培养皿作用及清洗时的注意事项

　　培养皿作用及清洗时的注意事项

　　在很多实验室里面，有一个由平面圆盘状的底和盖组成的一种玻璃或塑料的器皿，是用来培养或分离细菌的，它就是培养皿。那么一般在什么地方使用呢?它又有什么具体的作用呢?而且在清洁时有什么注意事项呢?下面天津本生小编就此问题详解：

　　培养皿从材质上来说，基本分为塑料和玻璃这两类。玻璃材质的培养皿可以来培养植物材料、微生物和动物细胞。而塑料的可能是聚乙烯材料，适合实验室的接种、划分及分离细菌的操作，有时也可以用来培养植物材料，而且它还可以根据你自己的使用情况，来确定是否可以多次使用或一次使用。

　　培养皿在清洁时，一般都要经过浸泡、涮洗、浸酸及清洗四个步骤。清洗时要注意用清水浸泡器皿，做到软化和溶解附着物。然后用盐酸浸泡一定的时间，使器皿在使用时不会有大量的蛋白质和油脂附在器皿的内部。最后，要注意保持器皿的卫生，避免器皿感染一些传播的疾病。

　　培养皿由一个底和一个盖组成。是用作培养细菌的化学器材。一般由玻璃或者塑料作成。

　　因为培养皿有盖能阻止空气中微生物落入其中，所以在接种的时候除了要在酒精灯旁边之外，培养皿的盖只能打开一部分 ，除了无菌操作、有盖以外，还有一点也很重要，培养皿是倒置的，而需要倒置的原因如下：

　　1、 防止培养基的水分蒸发,特别是培养基倒的时候如果倒的比较少的时候更容易干掉,影响微生物生长.

　　2、 倒放可以在某种程度上防止菌落蔓延,好形成单个菌落,利于计数，底朝下时，培养皿中的水分会蒸发，上升到盖子的时候由于温度低，往往会形成凝水，这种凝水可能会滴下去，造成下面的单菌落被混淆在一起。

　　3、 培养基的水分要蒸发，形成水珠，如果正放的话水珠集聚在培养基平面上会影响菌落的生长，所以要保证培养基的干燥，就得倒置培养。

　　4、 这是一点,还有就是便于拿取,大下小上,不会打掉，也防止外物掉在培养基上。

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       RO反渗透膜是实验室超纯水机内部的水处理关键零部件之一，原水经预处理和反渗透处理后就会变为实验用的纯水。RO反渗透膜可以单向截留原水中的杂质，但长期使用便会堆积杂物，需要定期清洗。而RO反渗透膜的清洗是需要掌握一定方式方法的，否则便会造成膜的损坏，下面优尔普就来简单介绍下。

RO反渗透膜的清洗方式

       在清洗RO反渗透膜之前，我们要了解造成膜污染的污染物有哪些。常见的RO反渗透膜污染物有碳酸钙、硫酸钙、金属氧化物、硅化物、无机或有机沉淀物、天然有机质、合成物(阳离子聚合电解质)和微生物(藻类、霉菌、真菌)等，知道了污染物的种类，我们就能“对症下药”。

　　RO反渗透膜清洗方法可以分为物理清洗和化学清洗两类。

物理清洗

　　物理清洗是利用机械性的冲刷来去除膜元件的污染物，以恢复膜元件的性能，如可采用湍流、振动、气水混合、超声波等物理方法将吸附在膜元件上的污染物冲洗掉。如图所示：

物理法清洗RO反渗透膜

化学清洗

　　化学清洗是使用相应的化学药剂与污染物发生反应，使其溶于水中，然后从膜元件中排出，恢复膜元件性能的一种清洁方式。

　　RO膜化学清洗对清洗药剂的选择要求非常严格，首先一点就是不能与待清洗的RO膜元件发生任何相关的反应，其次就是选择的药剂能方便处理，不能污染环境。RO反渗透膜常用的清洗剂分为酸性清洗剂(如磷酸、草酸、柠檬酸等)和碱性清洗剂(氢氧化钠溶液)。

