植物dna提取的原理和方法？其中乙醇和氯仿一异成醇各起什么作用

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  jmbmbmbmbm 2017-11-22 00:00:00

  植物DNA提取方法是采用CTAB法。 CTAB，是一种阳离子去污剂，能与核酸形成复合物，此复合物在高盐(>0.7mol/L) 浓度下可溶，并稳定存在，但在低盐浓度(0.1～0.5mol/L NaCl)下CTAB-核酸复合物就因溶解度降低而沉淀，而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。经离心弃上清后，CTAB-核酸复合物再用70%酒精浸泡可洗脱掉CTAB。 无水乙醇：沉淀DNA。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。 氯仿：克服酚的缺点；加速有机相与液相分层。 异戊醇：减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

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