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如何测量RNA浓度

晴黎露 2017-11-01 05:29:11 1197  浏览
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全部评论(1条)

  • Snoworlove 2017-11-02 00:00:00
    一般通过总量,纯度与完整性三大项检测来确认RNA质量: 1总量:微量分光光度计测260nm吸收值计算。 2纯度:微量分光光度计测260nm/230nm吸收值的比值,用于评估有机溶剂残留;260nm/280nm吸收值的比值,用于评估蛋白质污染比例。 3完整性:以Agilent Bioanalyzer进行毛细管电泳(capillary electrophoresis),并以软件的RIN(RNA Integrity Number)分数评估,10为RNA完整性Z好,0为Z差。 RNA质检参数中260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值。其中: A230: 测定其它碳源物质,如酚,糖类等。 A260:核酸的吸收峰测,测RNA,DNA,引物等的浓度用的。 A280:蛋白质的吸收峰。 一般的,我们只看OD260/OD280(Ratio,R)在1.8~2.1范围内时,我们认为 RNA中蛋白的污染是可以容忍的,不过要注意,当用 Tris 作为缓冲液检测吸光度时,R 值可能会大于 2(一般应该是<2.2的)。当R 1.8时,溶液中蛋白的污染比较明显,可以根据自己的需要决定这份RNA 的命运。当R > 2.2时,说明RNA已经水解成单核酸了,而纯RNA的OD260/OD280的比值为2.0。

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在线测量NaOH 溶液的浓度

       氢氧化钠 (NaOH),也称为苛性钠,是一种强碱,极易溶于水。

当NaOH溶解在水中时,

它会形成碱性溶液,

并且是工业中常用的强碱之一。

       对于 NaOH 水溶液,浓度与密度或声速值之间存在很好的相关性。这样一来,通过测量密度和声速,就可以获得精确的浓度测量值 (图 1)。

       NaCl 的电解是Z重要的苛性钠生产方式,其中膜电池工艺是Z新的技术,其简易工艺流程图见下方 (图 2)。

       从上图中我们发现, 25-32% 浓度的 NaOH 离开电解槽,并且必须通过测量密度 (D) 或声速(S) 来维持安全浓度,避免对膜产生损坏。在蒸发步骤中,由密度传感器控制,将 NaOH 溶液进一步浓缩至约 50%。

       大多数生产的 NaOH 以 50% 的水溶液进行交易和运输,但其他浓度也可进行商业交易。在运输 NaOH 时,必须控制货物的质量以及卸载的安全性。通过在输送到储罐之前,测量运输液体的密度或声速,即可保证这两点。通过在整个交付过程中进行连续浓度测量,就可以很容易地检查供应商是否按照合同交付。安装在化工厂加注站的 L-Dens 7400 + Pico 3000 可用于控制卡车交付。

       对于许多工艺,经过高度浓缩的化学品都是通过卡车输送并储存在不同的罐中。并在使用前将它们稀释至所需浓度。其简易的工艺流程如下所示:

       通过测量密度 (D) 或声速 (S),即可参照所需的浓度和精确度,控制稀释过程。一个示例应用就是饮料或食品制造商对于 CIP 化学品的稀释。

       由于 NaOH 溶液的强碱性质,需要使用特殊的材料和仪器。安东帕提供两种设置,专为在线测量二元 NaOH 溶液的浓度而设计。

       ·NaOH 密度监测仪:L-Dens 7400 INC 版本 + Pico 3000 模拟版本

       ·NaOH 声速监测仪:L-Sonic 5100 MON 版本 + Pico 3000 模拟版本

       就使用 L-Dens 7400 INC 版本密度传感器对 NaOH 溶液进行连续密度测量。该传感器采用 Incoloy 825 制成的接液部件,可以直路或旁路安装在主线上可以删除了。

       使用 L-Sonic 5100 MON 版本测量 NaOH 溶液的声速。该传感器采用 Monel 400 制成的接液部件,使用 DN 50 或 ANSI 2” 法兰直路连接管道或搅拌容器。


       对于这两种设置,都使用 Pico 3000 变送器自动计算温度补偿浓度值。

       针对NaOH溶液测量规范以及参数如下:

       安东帕创建于1922 年,总部位于奥地利。安东帕在密度和浓度的测量,溶解二氧化碳的测定,以及在流变学和粘度测量领域处于世界ling先地位。致力于为工业和科客户提供Z合适的仪器,产品范围涵盖密度计、微波消解仪、微波合成仪、旋光仪、折光仪、黏度计、流变仪、馏程分析仪、闪点测试仪、x射线结构分析、固体表面电位分析仪、表面力学性能测试仪器、在线分析检测仪表、颗粒特性分析、原子力显微镜以及固体材料直接表征等。

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