绝缘电阻测试仪三大常见问题解答

绝缘电阻测试仪，俗称数字摇表、数字兆欧表，已经越来越被广大电气人所接受。

很多老式摇表升级上来的工程师，或者很少接触使用摇表的新兵，往往用着用着就有很多困惑。

让我们一一盘点这些灵魂拷问：

1、绝缘电阻该怎么接线？

1） 首先被测系统必须断电，将绝缘表的 绝缘测试电压端和COM端，分别接上被测物。

以带绝缘层的导线测量为例，则一端接绝缘胶皮，一端接金属线，让 测试仪-表笔-绝缘胶皮-金属线-表笔-测试仪，成为一个回路。

小技巧：实际使用表笔接触绝缘胶皮时，建议先用铝箔等包裹绝缘胶皮，以免因为表笔接触面过小，遗漏故障点

2、为什么输出电压总是跳动？

绝缘电阻的基本原理可以类比一个典型的欧姆定律图：仪表有已知内阻，会输出恒定测试电压，同时检测电流。为了确保人身安全和设备安全，绝缘表设有限流保护。如果被测绝缘体电阻较低，或发生局部击穿，或分布电容较大，限流保护功能将起作用，此时会观察到电压的波动。绝缘表会根据实际的电压和电流计算绝缘电阻，测量结果仍可保持准确。

干货问题1：如果实际电压上不去，说明外部绝缘阻值太小。您应该选择更低的输出电压，来正确测量。

3、高压测量安全吗？仪表没有接地，如何放电？

福禄克绝缘表，全系标配放电电路，通过科学设计的内部负载，把测量结束后的电能回收到仪表内部消耗掉。保证使用者的安全。

福禄克绝缘电阻测试仪热门型号推荐：

Fluke 1508 绝缘电阻测试仪

Fluke 1503 绝缘电阻测试仪

如需了解更多福禄克绝缘电阻测试仪欢迎相关知识访问安泰测试网。

Q1 

怎么设定麻醉动物的流量？

       动物的麻醉效果除了与蒸发器设置浓度有关，也与流入动物的氧流量有关。通过下面的列表可以看出，当蒸发器设定浓度为2%，测量兔子的呼气末异氟烷浓度的差异，一般流量越大，动物呼气末异氟烷浓度越大。

       根据我们测量和经验总结：一般建议小鼠氧流量为0.3-0.5L/min，大鼠为0.5-0.7 L/min，具体的流量根据动物的麻醉状态适当上下调节。非啮齿哺乳动物要高很多，跟动物的体重有关，也根据选择的呼吸回路相关。

Q2

如果需要同时麻醉多只动物，

怎么独立控制每只动物的麻醉流量？

       采用R510-07五通道流量计！把麻醉机快速升级为五通道麻醉机，不仅可以麻醉五只动物，而且每个通道可以独立调节气体流量，达到每只动物麻醉状态的独立调节。

五通道流量计

Q3

麻醉效果与蒸发器浓度相关，

那怎么调节麻醉机的浓度？

       蒸发器浓度的调节与蒸发器种类和麻醉剂有关，一般动物麻醉选用的是异氟烷和七氟烷的蒸发器和麻醉剂，并且在诱导时和麻醉维持时，浓度调节不一样，具体如下：

蒸发器

Q4

每次做实验时，要倒入多少麻醉剂呢？

       一般在使用麻醉机前，需检查蒸发器麻醉药的剩余量，确保麻药的容量在蒸发器示液柱刻度线之间，根据实验长短适量增加。 

       如果是新机首次使用，可以一瓶100ml的麻醉剂全部倒入蒸发器中，避免反复加药。瑞沃德的蒸发器容量为120ml，且做过3个月的密封性检测，不用担心蒸发器关闭时，麻醉药泄露。 

Q5

清空诱导盒内的麻醉气体需要多久？

       啮齿动物从诱导盒取出时，里面会有大量麻醉药残留。可通过麻醉机的快速充氧开关稀释诱导盒的麻药，避免实验人员打开诱导盒时吸入麻醉药。

       依据快速充氧速度10L/min 和诱导盒的体积，瑞沃德麻醉机快速充氧清空诱导盒内麻醉气体，参考时间如下：

       小鼠诱导盒约9秒。

       大鼠诱导盒约30秒。

       兔猫诱导盒2分钟以内。

       大动物诱导盒2分钟以内。

诱导盒

Q6

麻醉机配的回收器的风速调为多少？

       回收器的流速不同，产生气体的抽力也不同。使用回收器既能确保面罩处可以维持动物麻醉，又避免麻醉废药泄露到环境中。

回收器

       瑞沃德的回收器风速为35-60LPM，且大小可调。一般使用面罩麻醉单只啮齿类动物时，回收器风速推荐R档。可根据现场使用的面罩及通道数和流量计流量适当调节，确保麻醉废药被充分回收。以下是瑞沃德一款面罩与回收器的使用的测试结果。

