仪器网(yiqi.com)欢迎您!

| 注册2 登录
网站首页-资讯-专题- 微头条-话题-产品- 品牌库-搜索-供应商- 展会-招标-采购- 社区-知识-技术-资料库-方案-产品库- 视频

问答社区

PCR仪工作原理?

banaobt30 2014-09-13 20:55:59 467  浏览
  • 如标题所述

参与评论

全部评论(1条)

  • 忆饱商 2014-09-14 00:00:00
    聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,简称PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。 二、PCR基本原理 基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成: 1、模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备; 2、模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合; 3、引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍(Plateau)。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。 在此同时认识到蛋白质是接受RNA的遗传信息而合成的。50年代Zamecnik等在形态学和分离的亚细胞组分实验中已发现微粒体(microsome)是细胞内蛋白质合成的部位;1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson等分离出tRNA并对它们在合成蛋白质中转运氨基酸的功能提出了假设;1961年Brenner及Gross等观察了在蛋白质合成过程中mRNA与核糖体的结合;1965年Holley首次测出了酵母丙氨酸tRNA的一级结构;特别是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等几组科学家的共同努力破译了RNA上编码合成蛋白质的遗传密码,随后研究表明这套遗传密码在生物界具有通用性,从而认识了蛋白质翻译合成的基本过程。 从分子生物学的发展过程,可以看到在近半个世纪中它是生命科学范围发展Z为迅速的一个前沿领域,推动着整个生命科学的发展。至今分子生物学仍在迅速发展中,新成果、新技术不断涌现,但分子生物学的历史还短,积累的资料还不够。例如:在地球上千姿万态的生物携带庞大的生命信息,迄今人类所了解的只是极少的一部分,还未认识核酸、蛋白质组成生命的许多基本规律;又如即使到2005年我们已经获得人类基因组DNA3×109bp的全序列,确定了人的5-10万个基因的一级结构,但是要彻底搞清楚这些基因产物的功能、调控、基因间的相互关系和协调,要理解80%以上不为蛋白质编码的序列的作用等等,都还要经历漫长的研究道路。可以说分子生物学的发展前景光辉灿烂,道路还会艰难曲折。 平或放大真核细胞单拷贝基因,通过PCR方法都是不难完成的。 4、特异性强 作为引物的寡核苷酸与模板结合的正确性是决定反应产物是否特异的关键。 5、对原始材料质量要求低含微量(pg,ng)的目的DNA的粗制品或者总RNA,就可以用做反应起始材料来获取目的产物。 主要适用于生命科学、医学、农业科学、环境科学、考古学及历史事件解读和卫生安全方面。

    赞(11)

    回复(0)

    评论

热门问答

PCR仪工作原理?
如标题所述
2014-09-13 20:55:59 467 1
凯氏定氮仪工作原理

凯氏定氮仪,是检测食品、谷物、土壤等物质中氮含量的专用仪器。根据蛋白质中氮的含量恒定的原理,通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。凯氏定氮仪因其测量结果的准确性和可靠性广受各大消费者青睐,那么它是如何来工作的呢?

凯氏定氮仪是利用凯氏定氮法来测量物质中氮含量的。凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1833年建立的,它是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。它是通过在催化剂的催化下,利用浓H2SO4消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为NH3,随水蒸气蒸馏出来并为过量的H3BO3溶液吸收,然后通过标准盐酸来进行滴定,通过计算得出样品中氮含量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。

凯氏定氮法所涉及的化学方程式

2NH3+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 (其中CuSO4做催化剂)

(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4

2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O

(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3

(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3

 (相关内容来源于网络)


2019-06-24 11:44:03 697 0
闭口闪点仪的工作原理
 
2016-03-21 01:18:16 388 1
折射仪工作原理是什么?
 
2011-05-04 01:00:40 455 3
分贝仪的工作原理
 
2016-05-27 17:04:52 625 2
X射线衍射仪工作原理
 
2017-09-09 22:29:02 473 1
文件检验仪的工作原理。
文件检验仪的原理。详细点的。
2008-11-21 17:07:43 472 1
测汞仪的工作原理
 
2018-11-20 04:15:59 446 0
电导仪(土壤盐分测定仪)工作原理
 
2014-09-28 04:39:36 354 1
激光标线仪的工作原理
 
2018-11-15 16:16:04 253 0
马尔文粒度仪工作原理
马尔文粒度仪工作原理
2018-01-31 20:48:50 696 1
量热仪的工作原理
 
2018-12-08 19:49:45 435 0
HPLC仪的工作原理是什么?
 
