z后8小时掺入51TdR掺入法测T细胞的反应性。或用细胞毒法观察受刺激的T细胞与活的靶细胞混合(靶细胞来自与刺激细胞相同的个体)如果T细胞受刺激后产生了细胞毒T细胞,可杀死活的细胞,根据靶细胞释放51Cr的多少算出T细胞移动YZ因子)和LIF(白细胞移动YZ因子)来评估细胞免疫功能。近年来应用测定IL-2的免疫酶技术,操作简单,并能定量以取代了MIF和LIF的测定。单个核细胞与分裂原一起培养24小时,然后测定清液中的IL-2活性。在细胞免疫功能缺损时,特别是AIDS病人,IL-2分泌明显降低。而有些疾病,如多发性硬化、类风湿关节炎、移植排斥反应等病人体内血清中IL-2水平升高,表明病人T细胞活性。发生移植排斥反应的病人尿中IL-2也可升高。 也可用酶联免疫吸附试验测定各种体液中活化的T细胞脱落的IL-2受体(CD25),一般来说IL-2的水平和IL-2受体水平是平行的,IL-2和IL-2受体的检测可用于对某些疾病的监测,如移杆排斥、自身免疫病以及接受免疫YZZL的病人。 对体外培养的细胞进行细胞因子产生能力检测是检查细胞培养上清液中细胞因子的生物活性或抗原性。现已可用核酸杂交技术,即从组织中或细胞中提取RNA,与同位素或酶标记的该种细胞因子的cDNA探针作分子杂交试验,即印迹(dot blotting)或Northern印迹,若查出有某种因子的mRNA存在,即说明该细胞在所处培养条件下有产生某种细胞因子的能力。

    赞(5)

    回复(0)

    评论

热门问答

请问检测动物机体免疫功能的方法都有哪些?
我需要比较详细一些的,谢谢
2009-06-24 12:15:43 380 1
请问目前肿瘤检测的方法都有哪些?
 
2017-11-22 00:44:07 489 1
流式检测细胞周期都有哪些染色方法
 
2017-02-11 03:59:57 457 1
请问雾化玻璃都有哪些控制方法啊?
 
2015-06-24 16:51:01 414 1
怎么检测压缩空气是否含油?都有哪些方法?

无油压缩空气广泛应用于食品工业生产,影响压缩空气质量的主要有油、水、固体颗粒物,但是油含量是最难检测的,也正因为如此,行业里出现了不同的测量技术及方法,但测量精度并不高。目前常见的油含量的测定方法大致包括重量法、紫外分光光度法,红外分光光度法、化学指示管法、粒径谱仪法、光化电离探测器法、气相色谱-质谱连用技术等。

1.重量法

重量法,即将一定量的样品气用恒重的容器或介质(滤纸、滤膜)装置,经蒸发、烘干、恒重后称确定其分析结果的方法。重量法是含油量测定早时候采用的方法,目前仍然有很多人用重量法测定含油量较高的水体。使用重量法时要严格控制取样管、脱脂棉定量滤纸的干湿程度及尘埃沾染的影响,严防其他油物污染。取样、分析过程中不允许有任何附加杂屑粘附在被称重的容器或介质上,天平称重必须迅速和准确,这是由于取样时空气中的机械和尘埃杂质都将影响含油量的准确性。但重量法的低灵敏度决定了它不大适合用来准确测定气体中的油含量,因为气体中油含量相当低,用重量法测定显然是不合适的。

2.红外分光光度法

压缩机油中含有在红外光区具有明显的特征吸收峰的油类物质,取一定体积的液氧自然蒸发后,油留于容器中。用四氯乙烯溶解油,并定容。采用博海星源EP900红外分光测油仪(采用红外分光光度法)测定液氧中油脂的含量,测量准确油脂含量浓度更加接近实际数据,且操作简单曲线可以长时间一直使用。

3.紫外分光光度法

博海星源UV900紫外分光测油仪(采用紫外分光光度法)由于精密度好、灵敏度高,测量压缩气体中的微量油,是基于油中含有的带有共轭键和苯环的芳香族化合物在紫外区有特征吸收为基础,因而可借助于该法测定具有共轭双键结构的物质的浓度来确定气体样品中的含油浓度。此方法基于郎博比耳光吸收定律。紫外测油仪,在 pH≤2 的条件下,样品中的油类物质被正己烷萃取,萃取液经无水硫酸钠脱水,再经硅酸镁吸附除去动植物油类等极性物质后,于 225 nm 波长处测定吸光度。