　　实验干货—ELISA实验过程中的常见问题解答
 

　　ELISA实验中会遇到很多问题，不是这有点小问题，就是那有点小问题，那该怎么办呢?以下便是天津本生技术小编是我们在多年的实验过程中遇到问题的总结：

　　Q1.标曲不显色或显色很弱，样本显色

　　溶解标准品以及倍比稀释时，未涡旋震荡或不够充分。标准品溶解、倍比稀释时均需要涡旋震荡以充分混匀。单纯依靠移液器反复吹打，效率较低、效果也不一定。

　　Q2.标曲和样本均不显色

　　在孵育阶段静置在桌面上，这样非常不利于抗原抗体之间的充分接触，导致显色偏弱，推荐孵育阶段，使用ELISA用的微孔板振荡器，调至合适的频率，使抗原抗体充分接触，结合效果。如果排除上述原因，有可能是漏加了某个组分，如检测抗体、酶等。对于比较马虎的新手，一定要做好标记和记录，或者使用添加染料的ELISA试剂盒。

　　Q3.标曲显色，样本不显色

　　当样本中目的蛋白浓度低或者样本中干扰因素较强，就无法检测到。目ELISA仍然是蛋白检测灵敏度的方法，与不同技术结合后，衍生出了多种类型的ELISA，提高了检测灵敏度。

　　对于目的蛋白浓度特别低的样本，可以尝高敏ELISA，但这也并不意味着一定能检测到样本浓度，只能说可以提高样本的可测率，并使结果更加可靠。因为通常用普通ELISA检测的样本OD值都偏低，而高敏ELISA可提高样本OD值，使之尽量位于标曲范围内，得到的数值也更加可信。

　　Q4.标曲和样本都显色，但复孔的CV大

　　这个问题就跟移液器和实验者的操作有关了。移液器的使用维护不规范，就会造成移液的误差较大;实验者自身的操作习惯、加样的一致性对复孔的CV也有很大影响。

　　掌握移液器的正确使用和维护。关于个人的操作可练习移液动作、加快速度，确保移液的精密度。

　　Q5.本底偏高，样本值测不到

　　标曲的本底即Blank孔的OD值一般要求控制在0.1以下(对于高敏ELISA可以适当放宽要求)。尤其是样本值特别低的时候，本底过高会掩盖目的信号，导致无法测到样本值。

　　在加入TMB显色后，需实时观察标曲显色情况。通常在S5孔有肉眼可见的微弱蓝色，即可终止反应。

　　Q6.样本经不同梯度稀释，计算得到的样本值差异较大

　　有时候我们不清楚样本中目的蛋白的浓度如何，应该如何稀释，那么我们就会做下预实验，确定稀释倍数。然而有时候同一样本做了几个不同梯度稀释后，计算得到的样本值之间差异较大，应该选择哪一个稀释倍数呢?

　　这里涉及到了基质效应。通常血清样本加样量较高时，血清中的各种蛋白会抗原抗体的接触，基质效应较明显。而经过稀释后，干扰因素也随之稀释，影响就会较小。当某两个梯度稀释后，计算得到的样本值接近时，我们就可以认为在该稀释梯度时，样本中的干扰因素影响较小，计算得到的值也是接近真实的。然而这样的稀释是针对目的蛋白浓度较高的样本而言。对于浓度很低的样本，经过多倍稀释后，就更加测不到了，此时可按照厂家说明书推荐的加样方式操作。

　　Q7.不同试剂盒中的组分能否通用

　　除非是公用的试剂如洗液、检测缓冲液，其它组分不建议用其它试剂盒的组分，甚至是同一指标不同批次的试剂盒里的组分。这些组分(包括标准品、标准品稀释液、检测抗体、酶等)都是经过优化的，如果贸然使用其它试剂盒的组分，有可能对结果产生影响。

　　ELISA试剂盒本生公司产品种类已超过万种，正广泛应用于科研院校、中心实验室、分子生物学等科研域。公司丰富的产品既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。

硫氧还蛋白（Thioredoxins）是一系列广泛存在于生物体内的氧化还原酶，它能通过置换硫代二硫化物来减少二硫键的结合。常用作融合表达标签的硫氧还蛋白A(TrxA), 分量为11.6kDa，来源于大肠杆菌。

TrxA标签最独特的优点是它的热稳定性。TrxA本身不作为亲和标签来进行重组蛋白优化，而是通过在高温条件下将杂蛋白变性去除而重组蛋白得以保存。TrxA也具有极好的促溶效率，用作促溶标签时可将重组蛋白的可溶性表达从12%提高至95%。

下面是针对trx标签常见问答解析：

①trx标签蛋白序列

MSDKIIHLTD DSFDTDVLKA DGAILVDFWA EWCGPCKMIA PILDEIADEY QGKLTVAKLN IDQNPGTAPK YGIRGIPTLL LFKNGEVAAT KVGALSKGQL KEFLDANLAG SGSGHMHHHH HHSSGLVPRG