　　在对RO反渗透膜清洗前建议对膜元件进行实验分析，然后针对污染原因选择对应的化学药剂。在清洗的同时，要采用等水压冲洗或者反向冲洗的冲洗方式，这样能更有效的清除膜表面的污染物。

RO反渗透膜各清洗方式优缺点及注意事项

物理清洗法优点

　　针对反渗透膜污染，吸附能力比较弱的污染物来说，物理清洗方式非常有效，且不改变污染物的性质。

物理清洗法缺点

       1、长时间、高频率的使用会影响膜一定的性能;

       2、易造成产水量下降;

       3、操作不当易造成膜损伤;

       4、无法消除微生物、细菌及有机物的污染。

物理清洗法注意事项

       1、冲洗流速。冲洗流速要比系统正常运行制水时的流速要高，才能将污染物清洗掉。

       2、冲洗压力。正常反渗透系统运行的压力，使得污染物堆积在膜表面，因此在冲洗时若选择较高的压力会使得污染物在压力大的作用下更容易附着在膜表面，所以在冲洗时，应该选择低压、高流速的清洗方式，增加膜表面水平方向的冲洗力度，这样才能将污染物从膜元件中冲洗出来。通常的冲洗压力在0.3MPa以下。如果在0.3MPa压力以下很难达到一定的流量，应该尽可能的控制进水压力，以不出产水或者少出产水为标准。一般来说，进水压力不能大于0.4MPa。

       3、冲洗频率。条件允许的情况下，应经常对RO膜进行冲洗，增加冲洗次数比进行一次化学清洗更有效果。用户可根据具体使用情况，自行控制冲洗频率。

化学清洗法优点

　　化学清洗可以有效防止微生物、细菌以及有机物的污染，清洗更彻底，对膜的物理损坏较小。

化学清洗法缺点

       1、清洗频率过高容易影响膜性能;

       2、使用清洗剂不当容易造成膜损伤。

化学清洗法注意事项

       1、要选择专用的膜清洗剂，不仅能对膜进行有效清洗，还能尽可能的减少对膜的损坏;

       2、清洗前对膜污染物进行化学分析;

       3、记录每次清洗时的给水条件和清洗剂用量，为找出良好的清洗方式提供依据和保障。

　　以上就是关于实验室超纯水机RO反渗透膜的清洗方法及其优缺点和注意事项，我们在日常进行清洗时可以将两种方式结合起来，以达到安全又有效的清洁处理效果。

文章转自：http://www.ulp17.com/news/121.html

　　天津本生|PCR八联管试剂盒的清洗方法及注意事项

　　实验方法原理：硅胶膜在高盐条件下结合DNA，可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物，单核苷酸，酶，矿物油，盐离子等被分离，因为它们与DNA没有相似的性质。

　　实验材料：PCR产物，试剂，试剂盒，PCR清洁套件，仪器，消耗品，96孔DNA制备板96孔深孔板96孔V形板

　　一、PCR八联管厂家谈试剂盒的组成，储存，稳定性

　　1、说明书，消耗品：96孔DNA制备板，96孔1.6ml深孔板，96孔V形板。

　　2、缓冲液PCR-A：DNA结合溶液。在室温下以密封状态储存。如果发生沉淀，应将其溶解在65°C的温浴中，并在使用前冷却至室温。

　　3、缓冲液W2浓缩液：除去盐溶液。使用前，根据瓶子上的体积加入乙醇，充分混合，并在室温下保存。可以使用100%乙醇或95%无水乙醇。

　　4.洗脱液：2.5mM Tris-HCl，pH 8.5，在室温下以密封状态储存。

　　二、PCR八联管操作步骤

　　用户可以选择负压或离心。

　　A.负压法

　　1、正确连接负压装置，将96孔DNA制备板放在负压装置上;在PCR，酶消化，酶标记或测序反应溶液中加入3倍缓冲液PCR-A(如果缓冲液PCR-A小于100μl，加入100μl);充分混合并转移至96孔DNA制备板，打开并调节负压至-25-30英寸汞柱，并缓慢吸出板中的溶液。