4.化学指示管法

使用化学指示管法原理生产仪器的主要是美国的江森自控和德国的德尔格。江森自控的油份指示仪内装有检气剂,与油发生反应形成着色层,根据色层颜色的深浅或变色层的长度进行定量分析。德尔格的检油管法是将油雾捕集到检油管指示层,在催化剂作用下与检油管中的浓硫酸产生黑色产物,色深与含油量存在相关性,通过比色来检测空气中的含油量,该方法一般只判断含油量是否大于某值,不能得出具体数值。该方法取样简单,但时间偏长,只能检测到油含量的大概范围,而没有具体数值。

5.粒径谱仪法

粒径谱仪是一种利用光的散射原理对悬浮颗粒进行计数的仪器,所以不能区分悬浮油和固体颗粒。但该方法可以用于特定气体(例如只含有油颗粒)的含油量测量,测量速度快,可以实时测量。所以该方法广泛用在试验台上,例如在过滤器的性能试验台上,预先将压缩空气的固体颗粒去除,再人为增加油份,用粒径谱仪测量过滤器前后的悬浮油含量,以测量过滤器的过滤效率,方便可靠。

6.光化电离探测器法

光化电离探测器法,该方法是一种通过PID(光化电离探测器)测量碳氢化合物蒸气含量的方法。从原理看,该方法主要测量油蒸气,所以一般用来在线监测压缩空气中含油量的变化,但是很难准确测量含油总量。

7.气相色谱一质谱联用技术

气相色谱一质谱联用技术主要用于测量油蒸气,其原理是使用活性炭吸收油蒸气,然后使用气相色谱一质谱联用技术进行分析测量。随着压缩空气油份等级要求越来越高,油蒸气所占的比例越来越大,该方法也会成为含油量测量的一个重要方法。

 


2021-09-17 17:21:45 980 0
怎么检测压缩空气是否含油?都有哪些方法?

无油压缩空气广泛应用于食品工业生产,影响压缩空气质量的主要有油、水、固体颗粒物,但是油含量是最难检测的,也正因为如此,行业里出现了不同的测量技术及方法,但测量精度并不高。目前常见的油含量的测定方法大致包括重量法、紫外分光光度法,红外分光光度法、化学指示管法、粒径谱仪法、光化电离探测器法、气相色谱-质谱连用技术等。

1.重量法

重量法,即将一定量的样品气用恒重的容器或介质(滤纸、滤膜)装置,经蒸发、烘干、恒重后称确定其分析结果的方法。重量法是含油量测定早时候采用的方法,目前仍然有很多人用重量法测定含油量较高的水体。使用重量法时要严格控制取样管、脱脂棉定量滤纸的干湿程度及尘埃沾染的影响,严防其他油物污染。取样、分析过程中不允许有任何附加杂屑粘附在被称重的容器或介质上,天平称重必须迅速和准确,这是由于取样时空气中的机械和尘埃杂质都将影响含油量的准确性。但重量法的低灵敏度决定了它不大适合用来准确测定气体中的油含量,因为气体中油含量相当低,用重量法测定显然是不合适的。

2.红外分光光度法

压缩机油中含有在红外光区具有明显的特征吸收峰的油类物质,取一定体积的液氧自然蒸发后,油留于容器中。用四氯乙烯溶解油,并定容。采用博海星源EP900红外分光测油仪(采用红外分光光度法)测定液氧中油脂的含量,测量准确油脂含量浓度更加接近实际数据,且操作简单曲线可以长时间一直使用。

3.紫外分光光度法

博海星源UV900紫外分光测油仪(采用紫外分光光度法)由于精密度好、灵敏度高,测量压缩气体中的微量油,是基于油中含有的带有共轭键和苯环的芳香族化合物在紫外区有特征吸收为基础,因而可借助于该法测定具有共轭双键结构的物质的浓度来确定气体样品中的含油浓度。此方法基于郎博比耳光吸收定律。紫外测油仪,在 pH≤2 的条件下,样品中的油类物质被正己烷萃取,萃取液经无水硫酸钠脱水,再经硅酸镁吸附除去动植物油类等极性物质后,于 225 nm 波长处测定吸光度。