2008-06-20 06:59:23 602 1
激光扫平仪的工作原理
 
2018-12-09 10:32:25 314 0
运动粘度仪的工作原理是什么?

石油产品运动粘度自动测定仪是依据国家标准《GB265-88石油产品运动粘度测定法》设计制造的专用测试仪器,适用于测定液体石油产品的运动粘度。本仪器具有计时试样运动时间,自动计算运动粘度的最后结果。本方法适用于测定液体石油产品(指牛顿液体)的运动粘度,其单位为m2/s,通常在实际中使用为mm2/s。动力粘度可由测得的运动粘度乘以液体的密度求得。本方法是在某一恒定的温度下,测定一定体积的液体在重力下流过一个标定好的玻璃毛细管粘度计(品氏、乌氏)的时间,粘度计的毛细管常数与流动时间的乘积,即为该温度下测定液体的运动粘度。该温度下运动粘度和同温度下液体的密度之积为该温度下的动力粘度。


2025-10-21 16:58:39 30 0
写有PCR 606J的三脚管是什么?工作原理?
 
2017-10-05 11:08:28 829 1
X射线衍射仪的工作原理
 
2009-05-25 08:27:27 907 3
闪点仪的工作原理是什么呢?
 
2014-12-18 21:53:07 372 2
激光垂直仪的工作原理是什么?
 
2013-03-27 06:07:56 564 2
工业废水LB-OIL6测油仪工作原理

LB-OIL6红外测油仪

 


 

主要应用领域:

红外测油仪不仅适用于地表水、地下水、海水、生活用水和工业废水等各种水体及土壤中石油类(矿物油)、动植物油及总油含量的监测,同时也是烟气(饮食行业油烟)含油量监测标准推荐的仪器。此外,还可用于有机试剂纯度检测及含各种不同C-H键有机物总量和分量的测量。

 

 

工作原理

     当某单色光通过被测溶液时,其光能就会被吸收。光能被吸收的强弱与被测溶液的浓度成比例,符合比尔定律

 


                    A= log (1/T)=log(I0 / I)

        式中:T  ---------- 透过率

              I0  ---------- 入射光强度

              I  ---------- 透射光强度

              A  ---------  吸光度

       石油类物质浓度计算公式为:

           C=X×A2930+Y×A2960+Z×(A3030-A2930/F)

        式中:C为油分浓度

              A2930  A2960  A3030  为不同波长下的吸光度

              X、Y、Z、F为校正系数

   先测总含油量 C  再将萃取液通过硅酸镁吸附,分离除去极性的动植物油类物质,以同样方法测量,得到石油类的浓度 C石油  ,那么动植物油的含量为:

C动植物 = C - C石油 

仪器特点

1.可拆卸一体化光学系统,仪器体积小,重量轻,先分光后吸收,符合红外光谱特点要求,稳定性好,信噪比高。

2.采用电调制光源,即降低了光源发热强度,以利于系统散热,同时由于无机械切光运动器件,从而简化了仪器结构,提高了仪器可靠性。

3.传感器信号处理采用锁相放大电路,提高了仪器信噪比和低检出限。

4.独特的比色池结构设计,适用1到5厘米任何比色皿。

5.结构简单,仪器光学系统、电气系统自成一体,集成化程度高,从而提高了仪器的可靠性和可维护性。

6.操作简单,只需点按一下鼠标即可完成一次油样的测定。

7.测量速度快,测量一次样品仅需1分钟。

8.软件功能强大,测量数据及谱图可以保存到硬盘,随时可以查询、打印谱图,并具有自动调零、回归方程计算1561sfehw1541等功能。

 

主要技术指标

1.基本测量范围     0.00~800mg/L  ( 4cm~0.5cm比色皿)

2.水样测量范围     0.0012 mg/L~64000mg/L  ( 4cm比色皿)

3. 检出极限      <0.0012mg/L(水样,采用萃取比100:1,4cm石英比色皿)

4.重复性       ≤1% (对40mg/L油样)

5.线性         R>0.999

6.波数范围     3400cm-12400cm-1

7.吸光度范围   0.0000~2.000AU

8.基本测量范围 0.0012 mg/L~100mg/L  ( 4cm比色皿)

9.外型尺寸     550cm × 380cm × 150cm

10.重量   15Kg

11.电源  (220±22)V  (50±1)Hz  35VA.


2019-06-28 10:33:36 452 0

12月突出贡献榜

推荐主页

最新话题