　　2、加入0.3 ml缓冲液W2并吸收溶液。用相同的方法用0.3ml缓冲液W2洗涤两次。

　　确认在试剂瓶上的体积的缓冲液W2浓缩物中加入无水乙醇。

　　3、维持负压并提取96孔DNA制备板10分钟。

　　4、在长纤维组织上将96孔DNA制备板粉碎6次，引流管朝下。

　　5、将96孔DNA制备板置于96孔V形板上，加入25-30ul水或洗脱至膜ZX，在室温下静置1分钟。通过以3 000×g离心5分钟洗脱DNA。

　　B.离心

　　1、在PCR，消化，酶标记或测序反应中加入3倍体积的Buffer PCR-A(如果Buffer   PCR-A小于100μl，加100μl);混合并转移到制备板96孔中的96孔DNA中。将DNA制备板置于96孔1.6ml深孔板中，以1000×g离心1分钟，弃去滤液。

　　2、在96孔DNA制备板中，加入0.3ml缓冲液W2，以1000×g离心1分钟，弃去滤液。用0.3ml缓冲液W2以相同方式再次洗涤。确认在试剂瓶上的体积的缓冲液W2浓缩物中加入无水乙醇。

　　3、将96孔DNA制备板置于96孔1.6ml深孔板中，并以3 000×g离心10分钟。

　　4、将96孔DNA制备板置于干净的96孔V形底板中，加入25-30ul水或洗脱至膜ZX，在室温下静置1分钟。通过以3  000×g离心5分钟洗脱DNA。

　　PCR八联管注意事项：

　　1、将洗脱液或水加热至65°C有助于提高洗脱效率。

　　2、DNA分子是酸性的，建议储存在2.5 mM Tris-HCl，pH 8.5洗脱液中。

　　天津本生|PCR八联管试剂盒的清洗方法及注意事项，本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　细胞培养皿的用途和注意事项!

　　玻璃培养皿/塑料培养皿，本生(天津)健康科技有限公司供应：移液器吸嘴，ELISA试剂盒，动物血清，全系荧光定量PCR耗材，产品包括：PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。

　　培养皿简介：

　　培养皿是一种常用的玻璃仪器，主要用于微生物或细胞培养的一种器皿，由一个平面圆盘状的底和一个盖组成，一般用玻璃或塑料制成。玻璃培养皿可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的一般是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，适合实验室接种、划线、分离细菌的操作，可以用于植物材料的培养。

　　培养皿常用规格：60mm、75mm、90mm、100mm、120mm、150mm

　　培养皿使用注意事项：

　　培养皿质地脆弱、易碎，故在清洗及拿放时应小心谨慎、轻拿轻放。使用完毕的培养皿及时清洗干净，存放在安全、固定的位置，防止损坏、摔坏。

　　培养皿用途：

　　主要用于盛载液体培养液或固体琼脂培养液进行细胞培养的玻璃或塑料圆形器皿。

　　主要适用于防疫站、医院、生物制品、食品工业、制药工业等单位，用于细菌的分离培养、抗菌素效价检验和定性检验分析。在农业、水产等科学研究用于对种子发牙、植物、昆虫、鱼种的人工培养、孵化研究。电子工业或其它行业作为器皿使用。

　　当然比较严谨的操作就是一只手(通常是左手)打开培养皿的盖子,打一个角度就可以,然后用无菌长吸管将培养液吸走,然后再换一根习惯加入新鲜的培养基,加的的时候尽量不对着细胞直吹,对着皿的侧壁吹,使之流入培养皿.离酒精灯近点当然好,但也别太近了,塑料的容易遇热变形.

　　其实在我看来真的不需要那么严谨,我就是打开盖子然后直接把培养皿反过来把培养液倒入废液缸,也没有污染嘛.无论是换液还是别的操作,重点就是手尽量不要碰任何瓶、皿的口,尽量离远点.我本人就是先一只手掀盖,一只手把皿夹起来,然后托底翻过来,把旧培养液倒出去就可以加新的或者用D-Hanks洗一洗了.