4.化学指示管法

使用化学指示管法原理生产仪器的主要是美国的江森自控和德国的德尔格。江森自控的油份指示仪内装有检气剂,与油发生反应形成着色层,根据色层颜色的深浅或变色层的长度进行定量分析。德尔格的检油管法是将油雾捕集到检油管指示层,在催化剂作用下与检油管中的浓硫酸产生黑色产物,色深与含油量存在相关性,通过比色来检测空气中的含油量,该方法一般只判断含油量是否大于某值,不能得出具体数值。该方法取样简单,但时间偏长,只能检测到油含量的大概范围,而没有具体数值。

5.粒径谱仪法

粒径谱仪是一种利用光的散射原理对悬浮颗粒进行计数的仪器,所以不能区分悬浮油和固体颗粒。但该方法可以用于特定气体(例如只含有油颗粒)的含油量测量,测量速度快,可以实时测量。所以该方法广泛用在试验台上,例如在过滤器的性能试验台上,预先将压缩空气的固体颗粒去除,再人为增加油份,用粒径谱仪测量过滤器前后的悬浮油含量,以测量过滤器的过滤效率,方便可靠。

6.光化电离探测器法

光化电离探测器法,该方法是一种通过PID(光化电离探测器)测量碳氢化合物蒸气含量的方法。从原理看,该方法主要测量油蒸气,所以一般用来在线监测压缩空气中含油量的变化,但是很难准确测量含油总量。

7.气相色谱一质谱联用技术

气相色谱一质谱联用技术主要用于测量油蒸气,其原理是使用活性炭吸收油蒸气,然后使用气相色谱一质谱联用技术进行分析测量。随着压缩空气油份等级要求越来越高,油蒸气所占的比例越来越大,该方法也会成为含油量测量的一个重要方法。

 


2021-09-17 17:21:52 1223 0
气体检测的方法都有哪些
 
2016-12-04 01:20:00 357 1
谁能看懂淋巴细胞免疫功能流式检测报告
淋巴细胞免疫功能流式检测报告 检测报告: CD3+CD4+: 0.423 参考值:0.258---0.416 CD3+CD8+: 0.192 参考值:0.15---0.44 CD3+CD4+CD25: 0.018 参考值:0.05---0.10 这些代码代表什么呀(CD3,CD4,CD8,CD25) 医生说我第三... 淋巴细胞免疫功能流式检测报告 检测报告: CD3+CD4+: 0.423 参考值:0.258---0.416 CD3+CD8+: 0.192 参考值:0.15---0.44 CD3+CD4+CD25: 0.018 参考值:0.05---0.10 这些代码代表什么呀(CD3,CD4,CD8,CD25) 医生说我第三项有点底,我不太明白代表什么底,对身体有什么影响,应该怎么做或者需要注意什么 展开
2007-07-26 01:20:23 580 2
化学分析都有哪些方法?
请大家给介绍一下
2013-11-30 18:10:45 379 2
流量计用于检测气体的,请问都有哪些品牌啊?
检测压缩空气的,不含有毒气体
2008-11-19 01:05:56 509 3
请问食品质量检测的作用、步骤及形式都有哪些
请问食品质量检测的作用、步骤及形式都有哪些... 请问食品质量检测的作用、步骤及形式都有哪些 展开
2018-01-02 21:55:18 390 1
检测类型都有哪些
 
2015-08-09 07:24:45 749 2
检测量具都有哪些?
 
2014-05-18 02:29:44 448 2
多克隆抗体的纯化方法都有哪些
 
2017-02-14 14:04:56 490 1
请问 有机磷农药的检测有哪些方法,哪些又是Z新的方法??
我在写毕业论文,请求帮助
2011-03-23 20:31:13 574 3
请问纳米材料都有哪些特性?
 
2006-12-27 17:44:56 344 1
请问压力变送器都有哪些特点?
 
2018-07-01 17:34:25 312 1
室内空气甲醛的检测方法都有什么?
 
2015-03-12 06:49:45 410 2
冲床都有哪些校正方法?
 
2018-11-26 03:56:55 304 0
塑料都有哪些加工方法
 
2018-01-09 15:10:42 401 1

1月突出贡献榜

推荐主页

最新话题