②带有trx标签会不会影响蛋白的抗原性

有可能的，trx标签是比较大的融合标签，有20多KDa，非常有可能改变蛋白的抗原决定簇。

一般为了不影响蛋白的功能，会在trx标签和目标蛋白之间加一个酶切位点，比如肠激酶的位点DDDDK，把trx标签去除掉。

③TRX标签蛋白怎么纯化

一般这个载体中都会有His 标签，直接用镍柱纯化即可

④常见的蛋白标签有哪些？有什么特点？

常见的蛋白标签有His-Tag、FLAG-Tag、HA-Tag、Myc-Tag、SUMO-Tag……

His-Tag

主要应用：蛋白纯化优选，也可用于检测。

特点：

• 分子量小，不影响目的蛋白的可溶性、结构和功能。

• 可在非离子型表面活性剂存在/变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时表现突出。

• 可应用于多种表达系统，纯化的条件温和。

• 可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。

• 免疫原性相对较低。

FLAG-Tag

主要应用： 广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域，在真核表达系统中表达效率更高。

特点：

• 分子量小，不影响融合蛋白功能，比同类标签更具亲水性。

• 目的蛋白可直接通过FLAG标签进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白且纯化效率高。

• 可以被抗FLAG抗体所识别，便于通过WB、ELISA等方法对含有FLAG标签的融合蛋白进行检测、鉴定。

• 融合在目的蛋白N端的FLAG标签，其可以被肠激酶切除（DDDK），从而得到特异的目的蛋白。

更多关于蛋白标签详情可以参看：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag

义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索“义翘神州”与我们取得联系。

数字万用表是一线电气工程师、技术人员Z基础且Z不可或缺的工具利器。在现场使用时，由于不同工况下测试环境、现场电气氛围、被测设备、信号类型等因素，很多时候万用表使用时会碰到测试结果偏差大，甚至烧表的情况。

今天，福禄克给大家带来了实实在在的干货分享，帮助大家了解万用表在实际测试过程中，经常会碰到的问题及解决方法。

1.为什么一打开万用表就会有数值跳动？

万用表电压、电流档位很多时候用户打到测试档位还没测试之前，表盘会有一定的读数显示。这主要是因为外部电气氛围的影响，包括现场电磁场、空气静电的干扰。

但是当红黑表笔短接后，万用表的读数为0或接近为0，即可进行正常的测试。因为在真正测试时，万用表是并联或串联在回路中，红黑表笔之间通过被测回路等效短接，这样可以有效避免外界环境的干扰，保障测试结果的准确性。

2.如何快速检测万用表保险丝的好坏？

大家都知道，万用表在电流档位是有内置保险丝的，目的是确保在测试电流时，将万用表串接到回路中，一旦回路电流超标或存在危险电流时，保险丝能够及时分断，确保仪器尤其是操作人员的安全。

当怀疑保险丝有故障时，可用以下方法进行快速判断：

将万用表打到“Ω”档位，只用一根表笔即可，插头部位插到Ω插孔，用笔尖分别伸进“A”和“mA/uA”的插孔，若有读数则说明保险丝良好（“A”插孔读数应为0-0.5Ω，“mA/uA”插孔读数应为10KΩ左右），若显示“OL”，则表明保险丝烧毁。

3.万用表电压档位内阻多大？

所有的数字万用表在测试电压时，电压档位的内阻要比被测回路的阻抗无限大，理论上应该无穷大。

由于实际电压测试时，万用表内部阻抗和外部回路是分压的关系。当内部阻抗无穷大时，可以保障被测电压全部分在仪表内阻上，仪表的读数才会更加准确。

因此福禄克的万用表交直流电压档位内阻为10MΩ，可以保障测试数据准确。

4.在测试不同类型信号时为什么会有较大误差？

数字万用表按照测试原理分为平均响应和真有效值两种类型。主要针对于不同类型的信号测试。当测试普通市电及低压配电设备时，其信号大多为标准正弦信号，使用平均响应原理的万用表完全可以满足测试要求。

但 当测试非线性负载时，由于环境因素、三相不平衡等影响，很多时候信号会有一定程度的畸变，如电压暂升/暂降，谐波等，这样类型的信号需要用真有效值的表进行测试才能保障测试的准确性。

另外还有变频/逆变器等设备，由于信号的变化程度较大，如直流变交流，交流变直流，整个过程涉及频率、真值的变化，若要测试其真实值，需要用到低通滤波的功能。

因此在初期选型时，需要了解真实的测试需求，针对性地提供或采取合理的解决方案，才能确保测试结果的可靠性和真实性。

以上内容由安泰测试整理，安泰测试为客户提供选型、销售、培训、维修等一站式服务，如需样机SY或者演示服务，欢迎咨询安泰测试。