　　当然条件好的话(比如有钱买各种无菌长吸管)当然严谨点好,我觉得只要不碰瓶口,尽量不在敞口的时候手从瓶子上面经过就OK.

　　关于细胞铺匀，我铺293t

　　我的方法是消化，消化好，直接加进去，让他覆盖底面积就好不要晃

　　方法：

　　1，先在空班里加入培养基润一下，然后加入细胞

　　2，直接加入细胞，然后在班里吹吹

　　3，加入细胞，晃上下左右，突然停

　　方法度应该可行，但不同的人感觉不同，所以最终结果也不同。

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等离子清洗机在使用时有什么技巧？处理设备广泛应用于等离子清洗、刻蚀、等离子镀、等离子涂覆、等离子灰化和表面改性等场合。通过其处理,能够改善材料表面的润湿能力,使多种材料能够进行涂覆、镀等操作,增强粘合力、键合力,同时去除有机污染物、油污或油脂。

在断电的情况下，检查等离子清洗机尾部电源边的保险盒内的保险管是否正常，无烧断迹象；如果此项检测失败，建议更换相匹配保险管。

接通电源（打开等离子机控制面板左下角的电源开关），测试RF档位处于低、中、高时（LOW/MED/HI）荧光灯是否都点亮（荧光灯置入反应舱内，用手悬空拿着；一般在低档位时比较难点亮，建议依次从高的档位开始）。如果此项检测失败（荧光灯未点亮，证明等离子机内部的真空管或是电子部件烧毁。），需要联系厂家更换或是维修。

　　离心管的选择及注意事项

　　本生(天津)健康科技有限公司供应：移液器吸嘴，ELISA试剂盒，动物血清，全系荧光定量PCR耗材，产品包括：PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。

　　离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备，生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下，由于巨大的离心力作用，使悬浮的微小颗粒(如细胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降，从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中必备的实验耗材之一。

　　离心管的分类：

　　1、塑料离心管

　　塑料离心管的优点是透明或者是半透明的，它的硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形，抗有机溶剂腐蚀性差，使用寿命短。塑料离心管都有管盖，它的作用是防止样品外泄，尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管，防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密，在试验时能否盖严，以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中，常用材料有聚乙烯PE)，聚碳酸酯(PC)，聚丙烯(PP)等，其中聚丙烯PP管性能会相对较好，所以，我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。

　　2、玻璃离心管

　　使用玻璃管时离心力不宜过大，需要垫橡胶垫，防止管子破碎，高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好，液体就不能加满(针对告诉离心机且使用角转子)以防外溢，失去平衡。外溢后果是污染转子和离心腔，影响感应器正常工作。超速离心时，液体一定要加满离心管，因为超离需要抽高真空，只有加满才能避免离心管变形。

　　3、钢制离心管

　　而钢制离心管强度大，不变形，能抗热，抗冻，抗化学腐蚀，它的应用也是相当广泛但使用时同样也应避免接触强腐蚀性的化学药品，如强酸、强碱等。尽量避免这些化学物质的腐蚀。

　　超滤离心管使用方法和注意事项

　　1、选择合适的超滤离心管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。

　　2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤离心管需要插在冰上预冷。

　　3、质量和ZX二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法时间处理，后果不可预测!

　　总结：离心管的选择及注意事项,本生生物小编就分享到这了，看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧!总的来说，希望对大家有所帮助。

　　细胞培养的步骤及注意事项

　　一、 复苏

　　1. 把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟)，拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

　　2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来)，1000转离心5分钟。

　　3. 把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。

　　4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。

　　5. 3天换一次培养基。

　　二、 传代

　　1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。

　　2. 把原有培养基吸掉。

　　3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行)，消化1-2分钟。

　　4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。

　　5. 用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。

　　6. 把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。

　　7. 倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。

　　8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。

　　三、 冻存把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。 冻存液的配制： 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。

　　细胞培养的步骤及注意事项,先和大家介绍到这，如果想要了解更多离心管的信息，可以关注天津本生生物，业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材，欢迎广大客户来询。